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  • 简介:目的:研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者外周血和关节滑膜液淋巴细胞CD25、HLA—DR表达,探讨其在RA致病中作用。方法:采用流式细胞仪检测RA患者外周血和关节滑膜液淋巴细胞CD25、HLA—DR表达,并设立正常对照组。结果:RA患者外周血表达CD25T淋巴细胞和B淋巴细胞,与正常对照组相比明显增多(P<0.01);关节滑膜液表达CD25B淋巴细胞和表达HLA—DRT淋巴细胞和B淋巴细胞,与正常对照组相比亦明显增多(P<0.01)。结论:外周血和关节滑膜液淋巴细胞CD25、HLA—DR表达增高,在RA发病机制中起着重要作用。

  • 标签: 关节滑膜液 CD25 HLA 外周血 关节炎患者 DR
  • 简介:目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA表达水平,并进行疾病活动性相关分析。方法:用PrimerExpressv2.0软件,根据GenBank提供序列,在人IL-2RαmRNA第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA,加入已优化一步法FQ—RT—PCR反应体系,扩增产物经凝胶电泳后切胶回收,并与pUCm—T载体连接。制备好重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后,用T7RNA聚合酶转录为cRNA,作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因表达水平,结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度,探讨与炎症活动相互关系。结果:成功构建了cRNA标准品。该方法线性范围为7~107cells/ml,其批内CV8.4%,批间CV9.6%;扩增产物克隆双向测序结果经BLAST比较、分析,证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性强直性脊柱炎测定表明:与正常人对照组结果比较,HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0.01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价灵敏度为96.7%。结论:FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者免疫状态,可能为免疫药物疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上信息。

  • 标签: 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 IL-2RΑ 强直性脊柱炎 TaqMan mRNA检测 应用价值
  • 简介:2005年3月18日至3月21日,由全国高等学校教学研究中心委托,重庆医科大学承办全国“21世纪中国高等学校医学检验专业课程体系与教学内容创新与实践”立题工作会议在重庆召开。来自全国27所医学院校院长、系主任、教务处等共40余名代表参加了会议。教育部高等教育出版社生命科学分社副社长栾钢、重庆医科大学校长雷寒教授、副校长董志教授、教务处长黄祖春教授等参加会议并讲话。栾副社长介绍了“全国高等学校教学研究中心”当前有关工作情况,和开展“21世纪中国高等学校应用型人才培养体系创新与实践”课题立项研究背景情况。

  • 标签: 专业课程体系 高等学校 21世纪 教学内容 医学检验 会议纪要