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  • 简介:目的为了探索基质金属蛋白酶9(MMP9)在糖尿病视网膜病变(DR)进展的潜在调节机制。方法利用Lipofectamine2000将pcDNA-MMP9质粒和pcDNA-Ang2质粒分别转染至原代大鼠视网膜Müller细胞(RMCs)。分别利用MTT法与流式细胞仪检测细胞生存率与凋亡情况。同时探索了MMP9与血管紧张素2(Ang2)之间的交互作用。另外,RMCs分别在正常血糖水平与高血糖水平下用MMP9处理2天。此外,通过Western印迹测定细胞凋亡蛋白MMP9、Ang2、Bax2、Bcl2、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)降解产物、天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase3)降解产物的表达水平。结果与对照组相比,siRNA-MMP9组细胞生存率显著增长而MMP9过表达组下降。与对照组相比,MMP9过表达组细胞凋亡显著增加,而siRNA-MMP9组则下降。MMP9表达由Ang2显着调节,而当MMP9表达改变时,Ang2表达无明显变化。再者,高血糖组MMP9的表达显著性增加,而正常血糖组与对照组比较差异无统计学意义。另外,高血糖组Bax2,Bcl2,PARP降解产物、caspase3降解产物的表达也显著增加,相应地对照组与正常血糖组则没有显著性改变。结论我们的研究结果表明,MMP9通过由Ang2调控或定位细胞凋亡相关蛋白(如Bax2,Bcl2,PARP降解产物、caspase3降解产物)诱导细胞凋亡,在DR进展扮演着一个重要角色。

  • 标签: 糖尿病视网膜病变 基质金属蛋白酶9 ANG2 凋亡
  • 简介:和传统的凝胶技术相比,毛细管等电聚焦(CIEF)是一种蛋白质的快速分离技术。它可以分离等电点相差0.004的蛋白质。但是其较差的重现性和分辨率限制了CIEF的广泛应用,尤其是在高pI值范同内的广泛应用。然而,采用动态涂层的CIEF可以明显改善这些现象。

  • 标签: 毛细管等电聚焦 高分辨率 涂层 电渗流 控制 分离技术
  • 简介:通过液液分配和固相萃取提取、净化动物组织添加的莱克多巴胺、沙丁胺醇,TMS衍生化试剂BSTFA衍生化,气相色谱-质谱联用对衍生物检测分析,确定了动物组织莱克多巴胺、沙丁胺醇的定性、定量分析方法,该法检出限为0.5μg/L,衍生物的峰面积与样品浓度在1μg/L-1000μg/L范围内都呈良好的线性关系,线性回归系数均为0.9998。不同组织莱克多巴胺加标回收率分别为:肝脏74.8%-85.8%,脂肪71.2%-80.6%,肌肉75.0%-82.7%,肾脏72.0%-82.9%;相对标准偏差为23%-5.2%。沙丁胺醇加标回收率分别为肝脏70.5%-76.7%,脂肪72.7%-79.5%,肌肉72.6%-78.5%,肾脏72.5%-75.8%;相对标准偏差为1.8%-5.2%。

  • 标签: 固相萃取 气质联用 莱克多巴胺 沙丁胺醇 选择离子监测
  • 简介:第一章前言目前,肥胖问题已经成为21世纪人类面临的艰巨问题,美国甚至把肥胖问题和吸毒,枪支泛滥并列成为最严重的社会问题。传统的减肥方法根本不能满足大多数人的要求。近些年的研究发现,脂肪酸合成酶(FAS)可能是治疗肥胖和癌症的双重靶点,但是目前脂肪酸合成酶的抑制剂少之又少。已知的抑制剂浅蓝菌素有一定的毒性,

  • 标签: 脂肪酸合成酶 酶抑制剂 葡萄籽提取物 活性测定 化学成分 社会问题
  • 简介:通过对王水(1+1)消解土壤方法的优化,利用双道原子荧光光度计的双道检测优势,优化仪器条件,同方法、同步测定土壤的砷和汞。结果表明:王水(1+1)消解方法的优化可实现土壤砷、汞的同步测定,这个方法是简便、快速、准确和精确的,提高了土壤砷和汞的检测速度。

  • 标签: 双道原子荧光 同方法 同步 土壤