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  • 简介:以田间幼嫩叶片为试材,建立枣RNA改良CTAB提取法,改良之处包括利用巯基乙醇和PVP联合去除多酚、CTAB与异硫酸氰胍联合促进RNA释放及加入糖原提高产率等。改良CTAB法提取液组成:2%CTAB,4mol/L异硫酸氰胍,100mmol/LTris-HCl(pH8.0),20mmol/LEDTA(pH8.0),2%PVP,4%β-巯基乙醇,250μg/ml糖原。进而采用Trizol试剂法、改良CTAB法、改进SDS-酚法、热硼酸法异硫氰酸胍法5种方法分别对枣组培苗、幼叶、幼嫩枝皮、根皮枣果5种器官组织进行了总RNA提取。结果表明,组培苗RNA提取以Trizol试剂法为最佳,田间幼叶和成熟果实宜采用改良CTAB法,幼嫩枝皮根皮宜采用改良CTAB法或改进SDS-酚法;本研究建立改良CTAB法可作为枣不同器官组织RNA提取通用方法;根据季节可从不同器官组织中获得高质量RNA;枣组织RNA含量相差较大,以幼嫩叶片含量最高,其次为组培苗、枝皮、枣果根皮。

  • 标签: 器官 组织 总RNA提取
  • 简介:通过检索近10a国内外期刊发表资料包括以往河北医科大学第四医院皮肤科报道临床资料,复习、探讨国内外有关儿童老年人真菌感染概况防治对策。结果发现儿童老年人真菌感染有上升趋势。儿童浅部真菌病主要是皮肤念珠菌病和头癣,老年人浅部真菌病主要是手、足癣甲癣;深部真菌病主要是念珠菌病,其他依次为隐球菌病、曲霉病、马尔尼菲青霉病、毛霉病等。由于深部真菌病诊断困难,目前主张对高危人群,应及早给予预防治疗经验治疗,一旦确诊应根据患者具体情况药敏监测等确立具体治疗方案。

  • 标签: 真菌感染 儿童 老年人
  • 简介:目的探讨面癣致病菌、临床特点、易感年龄等相关因素。方法分析本院门诊2012年1—6月真菌直接涂片镜检发现菌丝或孢子面癣患者。记录患者一般资料、有无动物接触史、有无并发其他部位浅部真菌病、用药史。取皮屑直接镜检同时进行真菌培养鉴定。结果面癣见于各年龄段,在51—70岁之间有一个年龄高峰。分离皮肤癣菌103株,包括红色毛癣菌70株(68.0%)、犬小孢子菌21株(20.4%)、须癣毛癣菌10株(9.7%)、石膏样小孢子菌2株(1.9%)。合并其他浅部真菌病、使用激素类药物、动物接触史是面癣发病重要因素。部分炎症明显面癣使用医用拭子取材,可以提高真菌涂片培养质量。结论不典型面癣容易误诊,需要高质量真菌镜检培养,降低面癣误诊率。

  • 标签: 面癣 真菌学 临床分析
  • 简介:黍稷是起源于中国黄河流域黄土高原地区最古老作物。本文从世界农业种植业历史、作物起源环境黍稷演化过程谈起,结合山西地理生态特点、悠久农耕历史文化、新石器时代遗址发现和数量众多、类型丰富黍稷种质资源,说明山西是黍稷起源遗传多样性中心。

  • 标签: 山西 黍稷 起源 遗传多样性 中心
  • 简介:为了揭示云南薏苡种质资源多样性,发掘薏苡资源中有益基因,利用主成分分析聚类分析,对收集65个薏苡种质资源13个农艺性状进行多样性评价。结果表明,云南薏苡资源存在丰富遗传多样性,其中栽培种分枝数分蘖数遗传变异系数分别达到57.4%47.5%,野生种百粒重遗传变异系数达到60.4%。应用主成分分析将云南薏苡13个性状简化为7个主成分,其累积贡献率为85.67%,以叶片宽因子贡献率最高,为49%。采用系统聚类分析,将65份供试材料在遗传距离16.21水平上聚为5个大类,可区分为株高较矮叶片较短型、株高较高叶片较长型以及3个特殊型。

