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  • 简介:改良了神经致幻型毒菌活性色胺类物质比色检测方法。利用白灵菇子实体稀醋酸提取液替代水作为空白对照,检测结果更为客观、准确;筛选到了不使用硫酸显色剂配方,降低了操作过程中危险性。探讨了改良比色法在毒菌活性色胺类物质半定量和定量检测中应用。结果表明,该方法可以用于毒菌总活性色胺类物质半定量检测;结合薄层层析法,还可以用于特定毒素定量检测。

  • 标签: 改良比色法 神经致幻型毒菌 活性色胺 薄层层析
  • 简介:用人成骨肉瘤细胞系LJH-OS传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整纤维包膜,未见肺转移,观察7周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7周时有明显消瘦。原位移植裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤浸润及转移表达.裸鼠胫骨原位移植模型恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者实际情况,该原位移植模型建立为骨肉瘤研究提供了良好实验模型。

  • 标签: 胫骨 原位移植模型 裸鼠 人骨肉瘤 肺转移 皮下移植
  • 简介:目的观察马齿苋及其不同提取部位改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱影响。方法应用小剂量链脲佐菌素加高热量饲养方法建立实验性2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型、马齿苋、马齿苋MH部位、马齿苋MS部位及多烯康对照,并设正常对照,各组大鼠相应地给与灌胃治疗12周;检测各组糖代谢及脂代谢血生化指标。结果糖代谢方面,马齿苋能明显改善实验性2型糖尿病大鼠糖耐量异常,FINS明显低于模型,相应地ISI显著提高;马齿苋MH部位具有改善实验性2型糖尿病大鼠糖耐量异常趋势,FINS水平有所下降,ISI有所增加,与模型比较接近统计学意义;而马齿苋MS部位2型糖尿病大鼠糖耐量异常影响不大,改善胰岛素作用不明显。脂代谢方面,马齿苋与模型比较,显著升高血清HDL-C水平,同时降低血清TC、TG和FFA水平。马齿苋MH部位与模型比较,显著降低血清TG水平,同时降低血清TC和FFA水平,但升高血清HDL-C水平不明显。马齿苋MS部位与模型比较,显著降低血清FFA水平,降低血清TG接近统计学意义,但对血清TC和HDL-C水平无明显影响。结论马齿苋能明显改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗糖代谢异常。马齿苋MH部位具有改善糖代谢趋势,而马齿苋MS部位糖代谢影响不明显。马齿苋及其马齿苋MH部位、马齿苋MS部位2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗脂代谢异常均有明显改善作用,但其侧重点各有不同,可能与其作用环节和机制不同有关。

  • 标签: 马齿苋 糖尿病 2型 胰岛素 代谢
  • 简介:目的探索BALB/c和C57BL/6个品系在有关实验中不同作用。方法选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成神经系统表达些基因反义核酸(antisense)中2个,用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB/c和C57BL/6小鼠侧脑室,并分别设注射生理盐水和随机序列核酸(Scramble)对照。每反义核酸实验和对照各注射10只小鼠,之后观察实验与对照在不同行为学实验中差异。小鼠行为学检测模型为:考察日常代谢能力摄食量,考察Locomotionactivity(移动)旷场行为,考察疼痛阈值甩尾试验和考察记忆能力步下法实验。结果注射No.1基因反义核酸后,品系实验均在测试记忆力步下法(Step-downTest)试验中表现出记忆力减弱,且与对照差异明显,说明No.1基因功能确与记忆相关。注射No.2基因反义核酸后,在测试移动能力旷场行为(OpenFieldBehavior)试验中,BALB/c实验跨格、直立行为均比对照明显减少,说明受此反义核酸影响显著,而C57BL/6实验则与对照无大差异。此外,在生理盐水对照和随机序列核酸对照实验中以及其他行为学模型实验中,品系也存在着差异。结论用遗传背景不同多品系进行相关实验,可进步建立新基因功能初筛中有显著结果基因复筛平台;同时,实验结果对于进步研究什么样品系适用于什么样实验将具有较大意义

  • 标签: 对照组 反义核酸 注射 行为学 实验 C57BL/6小鼠
  • 简介:按照人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因成熟肽编码序列设计合成引物,从人基因DNA中扩增出360bp片段,插入到改构载体pTIG-trx上,获得了pTIG-trx-BDNF原核表达重组质粒,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为hBDNF基因成熟肽编码序列.将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并对表达产物进行了分离纯化,得到纯度大于83%样品,Western杂交证实该蛋白具有hBDNF抗原活性.

