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  • 简介:目的:建立一简便对抗体相对亲和力进行定性比较酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和力突变体。方法:将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为一抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法方法准确性进行验证。结果:通过方法获得抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出结果一致。结论:ELISA方法简便可行、准确有效抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体亲和力成熟比较研究。

  • 标签: 抗体亲和力 定性比较 酶联免疫吸附测定
  • 简介:目的:阐明头圈小儿手术中预防负极回路垫小儿头部灼伤作用.方法:收集小儿外科2h以上全麻手术100例,年龄0-3岁,随机分为实验组对照组,每组各50例.对照组术前头部垫头圈与小儿负极回路垫绝缘;实验组不做特殊处理.手术结束后观察小儿头枕部皮肤有无灼伤.结果:实验组小儿灼伤例数达10例,灼伤达20%,其中重度灼伤1例.对照组无灼伤.讨论:在手术过程中,电刀作用至关重要.然而由于患儿局部面积小,导致负极板黏贴难度大,所以临床小儿外科手术多用负极回路垫作为电刀负极回路.小儿外科手术过程中,由于负极垫收集电流始终产生热能,以及小儿头枕部接触面积小,肌肉菲薄且摩擦力大,常有术后导致小儿头枕部灼伤.故我们术前预防性放置患儿头圈将枕部悬空,与负极垫绝缘隔离.根据实验观察,放置头圈后患儿头枕部灼伤发生明显降低.因此,小儿外科术前预防性放置头圈,尤其长时间手术者预防患儿术后头枕部灼伤有明显作用,应做为小儿外科术前常规准备.

  • 标签: 负极回路垫 小儿头枕部灼伤 头圈
  • 简介:目的:研究严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白甘油三酯总胆固醇含量影响。方法:检测分析144例SARS患者甘油三脂总胆固醇含量发病后变化;将小鼠随机分组,分别注射生理盐水SARS-CoVN蛋白,连续给药9d后检测小鼠血清中甘油三酯总胆固醇含量变化。结果:SARS患者甘油三酯总胆固醇含量随发病时间有升高变化(P〈0.05),发病40d前后甘油三酯总胆固醇含量超标的病例数占本时间段内病例数比例显著高于其他时间段,而且超标的含量也明显升高。SARS-CoVN蛋白使小鼠体重明显高于对照组(P〈0.05),甘油三酯含量3951d明显高于对照组(P〈0.05),总胆固醇含量2139d也明显高于对照组(P〈0.05)。结论:SARS-CoVN蛋白可以升高小鼠甘油三酯总胆固醇含量,升高最为明显时间段与SARS患者甘油三酯总胆固醇含量升高时间段基本一致。由此推测,SARS-CoVN蛋白可能促使SARS患者发病后甘油三酯总胆固醇含量升高重要原因。

  • 标签: 严重急性呼吸系统综合征 冠状病毒 N蛋白 甘油三酯 总胆固醇
  • 简介:目的:探讨联合检测人附睾蛋白4(HE4)、血清糖类抗原125(CA125)199(CA199)绝经后卵巢可及综合征(PMPOS)中应用价值。方法:采用化学发光法(CLIA)检测125例PMPOS患者及60例健康志愿者(对照组)血清HE4、CA125CA199水平,其中PMPOS患者分为良性肿瘤组(良性组,n=50)恶性肿瘤组(恶性组,n=75)。结果:PMPOS恶性组患者血清HE4、CA125CA199水平均显著高于良性组,有统计学差异(P〈0.05);也显著高于对照组,有统计学差异(P〈0.05)。良性组CA125水平略高于对照组,有统计学差异(P〈0.05);但CA199HE4水平与对照组比较无明显差异,无统计学差异(P〉0.05)。三者联合检测用于诊断PMPOS恶性肿瘤敏感度达到81.2%,而特异度也保持90.0%。结论:联合检测HE4、CA199CA125可有效提高PMPOS恶性卵巢肿瘤诊断效率,具有较大临床意义。

