简介:摘要目的探讨美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP7-A3在评价肌酐(Cr)测定干扰因素中的应用。方法根据CLSI EP7-A3文件,采用实验当天新鲜血清(无溶血、脂血、黄疸),通过配对差异实验确认干扰物质,通过剂量效应实验中应用点对点分析方法明确干扰物质带来的结果差异。结果甘油三酯16.94 mmol/L、盐酸多巴酚丁胺4.01 μmol/L、抗坏血酸298 μmol/L对Cr测定无干扰,以游离胆红素684 μmol/L、结合胆红素684 μmol/L、羟苯磺酸钙144 μmol/L、血红蛋白10 g/L为最大干扰物浓度做剂量效应实验,结果显示以上干扰物对Cr测定有负干扰。结论按照EP7-A3评价肌酐测定的干扰因素有一定的应用价值。
简介:摘要目的了解干扰素治疗慢性乙肝实现血清HBsAg消失后免疫控制的稳定性。方法30例经干扰素治疗并出现血清HBsAg消失(或转换)的慢性乙肝中度患者,随访3年以上,观察血清HBsAg、HBVDNA及肝功稳定情况。结果有5例出现HBsAg反跳,其中3例伴HBVDNA及ALT反弹,重复干扰素治疗1年实现HBsAg、HBeAg血清转换,其中1例停用干扰素不久出现抗核抗体及血清补体下降,蛋白尿,确诊为狼疮后激素治疗3月即呈现为HBsA、HBeAg、HBVDNA及ALT均上升,选择恩替卡韦维持治疗实现完全应答;2例未出现HBVDNA及ALT反跳的患者,在之前的干扰素治疗中未实现HBeAg消失但伴补体下降,选择替比夫定维持治疗,其中1例维持HBsAg阴性而HBeAg阳性,另1例则为HBsAg阳性、HBeAg阴性。结论干扰素治疗慢性乙型肝炎实现血清HBsAg消失或转换后部分患者于1年内可能出现乙肝复发,需要继续加以管理。
简介:摘要外泌体(exosomes)是细胞内源性的小囊泡,大多数哺乳动物细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。外泌体已成为细胞间通讯的重要介质,用于传递膜和细胞溶质蛋白、脂质和RNA的载体。近年来,小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)已经成为病理生理疾病治疗的潜在选择,但是不良的生物利用度限制了其治疗潜力。为了实现RNA药物的治疗潜力,必须开发有效的、组织特异性的和非免疫原性的递送技术。目前已经研究了几种载体,其中外泌体被认为是有效递送siRNA的可行的载体,这里将主要对外泌体及外泌体能作为siRNA递送的天然载体进行概述。
简介:目的分析干扰素治疗慢性丙型肝炎对甲状腺功能的影响。方法收集2014年1月-2016年12月收治的慢性丙型肝炎轻度、中度及早期肝纤维化患者40例作为研究组,选取同期健康体检者30例作为对照组,采用化学发光免疫分析法检测研究组干扰素治疗前、中、后甲状腺激素及抗体水平,并与对照组比较。结果研究组出现甲状腺疾病8例(20.0%),其中甲亢5例,甲减3例。研究组治疗前血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的阳性率分别为15.0%(6/40)和12.5%(5/40),对照组TGAb和TPOAb的阳性率分别为0和6.7%(2/30),2组TGAb和TPOAb阳性率比较差异均有统计学意义(P〈0.05);且研究组治疗后TGAb和TPOAb的阳性率均低于治疗前(P〈0.05)。研究组治疗前甲状腺激素水平均在正常范围,但游离三碘甲状原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)均显著低于对照组(P〈0.05)。研究组治疗后FT3、FT4均显著升高,与治疗前比较差异均有统计学意义(P〈0.05);研究组治疗过程中TSH较治疗前有明显增高(P〈0.05),随着治疗的进展TSH逐渐恢复正常。结论慢性丙型肝炎患者可存在甲状腺功能异常,干扰素治疗中可出现一过性甲状腺激素代谢紊乱,其中TSH的检测更灵敏,TGAb、TPOAb可作为干扰素(IFN)治疗中甲状腺疾病发生发展的预测因素。
