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  • 简介:目的:观察DcR3基因小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因表达影响。方法:建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体注射脂质体与DcR3siRNA混合物,转染DcR3siRNA,免疫组织化学及RT-PCR检测观察DcR3基因表达。结果:建立了结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型;治疗后,治疗组移植瘤明显减小,空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组(P〈0.01);各组肿瘤组织中DcR3基因均有不同程度表达,治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组(RT-PCRP〈0.05,免疫组化P〈0.01)。结论:人结肠癌SW480细胞在裸鼠皮下有良好成瘤性;脂质体与DcR3siRNA混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤内DcR3基因表达。

  • 标签: 结肠癌 SW480细胞 DcR3基因 小干扰RNA 裸鼠 脂质体
  • 简介:暴光荏苒,转眼2006年已近岁末。在历史长河中,这也许只是短短,寻常年。然而,对于正在崛起中国,2006年则是至关重要时期,它必将成为我国科技发展史上个里程碑——作为第十一个五年计划开局之年,今年颁发了社会主义市经济条件下制定个中长期科学发展规划《国家中长期科学和技术发展规划纲要》,

  • 标签: 技术世界 创刊 生物 科学发展 科技发展史 经济条件
  • 简介:目的:构建人血清白蛋白(hSA)与小鼠乳清酸蛋白(mWAP)调控序列杂合基因座。方法与结果:在pBR322载体上连入预先无痕连接3对同源臂,利用基于Red同源重组系统缺口修复(gap-repair)技术,分别对8kbmWAP基因座3′调控区、16kbhSA基因组编码序列及13kbmWAP基因座5′调控区进行连续3次基因抓捕,最终将全长37kb乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座中编码序列被精确地置换为hSA基因组编码序列。结论:构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺中表达效果及置换型基因座表达可行性提供了数据。

  • 标签: 小鼠乳清酸蛋白 人血清白蛋白 缺口修复 细菌人工染色体
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:通过磁力搅拌,超声等方法将天然芸苔素内酯,农用链霉素,苦参素进行处理,制备种多效纳米生物复合制剂,作用于绿豆种子,进行对比试验,观察芽期生长状况。结果表明:适宜浓度范围内通过纳米制剂处理种子普遍比原剂处理种子发芽率高,芽长,芽粗,鲜重,干重均有不同程度增加。

  • 标签: 磁力搅拌 超声 芸苔素内酯 农用链霉素 苦参素 绿豆
  • 简介:目的:建立种便捷而经济将DNA溶液填充至显微注射针方法,以提高显微注射法转基因效率。方法:将通常用于转移胚胎口吸管稍加改进,吸取DNA溶液,从尾部直接注入显微注射针。结果:采用本方法填充显微注射针,可在2-5min完成DNA填充。结论:与传统方法相比,本法经济而高效,可加快显徽注射法制作转基因动物实验进程。

  • 标签: DNA填充 显微注射 口吸管 微量上样器
  • 简介:2009BioprocessInternationalChina大会于9月7日~8日在北京全茂威斯汀大饭店隆重召开。会议旨在交流当今国际生物技术和制药企业关心技术和能力,讨论了涵盖生物药物工程工艺价值链各个环节,通过了解最新技术研发成果和经验.与国际企业分享细胞培养和配方、细胞株工程和开发、蛋白配方及制造过程中次性使用/可抛弃产品等方面的最新进展.