  • 标签: 云南薏苡 主成分分析 聚类分析 遗传多样性
  • 简介:1制定此策略目的为广大皮肤科医生(尤其是基层医生)提供甲真菌病临床治疗方案及药物选择指导意见;针对特殊患者甲真菌病临床治疗指导意见;治疗失败情况临床治疗方案建议;对不具备真菌检查条件或者真菌学检查阴性情况下,根据主要临床诊断线索提供治疗指导意见。

  • 标签: 甲真菌病 诊疗 策略
  • 简介:探讨2种分子标记技术在沉香属药用植物遗传多样性研究中应用。用ISSRAFLP分子标记分析了海南、云南、广东、广西等地17份沉香属植物遗传多样性。14个ISSR引物、8对AFLP引物分别检测到119、919个位点,多态性位点百分率分别为73.95%、86.94%。由于AFLP标记具有较高多态性位点检测效率,AFLP标记分析遗传多样性参数高于ISSR。虽然基于Nei's遗传距离聚类分析结果存在着一定差异,但用Mantel检测对2种方法检测遗传一致度进行相关性分析表明,二者之间存在着明显相关性(r=0.7705,P=0.0003)。ISSR标记与AFLP标记均能应用于沉香属植物遗传多样性研究。2种标记研究结果均揭示出沉香属植物具有较高遗传多样水平。

  • 标签: 沉香属 遗传多样性 ISSR AFLP
  • 简介:本研究选用了来自国外及国内68份分蘖型谷子进行了表型及遗传多样性分析。表型分析表明,质量性状以绿鞘、白谷黄米、圆锥穗、松散穗码居多,数量性状变异系数除出谷率较小外,其他性状表现了丰富遗传变异,来自山西小软谷单株穗重、单株穗粒重、千粒重均为最高,而来自黑龙江大青谷单株穗粒重、出谷率、千粒重均为最低。遗传多样性分析结果表明,77对引物共检测出202个等位位点,每对引物可检测到1~6个位点不等,平均为2.62个;77对引物多态性信息含量(PIC)在0.0283~0.6974之间,平均多态性信息(PIC)为0.4169,68份材料间遗传相似系数变化范围为0.59~0.96,平均值为0.68。利用软件NTSYSpc2.10UPGMA聚类方法对68份谷子分蘖材料进行了聚类,这些材料被划分为4个类群,即Ⅰ、Ⅱ、ⅢⅣ。Ⅰ类群主要来自西北地区谷子分蘖种质,Ⅱ类群主要来自国外谷子分蘖种质,Ⅲ类群包括华北、华东东北谷子分蘖种质,Ⅳ类群仅包括一个种质。结合表型鉴定出10份优势谷子分蘖种质。这些结果揭示68份谷子分蘖种质遗传多样性较好,研究结果为挖掘谷子分蘖优良基因及谷子分蘖育种提供理论依据。

  • 标签: 谷子分蘖种质 表型 遗传多样性 聚类分析
  • 简介:茶树种质资源是生产利用、品种创新和生物技术研究物质基础,具有十分重要价值意义.本文系统阐述了近20年中国茶树种质资源考察收集、保存编目、鉴定评价、分子标记、遗传稳定性等研究主要成就与进展.着重提出近期继续征集、在资源个体与基因水平上深入鉴定评价、加强种质创新不断提供新基因源、建立核心种质、建立种质资源共享平台等研究工作建议和展望.

  • 标签: 茶树 树种 种质资源研究 鉴定评价 种质创新 核心种质
  • 简介:无绿藻是直径3~30μm不等单细胞微生物,进行无性繁殖,内含特征性内孢子。无绿藻病是一种罕见、散发疾病,目前认为小型无绿藻、中型无绿藻、P.blaschkeaeP.cutis对人有致病性。直接镜检、真菌培养、组织病理学是无绿藻分型鉴定传统方法,近年来,分子生物学技术可将菌株鉴定至亚种或变种,成为无绿藻分型鉴定又一重要手段

  • 标签: 无绿藻 分类 药物敏感性 鉴定 分子生物学鉴定
  • 简介:基因枪农杆菌介导遗传转化是目前常用两种单子叶植物遗传转化方法。载体发展改良是提高植物遗传转化效率重要基础,RNA干扰载体过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性通用克隆技术,该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法,构建了适用于单子叶植物基因枪农杆菌转化RNA干扰Gateway载体pAHC.PSK—RNAi、pClean—G185.RNAi过表达Gateway载体pAHC.PSK—OEpClean—G185一OE,为利用基因枪农杆菌介导遗传转化,在小麦水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。