简介:目的探索构建针对人类核转运蛋白2(KPNA2)基因的重组慢病毒干扰RNA(shRNA)载体的方法,研究其对人骨肉瘤细胞株MG63的沉默效率。方法针对KPNA2基因设计小片段干扰序列。加入AgeⅠ酶和EcoRⅠ酶酶切位点,根据设计好的序列合成单链DNAoligo并退火合成双链DNAoligo。将合成好的双链DNAoligo与GV115载体重组,形成GV115-shRNA慢病毒载体。聚合酶链式反应(PCR)法鉴定筛选出阳性重组子,经测序后包装慢病毒载体。荧光法测定病毒滴度,重组慢病毒感染骨肉瘤细胞株MG63,通过显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达来计算其转染效率。RT-PCR法检测重组慢病毒RNA干扰载体对人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2表达的沉默效率。实验结果数据以均数±标准差(sx±)表示,应用SPSS13.0统计软件分析,两组均数间的比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计意义。结果经PCR分析和测序证实,成功构建KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体;荧光法测定病毒滴度为4×108TU/ml;荧光显微镜下观察GFP,显示细胞感染效率达到80%以上;RT-PCR检测对照组及实验组KPNA2mRNA表达分别为0.991±0.087vs.0.216±0.012,差异有统计学意义(P<0.01)。结论KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体构建成功,并有效干扰人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2mRNA的表达。
简介:目的构建shRNA并干扰肝癌HepG2细胞中BC047440基因,观察其对肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法根据BC047440基因序列,设计和合成两条特异表达该基因shRNA序列并克隆载体pGenesil-1,转染肝癌HepG2细胞并用定量PCR观察抑制BC047440基因表达的效果,并通过MTr法和流式细胞仪检测细胞增殖及细胞周期的变化。结果酶切和序列测定提示成功构建了特异表达BC047440基因的shRNA1和shRNA2两个质粒。shRNA1和shRNA2对BC047440mRNA的抑制率分别为80.22%和58.63%。干扰BC047440基因后,肝癌HepG2细胞增殖受到明显抑制,主要停滞在s期。结论构建的shRNA能有效干扰肝癌HepG2细胞BC047440基因的表达,并抑制肝癌HepG2细胞的增殖,提示BC047440基因和肝癌HepG2细胞增殖有关。
简介:目的为评价环境内分泌干扰物的拟雌激素活性及其对雌性小鼠乳腺功能的影响,探讨其对人类生殖健康的潜在危害。方法采用雌性性成熟昆明种小鼠,按体重随机分为高剂量、中剂量及低剂量3个实验组和1个溶剂对照组,每组8只。采用腹腔注射染毒,氧化乐果染毒剂量分别为400、40、4mg/kg体质量,每天腹腔注射1次,左右下腹交替进针,注射体积为0.1mL/(20g·d),溶剂对照组给予等量,连续染毒14d。分析天平称重,比较染毒前后小鼠的体重变化,并取左侧乳腺固定,切片,染色,在光学显微镜下观察乳腺组织病理学变化。结果通过对定时有计划的给药的小白鼠的实验,得出内分泌干扰物对小白鼠乳腺组织影响的数据,分析这些数据来说明环境内分泌干扰物对人和动物的危害程度。结论氧化乐果具有拟雌激素活性,影响小鼠乳腺组织的结构和功能,对乳腺组织有毒性作用。
简介:【摘要】:目的 观察分析 小儿手足口病患儿联合应用 干扰素与 炎琥宁治疗的临床 疗效。方法 选择我院小儿科 2018 年 5 月 -2019 年 8 月收治的 88 例手足口病患儿作为本次的研究对象,随机分为相同例数的对照组和联合组,每组各有患儿 44 例。对照组患儿采用静脉滴注利巴韦林进行治疗,联合组患儿干扰素与炎琥宁联合应用进行治疗。比较两组患儿的临床疗效以及体温恢复正常时间、手足皮疹消退时间、口腔溃疡消退时间和住院时间。结果 联合组患儿的临床总有效率显著高于对照组( 95.45% VS 77.27% ),差异有统计学意义( P<0.05 )。与对照组患儿比较,联合组患儿的体温恢复时间、手足皮疹消退时间、口腔溃疡消退时间以及住院时间均明显降低,差异有统计学意义( P < 0.05 )。结论 小儿手足口病患儿联合应用 干扰素与 炎琥宁治疗取得 的临床 疗效满意 ,可以快速改善患儿的临床症状和体征,缩短住院时间,值得在临床上进行大力推广应用。