简介:TILLING(TargetingInducedLocalLesionsInGenomes)即定向诱导基因组局部突变技术,是近年发展起来的一种高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究从PCR模板量及酶切体系中CELI的酶量两个方面对家蚕TILLING技术的检测体系进行了优化。结果表明:本实验在应用TILLING技术筛选家蚕突变体过程中,用于PCR扩增的家蚕基因组DNA模板最佳用量为20ng;CELI酶切的20μL反应体系中,加入的最适酶量为0.5μL(本实验室从芹菜中自提的CELI酶10倍稀释液)。本研究初步对TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测体系进行了优化,为TILLING技术在家蚕功能基因组研究中的应用奠定了基础。
简介:在感染桑树根结线虫病田块里,用噻唑膦、阿维菌素、吡虫啉、灭线磷、毒死蜱、辛硫磷、淡紫拟青霉和厚孢轮枝菌8种农药的9种制剂进行土壤消毒处理后,栽种敏感品种——桂桑优12健康桑苗,结果显示以5.5%阿维·噻唑膦颗粒剂防治效果最好,达92.32%;10%噻唑膦颗粒剂防治效果次之,为88.42%;对家蚕的残毒期最长的是5.5%阿维·噻唑膦颗粒剂,为67d。结合桑树根结线虫的生活习性、根结线虫病的发病规律和广西的气候特点,提出了土壤翻晒、土壤细作、土壤药剂消毒和桑苗药剂浸根等一套有效防治桑树根结线虫病的技术措施。测试结果表明,应用该技术措施,在重病区的桑园重新种植桑树,桑树根结线虫病的田间根结防效达95%以上,对家蚕的残毒期为67d,值得推广应用。