  • 标签: 单子叶植物 遗传转化 RNA干扰 过表达 GATEWAY
  • 简介:目的构建白念珠菌CaCSC1基因基因缺失株,并初步探究它功能。方法设计引物,通过PCR直接扩增出带有SAT1flipperCaCSC1基因敲除盒,转化到野生型白念珠菌菌株CAI4,并通过PCR鉴定出基因型正确转化子,得到CaCSC1基因缺失株。最后,通过倍比稀释方法进行表型筛选。结果成功得到CaCSC1基因缺失菌株。基因缺失菌株对酮康唑(Ketoconazole)敏感,对Zn2+、Mn2+荧光增白剂(Calcofluorwhite)表现出耐受性。结论CaCsc1蛋白参与对锌离子锰离子稳态调控,细胞膜细胞壁完整性也相关。

  • 标签: 白念珠菌 CaCSC1基因 基因敲除 离子稳态
  • 简介:以抗旱玉米自交系旱21为材料,克隆获得玉米分子伴侣基因ZmBiP1,通过荧光定量PCR技术研究ZmBiP1基因表达模式,并将ZmBiP1基因转入拟南芥中研究其功能。荧光定量PCR结果表明,ZmBiP1基因在玉米自交系旱21不同组织器官中均有表达,且在子房中表达最高。ZmBiP1基因受甘露醇胁迫诱导上调表达,受盐胁迫诱导下调表达。转基因拟南芥功能验证结果表明,过表达ZmBiP1基因导致拟南芥在种子萌发时期对盐甘露醇胁迫耐受能力减弱。这些结果表明ZmBiP1基因可能是逆境反应信号传递途径负调节因子。

  • 标签: 玉米 分子伴侣 ZmBiP1 拟南芥 逆境胁迫
  • 简介:通过EMS(Ethylmethylsulfonate,甲基磺酸乙酯)诱变豫谷1号获得一个遗传稳定谷子小穗突变体si-sp1,该突变体突出表现为穗部变小,同时伴随有株高降低、单码小花数减少根系变小等表现型变异。与野生型豫谷1号相比,突变体株高分别降低了37.8%9.0%,单穗粒重单码小花数分别降低了40.3%31.7%,但千粒重增加了20.2%。遗传分析表明,si-sp1突变性状由1对隐性基因控制。以si-sp1为母本、辽谷1号为父本构建F2定位群体隐性单株,将突变基因定位在8号染色体上CAAS8003与SSR1038间约11.02M距离内,为下一步精细定位并分离该基因奠定了基础。

  • 标签: 谷子 小穗 遗传分析 基因定位
  • 简介:大白菜是重要蔬菜作物,准确鉴定大白菜品种对于大白菜种质资源管理、新品种测试、种子质量检测等具有重要意义。本研究从已定位到大白菜10个连锁群205个SSR标记中,筛选出30个在连锁群上分布均匀、PCR扩增稳定、带型简单标记,用于大白菜品种DNA指纹鉴定。对入选引物用4种荧光染料进行了标记,利用基于毛细管电泳荧光检测DNA分析仪对SSR扩增产物进行检测。通过比较分析2种不同型号3台DNA分析仪扩增片段检测数据,明确了不同DNA分析仪检测数据间一般存在明显系统误差。系统误差大小取决于引物,一般在1~4bp之间。使用扩增产物片段长度对各SSR位点不同等位变异进行命名。通过使用一组参照品种,消除了不同批次、不同DNA分析仪型号间系统误差,保证了检测数据可重复性可再现性。在此基础上,对184份大白菜品种进行了DNA分子数据采集。