  • 标签: 重组人脑源性神经营养因子 可溶性表达 大肠杆菌 纯化 中枢神经系统退行性疾病
  • 简介:目的用种新制备单克隆抗体MAb03.2Cl-C2鉴别生物学形态相近白念珠菌和都柏林念珠菌。方法用小鼠体内诱导法制备抗白念珠菌芽管胞壁外膜单克隆抗体MAb03.2Cl-C2。用不完全RPMI1640培养液、L—DMEM、H—DMEM、完全1640液、小牛血清诱导白念珠菌和都柏林念珠菌芽管及菌丝形成,间接免疫荧光(IIF)方法检测都柏林念珠菌芽管或菌丝表面有无可与该单抗相结合成分。收集临床口腔念珠菌病标本涂片,直接做IIF试验。结果用不完全RP-MI1640培养液37℃,6h可同时最高效率地诱导白念珠菌和都柏林念珠菌芽管或菌丝形成。单抗MAb03.2Cl-C2仅与白念珠菌芽管或菌丝特异性地结合,与都柏林念珠菌孢子和菌丝不能结合。结论单抗MAh03.2Cl-C2可用于白念珠菌和都柏林念珠菌实验室速鉴别。

  • 标签: 白念珠菌 都柏林念珠菌 特异性 单克隆抗体
  • 简介:在已明确我国存在甲霜灵抗性菌株基础上,通过单游动孢子分离技术获得马铃薯晚疫病菌DZO1和HZO1无性后代菌系。研究了无性单游动孢子后代菌系生物学特性及甲霜灵抗性,主要结果如下:无性后代菌系菌落形态、生长量和产孢能力进行测定,发现被测DZO1和HZO1无性后代菌系大部分菌株生物学性状与亲本菌株相比没有发生明显变异,个别菌株生物学性状与亲本菌株有显著差异。说明晚疫病菌无性繁殖未引起较大变异;后代菌系甲霜灵抗性水平进行测定,结果表明DZO1和HZO1无性后代菌系甲霜灵抗性水平与其对应亲本菌株基本相同。

  • 标签: 致病疫霉 生物学特性 甲霜灵 抗药性
  • 简介:测定我国小型猪来源猪内源性反转录病毒(PERV)3"LTR,以便于PERV全基因克隆和分析。用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,从五指山猪外周血淋巴细胞mRNA中扩增到PERV-3"LTR,并克隆入pGEM-Teasy载体,将阳性克隆进行序列测定和同源性分析。测序结果显示该克隆3’端尾部有个由12个A组成poly(A)信号;其R区与PERV-MSLR区(约64bp)基本致,同源性分析表明其与PERV-MSL3"LTR具有81%序列同源性。说明成功扩增了我国五指山猪来源PERV-3’LTR,将有利于PERV全基因克隆。

  • 标签: RACE 五指山猪 猪内源性反转录病毒 3’长末端重复 同源性分析
  • 简介:本研究使用伊曲康唑(商品名美扶,天津力生制药生产)口服治疗复发性念珠菌性生殖器感染患者98例,获得了满意疗效,现报告如下:1资料与方法1.1临床资料196例患者均来自2000年1月~2005年6月本院皮肤科门诊,男性114例,女性82例,年龄19~55岁,年龄19~55岁,病程3个月~1年,复发次数最少2次;均经临床和真菌学检查确诊为念珠菌性生殖器感染患者

  • 标签: 伊曲康唑 念珠菌性生殖器炎症 复发性
  • 简介:由于国际上对转基因产品安全性存在较大争议,因此没有加施标签予以声明情况下大量进入中国市场转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大.本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料,通过比较分析外源CP4-EPSPS基因核苷酸序列和表达氨基酸序列,设计出不同引物,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源CP4-EPSPS基因进行了检测.

  • 标签: 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-EPSPS PCR CP4-EPSPS基因 检测
  • 简介:构建了二氢叶酸还原酶(dhfr)选择基因启动子上游无增强子(cnhancer)组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)组合突变体FrGGI真核表达质粒pZLFrGGI。将pZLFrGGI酶切线性化,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷型中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-dhfr-)。用氨甲喋呤(MTX)筛选转染细胞。混合加压后,挑选克隆,在1×10-7mol/LMTX压力下,得到了表达水平达1500~2500IU/106细胞·24小时细胞株。此细胞株表达水平稳定,形态良好,倍增时间为36小时,且有进步提高表达水平潜能,有望发展为工程细胞株。

  • 标签: 组织型纤溶酶原激活剂 突变体 基因表达 增强
  • 简介:目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素.6(IL-6)和环加氧酶-2(COX-2)表达影响,探讨其治疗骨质疏松症作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3:正常血清、卵巢切除(OVX)血清和OVX含药血清。采用免疫化法,检测成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2表达。结果OVX血清组成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2表达明显强于正常血清,而OVX含药血清表达较OVX血清明显减弱,与正常血清比较,则无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸可能是通过抑制成骨细胞IL-1、IL-6和前列腺素E2(PGE2)分泌,进而达到治疗骨质疏松作用。

  • 标签: 左归丸 成骨细胞 白细胞介素类 前列腺素内过氧化物合酶
  • 简介:绿脓杆菌是烧伤及外科手术感染主要病原菌之,而绿脓杆菌外毒素A(PEA)是该菌最主要毒力因子之,极微量PEA便可引起肝、肾等组织细胞死亡,进而导致肝、肾等多器官功能衰竭,这是临床上绿脓杆菌感染后高死亡率主要原因。同时,PEA还严重影响创口愈合。目前临床上对于绿脓杆菌感染控制以及PEA毒血症防治尚无有效方法与手段。本实验是利用基因工程手段克隆表

