简介:目的建立一种简便、高效、准确的测定岩藻聚糖硫酸酯中岩藻糖的方法.方法采用超声处理(300W100%,20℃,20min);三氟乙酸(4mol/mL)水解(110℃、2h);亲水作用色谱-蒸发光检测(HILIC-ELSD)法检测,WatersXBridgeTMAmide(150mm×4.6mm,3.5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水-氨水(90∶10∶0.2),体积流量1mL/min,柱温60℃.结果岩藻糖的线性范围为0.1004~1.004mg/mL(r=0.9994),平均加样回收率95.22%(n=6,RSD=1.16%).结论该方法简便、快速、准确,为岩藻聚糖硫酸酯的定量分析和质量评价研究提供了依据.
简介:摘要目的探讨核心蛋白聚糖(DCN)对膀胱癌细胞增殖、迁移及其侵袭的影响。方法以膀胱癌T24细胞株为研究对象,利用MTT法检测24、48、72、96 h不同浓度(0、5、10、20、30、40、50 mg/L)DCN对T24细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析DCN对T24细胞周期及凋亡的影响,MTT法、Transwell细胞迁移和细胞侵袭实验分别检测DCN对T24细胞的黏附、迁移及侵袭的影响,ELISA及蛋白质印迹法分别检测DCN对TGF-β1和P21蛋白表达的影响。结果用浓度为0、5、10、20、30、40、50 mg/L DCN处理T24细胞,在24、48、72、96 h时细胞增殖活力差异均具有统计学意义(F=168.64,P<0.001;F=165.81,P<0.001;F=291.02,P<0.001;F=148.93,P<0.001);用0、5、10、20、30、40和50 mg/L浓度的DCN处理T24细胞72 h时,细胞增殖活力分别为(60.71±3.03)%、(40.82±2.09)%、(37.24±1.63)%、(25.65±2.55)%、(23.00±2.67)%、(10.78±1.17)%、(11.04±0.96)%,差异具有统计学意义,40 mg/L浓度时增殖活力达到最低水平,对细胞增殖的抑制作用最强。40、50 mg/L浓度时G1期细胞达到高峰值,S期达最低,整个处理过程G2期始终保持不变。0、5、10、20、30、40、50 mg/L浓度DCN作用72 h时的细胞凋亡率分别为(12.18±1.17)%、(21.24±1.05)%、(19.80±1.20)%、(26.52±1.40)%、(30.86±1.40)%、(52.99±1.22)%、(43.04±2.16)%,差异具有统计学意义(F=178.54,P<0.001);5、10、20、30、40、50 mg/L浓度DCN凋亡率与0 mg/L浓度DCN相比,差异均具有统计学意义(均P<0.001)。DCN作用于T24细胞72 h时,0、40 mg/L浓度时的细胞黏附率分别为(37.14±1.35)%、(59.86±1.95)%,差异具有统计学意义(t=25.25,P<0.001);迁移细胞数分别为53.86±3.18、12.86±1.35,差异具有统计学意义(t=31.36,P<0.001)。DCN作用于T24细胞48 h时,0、40 mg/L浓度时的侵袭数分别为235.14±3.44、160.86±3.13,差异具有统计学意义(t=2.27,P<0.001)。当T24细胞被DCN处理72 h后,0、5、10、20、30、40、50 mg/L浓度时的TGF-β1相对表达量分别为85.67±3.35、45.51±1.19、49.93±4.15、47.64±3.53、46.05±3.18、25.54±2.25、33.44±4.05,差异具有统计学意义(F=324.58,P<0.001),与0 mg/L相比,5、10、20、30、40、50 mg/L浓度均对TGF-β1的表达有明显的抑制作用(均P<0.001);与0 mg/L浓度相比,P21蛋白经40 mg/L DCN处理72 h后上调。结论DCN在体外能够抑制T24细胞增殖,诱导其凋亡,并具有抗T24细胞转移的作用。
简介:通过浸涂方式将聚乙二醇接枝改性壳聚糖(PEG-g-CS)与没食子酸纳米银复合物在皮革表面形成复合涂层,采用扫描电子显微镜(SEM)及接触角测量仪表征了该涂层的微观形貌和亲水性,而且以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)、革兰氏阴性菌大肠杆菌(E.coli)为细菌模型,分别采用抑菌圈法及振荡法、吸光度法进行了抗菌评价。结果表明,该复合涂层有明显的抑菌圈,且循环使用3次后2h内杀菌率均高达99%以上,具有高效抗菌性;另外,复合抗菌剂整理皮样对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌在长时间内均能抑制其生长,具有长效抗菌性。这种优异的抗菌性是由于复合涂层将PEG的阻抗细菌黏附、壳聚糖接触杀菌及纳米银释放银离子杀菌进行了有机协同,使得该复合涂层成为皮革或皮革制品的理想抗菌涂层。