  • 标签: 大白菜 SSR 品种鉴定 DNA指纹
  • 简介:目的对北京地区HIV非HIV人群抗耶氏肺孢子菌(Pneumocystisjirovecii,Pj)主要表面糖蛋白(Majorsur-faceglycoprotein,Msg)IgG、IgM抗体滴度水平进行调查,探索其在流行病学调查中价值.方法利用重组Msg融合蛋白作为抗原建立酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),用阴性标准血清等比例稀释样本血清建立相对定量抗体检测方法,对176例HIV感染者226例非HIV人群血清样本进行抗PjMsgIgGIgM抗体定量水平调查,所有入选患者临床均不诊断肺孢子菌肺炎(Pneumocystispneumonia,PCP).结果抗PjMsgIgG抗体在非HIV人群中阳性率为42.5%(113/266),113例阳性标本中1∶100、1∶200、1∶4001∶800滴度分别为77例(68.1%)、15例(13.3%)、6例(5.3%)15例(13.3%);抗PjMsgIgG抗体在HIV感染者中阳性率为24.4%(43/176),43例阳性标本中1∶100、1∶200、1∶4001∶800滴度分别为28例(65.1%)、10例(23.3%)、3例(7.0%)2例(4.7%),与非HIV组相比差异无统计学意义(χ2=4.254,P=0.235).抗PjMsgIgM抗体在非HIV人群中阳性率为41.7%(111/266),111例阳性标本中1∶100、1∶200、1∶4001∶800滴度分别为57例(51.4%)、21例(18.9%)、19例(7.1%)14例(12.6%);抗PjMsgIgM抗体在HIV感染者中阳性率为12.5%(22/176),22例阳性标本中1∶100、1∶200、1∶4001∶800滴度分别为10例(45.5%)、2例(9.1%)、4例(18.2%)6例(27.3%),与非HIV组相比差异无统计学意义(χ2=3.788,P=0.285).结论非PCP人群中抗PjMsgIgG抗体定量水�

  • 标签: 耶氏肺孢子菌 主要表面糖蛋白 抗体 定量
  • 简介:对国家果树种质资源南京桃圃保存507份桃种质资源进行了花期、花型、花径、雌蕊高度(与雄蕊比)、花粉育性调查,结果表明,需冷品种花期早于其他大部分种质资源,始花期以及花期持续时间与当年气候花期天气尤其是温度有关.84.4%种质资源具蔷薇形花,78.5%铃形花种质资源为黄桃;66.1%种质资源花径在3.7~4.7cm,花径最大是观赏鲜食兼用重瓣花种质资源花玉露;90.5%种质资源雌蕊高于或近等于雄蕊,蟠桃88.2%种质资源雌蕊低于雄蕊;花粉可育种质资源443份,占种质资源总数87.4%.

  • 标签: 种质资源 花径 雌蕊 开花特性 雄蕊 花器
  • 简介:根据转录组测序获得钙依赖蛋白激酶基因EST序列设计特异引物,利用RT-PCRRACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNAgDNA全长分别为2115bp2857bp,含有11个内含子12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型特征,含有1个激酶区域4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达最高,其次为茎、根种子,花中表达最低;在高抗高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种表达相比高感品种分别提高1.4倍、4倍3倍,推测其可能参与油菜生长发育以及油菜对菌核菌侵染应答防御反应。

  • 标签: 油菜 钙依赖蛋白激酶 基因克隆 基因表达 抗病
  • 简介:涮辣雀辣是我国云南地区有特色两个地方品种。本文分别基于园艺性状90份不同类型辣椒资源利用均匀覆盖12条染色体29个SSR标记进行聚类分析。研究结果表明,园艺性状以及分子水平上涮辣归属于中国辣椒(C.chinese),雀辣更倾向归属于灌木辣椒(C.frutescens)。

  • 标签: 植物学分类 园艺性状 遗传结构 进化树
  • 简介:InDel在基因组中分布密度仅次于SNP,可作为动植物群体遗传分析、分子辅助育种等研究领域有效分子标记。花生是世界范围内重要油料作物之一。目前,花生栽培种全基因组已经公布,为准确挖掘花生基因组信息提供了重要参考。本研究通过169份花生核心种质GBS(Genotyping-by-sequencing)测序比对,共获得大小分布在1~14bp范围内10401个InDels。染色体Arahy.16上分布InDels最多,达741个;而在染色体Arahy.08上分布最少,有263个。参考基因组注释信息,仅有1167个InDels分布在功能基因相关区域。经GO注释,InDel分子功能主要包括催化活性(catalyticactivity)结合(binding);生物过程主要涉及代谢过程(metabolicprocess)、单组织过程(single-organismprocess)细胞过程(cellularprocess)。经KEGG通路分析发现,InDels所在基因区域功能主要与代谢相关。本研究开发出全基因组水平InDel标记,并做了相应功能分类注释,为进一步分子验证利用提供丰富基因资源。

  • 标签: InDels检测 InDels分布 功能分析