  • 标签: 受体结合区蛋白 绿脓杆菌感染 外毒素A 生物学活性 包含体 外科手术
  • 简介:[目的]建立禽流感H5N1病毒感染恒河猴动物模型,探讨禽流感在哺乳类动物发病机制。[方法]通过“环甲膜穿刺术”经气管注射鸡胚培养禽流感H5N1病毒(AF148678;ACGoose/Guangdong/11961H5N1)感染恒河猴,观察恒河猴染毒后出现临床体征,用显微计数法检测外周血白细胞动态变化,用ELISA检测禽流感病毒特异性抗体变化规律,用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞及其亚群动态变化。在染毒后第1天、第3天、第10天和第14天分别剖杀染毒恒河猴1只,HE染色观察主要组织器官病理变化,用病毒分离、免疫化和RT-PCR三种方法分析禽流感病毒侵袭机体特点。[结果]临床症状和体征:急性起病,表现为发热,呼吸困难,精神状态下降,活动度明显减少,食欲下降,咳嗽,紫绀等,肺部听诊双肺可闻及干、湿音。1、病理特点:以肺部损伤为主,伴多器官病变。肺部病变主要表现为弥漫性肺泡损伤,先后经历渗出期、增生期和纤维化期;在肝脏、肾脏和中枢神经系统中也观察到变性、坏死等病理变化。2、病毒侵袭机体特点:病毒只在呼吸系统中复制,不在呼吸道以外组织器官中复制;肺内支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞和肺巨噬细胞是...

  • 标签: H5N1禽流感病毒 恒河猴 非人灵长类动物模型 病理变化 免疫组织化学 病毒分离
  • 简介:在全国上下加快实施自主创新战略、建设创新型国家进程中,我们迎来了国家自然科学基金委员会成立20周年纪念日。20年来,自然科学基金委员会投入约180亿元资金,择优资助了10万余个项目,其中些资助项目成为国家重大科技计划项目的先导。在推进源头创新方面,国家自然科学基金委员会取得了日益显著成绩,成为支举足轻重力量。

  • 标签: 国家自然科学基金委员会 自主创新 力量 源头 评论 计划项目
  • 简介:乙肝病毒前S1抗原含多个免疫优势表位及乙肝病毒肝细胞受体结合位点,具有重要生物学功能.为使其高效、可溶性表达,在DnaStar软件辅助分析下,将前S1基因5′端复杂二级结构突变后,克隆入原核表达载体pQE-30a,转化大肠杆菌M15感受态细胞,经IPTG诱导后,获得了高水平、可溶性表达;并进行了纯化和鉴定,为进步研究乙肝病毒前S1抗原结构功能特点奠定了基础.

  • 标签: 乙肝病毒 前S1抗原 可溶性表达 突变体 大肠杆菌 表达
  • 简介:中国生理学会将在2006年11月在北京召开中国生理学会第22届全国会员代表大会,换届选举新理事会。因4年中会员信息变化较大,按照学会惯例需进行会员重新登记及编印新《会员各录专辑》,以便选举各省、市、自治区代表和理事候选人,不具备会员资格者不能被推荐,且姓名不能编进《会员名录专辑》。常务理事会还决定按照惯例每4年次在代表大会前征收会费(2007—2010年4年次性交纳会费160元;至2007年当年已达65岁会员,次性交纳150元将成为终身会员;2006年年龄已到65岁会员,如本届已经交过50元或100元者,请补齐会费至150元即可)。2004年按上级要求调整了会员会费标准,本届会费从50元提高到了100元,目前,有些会员先期交了50元,还应补交会费50元(先期未交50元者,本届应补交会费100元),可与下届会费并交齐,学会合开张发票。2006年新要求入会者请交纳212元,其中会费200元(2006—2010五年有效),入会手续费12元。

  • 标签: 会员代表大会 会费 征收 名录 中国生理学会 常务理事会
  • 简介:将不同剂量重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)与脱钙骨基质(DBM)分别复合后,植入小鼠股部内侧肌间隙,三周后取材,通过组织学检查、碱性磷酸酶(ALP)及钙含量测定比较各组骨诱导活性.结果显示,三复合物均有骨组织生成,中、高剂量可见骨小梁、板层骨和原始骨髓腔,血管和骨髓丰富;低剂量成骨量明显少于中、高剂量,且新骨成熟度低于其他,DBM少部分吸收;单独植入rhBMP-7有编织骨形成;而DBM可见成骨细胞聚集.rhBMP-7/DBM复合组在ALP和Ca含量水平上与同等剂量对照相比均有显著性差异(P<0.01),而rhBMP-7三种剂量之间均有显著性差异(P<0.01).这充分说明DBM作为rhBMP-7合适载体,具有缓释作用,且二者复合可起到双重骨诱导活性;而且rhBMP-7骨诱导活性具有剂量依赖性.

  • 标签: 重组人骨形态发生蛋白-7 RHBMP-7 脱钙骨基质 DBM 骨诱导 剂量依赖性