  • 标签: 人附睾蛋白4 糖类抗原125 糖类抗原199 绝经后卵巢可及综合征
  • 简介:目的:采用Clontech公司第3套酵母双杂交系统,筛选与甲状旁腺素1型受体(PTH1R)相互作用蛋白。方法:将全长P册JR基因克隆到载体pGBKT7作为诱饵,用LiAc介导将诱饵蛋白质粒pGBKT7-PTHIR人肾cDNA文库质粒转化到酵母菌AH109中,检测Mell报告基因表达,并进行相互作用验证。结果:测序相互作用验证结果表明SNAPIN酵母系统中能特异地与PTH1R相互作用;根据SNAPIN基因功能分析,可能与细胞内稳态调控有关。结论:为进一步研究PTH1R促进骨肉瘤进展机制提供了一定线索。

  • 标签: 甲状旁腺素l型受体 酵母双杂交 相互作用 SNAPIN
  • 简介:为了研究通过功能筛选得到一个新红细胞分化相关全长cDNA(命名为EDRFI)功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRFI表达细胞功能影响.通过快速构建,同时得到了正向反向插入片段真核表达载体pcDNA3-EDRFI-S(sense)及peDNA3-AS(antisense),并通过改进LipofectAMINE细胞转染G418筛选,得到了稳定表达细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染高效性.NorrhemB10t试验结果表明,反义载体转染K562细胞中,EDRF1mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA表达可能抑制了EDRF1mRNA正常转录.进一步,γ-珠蛋白PKC-α表达反义构建质粒转染K562细胞中表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化负反馈信号,从而抑制了珠蛋白合成.

  • 标签: 反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-Α 信号转导 γ- 珠蛋白
  • 简介:克隆河南人免疫缺陷病毒(HIV)感染者HIV-1B型株tat基因完整编码框序列,并分析比较编码产物序列结构特点.使用重叠PCR技术,从河南省1名HIV-1感染者外周血标本中扩增出tat基因第一第二外显子并重组为完整tat基因序列.获得HIV-1B病毒株tat基因,第一外显子为263bp,第二外显子为214bp.将该基因编码产物与其他HIV-1株Tat蛋白经DNA软件编辑并翻译成蛋白质,使用ClustalX1.81进行多序列对比分析发现,第一外显子编码产物3个保守区域氨基酸组成大致相同,只有少数氨基酸存在差异.由于Tat蛋白不同病毒株间有高度保守Cys富集区、核心区碱性氨基酸富集区,tat基因克隆为研究其功能并以其为靶点设计筛选抗艾滋药物奠定了基础.

  • 标签: HIV-1 tat 序列分析 克隆 感染 B型
  • 简介:目的:观察分析瑞芬太尼应用于腹腔镜下全子宫切除术麻醉临床效果。方法:选取该类患者224例,基于随机分组原则将其分作均等观察组对照组,观察组患者接受"瑞芬太尼+丙泊酚"麻醉,对照组患者接受"芬太尼+丙泊酚"麻醉,比较两组实际麻醉效果结果:麻醉效果等方面,观察组均优于对照组,且差异明显具有统计学意义,P<0.05。结论:腹腔镜下全子宫切除术中,瑞芬太尼具有较为理想麻醉效果,不仅有助于患者尽快尽好恢复,同时还具有不良反应相对较少优点。

  • 标签: 瑞芬太尼 腹腔镜下全子宫切除术 麻醉效果 观察分析
  • 简介:多子小瓜虫引起淡水鱼类小瓜虫病原,预防控制目前国内外较难解决问题之一。我们系统综述了抗小瓜虫中草药特性、作用机制、国内外应用处方及效果,并未来中草药抗小瓜虫研究方向提出展望。

  • 标签: 小瓜虫病 淡水鱼 中草药 研究进展
  • 简介:生物质谱蛋白质组学研究必不可少关键技术.近年来,生物质谱在鉴定通量、分辨灵敏度等方面均有质飞跃,从而促进了蛋白质组研究各个领域飞速发展.本文就生物质谱技术原理、技术仪器发展现状,及其蛋白质组学研究中应用进展作一简要综述.

  • 标签: 生物质谱 蛋白质组
  • 简介:肥胖已经成为一社会现象,发病过程复杂,危害严重。近年来研究表明,肥胖由食欲能量调节紊乱引起疾病,与遗传、环境、膳食结构多种因素有关,其中基因主要决定因素。最近人和小鼠肥胖基因被相继克隆,发现它能在脂肪组织特异表达,编码蛋白Leptin可作用于下丘脑,产生抑制摄食、减轻肥胖、减少体重作用。此外,它还对生殖系统、造血系统有调节作用。

  • 标签: 肥胖基因 瘦蛋白 瘦蛋白受体
  • 简介:波对生物组织影响越来越受到人们重视。现选取次声波、超声波毫米波为代表,概述波对生物组织作用相应机理。提出从波能量角度出发,结合构成生物组织物质本身特性,研究开发波对生物组织更多有利作用。

  • 标签: 次声波 超声波 毫米波 生物组织
  • 简介:目的探讨腹腔镜下子宫腺肌病灶切除局限型子宫腺肌保守手术治疗临床价值.方法回顾分析我院20111201312月收治13例术后确诊子宫腺肌诊治过程.其中4例无明显症状,3例渐进性经期下腹痛,5例经量增多、经期延长,1例排便困难,13例均行腹腔镜下子宫腺肌病灶切除,无-例中转开腹.结果手术时间60分钟90分钟,出血量80ml-220ml,术后48小时低热未超过38℃,术后6例出现阴道流血如月经量,72小时内下腹闷痛尚可忍受,术后4-6天出院,术后1月、3月复查彩超子宫,3月时子宫基本正常,有症状患者均明显改善.结论腹腔镜下子宫腺肌病灶切除,对局限型子宫腺肌要求保留子宫者可行,创伤小,术后恢复快,住院时间短.

  • 标签: 子宫腺肌病 腹腔镜 病灶切除
  • 简介:目的:评价不同比重浓度罗哌卡因腰硬联合麻醉急诊剖宫产术中应用效果,分析麻醉母婴相关指标的影响.方法:20142月~201412月,产科罗哌卡因腰硬联合麻醉急诊剖宫产术产妇50例,产妇25例为A组(0.75%原液)、25例纳入B组(0.5%罗哌卡因),对比相关指标.结果:A组与B组感觉阻滞起效时间、感觉恢复时间、最高感觉阻滞平面到达时间、运动阻滞恢复时间、不同时间段MAP与HP水平、镇痛、肌肉松弛程度、牵拉反应程度、不良反应发生统计学意义(P〉0.05);6min后,A组与B组MAP、HP低于术前,12min后低于6min后,20min低于12min,45min高于20min,差异具有统计学意义(P〈0.05);A组PCO2、PE低于B组,差异具有统计学意义(P〈0.05).结论:急诊剖宫产术中应用罗哌卡因腰硬联合麻醉安全可靠,麻醉不良反应发生效果确切,0.5%罗哌卡因可满足需要,且新生儿影响更小.

  • 标签: 急诊剖宫产 腰硬联合麻醉 罗哌卡因 母婴预后
  • 简介:文章就胶体金免疫层析技术基本应用原理极其所具有的应用特点进行简要阐述,主要针对寄生虫检测中胶体金免疫层析技术应用做出分析。

  • 标签: 交体检免疫层析技术 寄生虫 检测 特点 应用
  • 简介:基因芯片又称DNA微阵列,分为cDNA微阵列寡聚核苷酸微阵列.DNA微阵列技术探索基两组功能强有力工具.扼要介绍基因芯片、表达谱芯片技术原理,以及基因芯片技术肿瘤基因组学中应用

  • 标签: 基因芯片 DNA微阵列 表达谱芯片 肿瘤基因组学
  • 简介:随着科学技术快速发展,越来越多新型材料被研究出来并且广泛地运用,纳米材料就是最具有代表性新型材料,它出现使很多领域中难题得到了解决.纳米作为一直径极小、灵敏度以及选择性超高特殊材料,已经被用于电化学生物传感器研发当中,本文将对纳米材料电化学生物传感器中应用进行简单分析研究,希望能够为传感器研制提供一些帮助.

  • 标签: 纳米材料 电化学 生物传感器
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白