  • 标签: 一次性使用 设备发展 生物实验 应用 生物技术 制药企业
  • 简介:目的:以角鲨烯、山梨醇、吐温为组分,在琥珀酸缓冲液中混和甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白制备复合佐剂Nano-fla,评价该佐剂对人二倍体狂犬疫苗免疫效果和安全性。方法:以人二倍体细胞制备狂犬灭活疫苗为抗原,BALB/c小鼠设置PBS对照组、全剂量疫苗组、半剂量疫苗组、低剂量佐剂组(含半剂量抗原+5μg鞭毛蛋白)、中等剂量佐剂组(含半剂量抗原+10μg鞭毛蛋白),免疫程序为在0、3、7d肌肉注射,并在首针免疫后第7、14d尾静脉采血分离血清,通过快速免疫荧光灶抑制实验检测中和抗体,通过酶联免疫斑点实验检测细胞因子水平。结果:首针免疫后第7d,中等剂量佐剂组中和抗体达保护效力水平,显著高于全剂量疫苗组和低剂量佐剂组;第14d时中等剂量佐剂组IgG抗体浓度显著高于全剂量疫苗对照组;第14d中等剂量佐剂组与全剂量疫苗组相比,分泌IFN-γ和IL-4淋巴细胞数量显著增加。结论:复合佐剂Nano-fla应用到狂犬疫苗中,能有效刺激小鼠体液免疫和细胞免疫应答,更早地产生中和抗体,且能有效降低抗原用量,具有潜在应用价值。

  • 标签: 鞭毛蛋白 狂犬病疫苗 佐剂
  • 简介:卤醇脱卤酶是细菌降解环境中重要污染物有机卤化物关键酶之,具有与其他已知脱卤酶不同脱卤机制。它是类通过分子内亲核取代机制催化邻卤醇转化为环氧化物脱卤酶,可以高效催化有机邻卤醇进行脱卤反应,在治理环境污染方面具有十分重要作用。此外,在催化环氧化物和邻卤醇之间转化反应中,卤醇脱卤酶具有很高立体选择性,因而在手性药物合成方面也有广阔应用前景。我们着重从卤化物生物降解途径、脱卤机制及应用等方面介绍了卤醇脱卤酶最新研究进展,同时对卤醇脱卤酶改造新方法进行了阐述与展望。

  • 标签: 卤醇脱卤酶 有机卤化物 生物降解途径 生物催化
  • 简介:目的:从污染环境中分离耐低温石油降解菌,并对其降解特性进行研究。方法:采用摇瓶富集培养和平板划线分离方法,得到株能以原油为碳源、能源生长细菌菌株,采用分子生物学方法对该降解菌进行初步鉴定。结果:从天津大港油田污染土壤和水体中分离到株耐低温石油降解菌DSY171,该菌株能够在10℃条件下,以石油为惟碳源生长。经过对其形态特征、生理生化及16SrDNA序列分析,初步鉴定该菌株归属红球菌属。菌株DSY171在低温条件下(10~15℃)12d石油降解率显著优于常温条件(20~30℃),原油降解率为60%左右;菌株DSY171pH适应范围较广,初始pH值为6~9时均能代谢生长,但在偏碱性环境下(pH7~9)代谢生长好于偏酸性环境(pH6~7)。除了降解石油外,菌株DSY171对柴油、食用油等不同碳源也均能够降解代谢,具有碳源利用广谱性。结论:耐低温石油降解菌DSY171分离及其降解特性研究,为生物学方法解决低温环境石油污染问题提供了高效菌种,在环境微生物学理论研究和实践应用中具有意义和价值。

  • 标签: 生物降解 低温 石油烃 红球菌
  • 简介:为适应经济社会快速发展需要,加快技能人才队伍建设,已经到了刻不容缓地步。根据《国家中长期人才发展规划纲要(2010—2020)》、《湖北省国民经济和社会发展第十二个五年规划纲要》和有关专项规定,到2017年,培养开发紧缺技能人才50万人,其中紧缺高技能人才10万人。然而却出现方面社会对人才需求量大,另方面,据调查40%以上园林中高职学生毕业后却并没有从事园林行业。就人才知识、能力、素质结构来看,究其主要原因还是学校培养方向与社会需求还存在着明显脱节。因此,如何进行体化教学改革,提高人才培养质量是职业院校的当务之急。

  • 标签: 一体化教学
  • 简介:目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量总RNA。方法:采用改进SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积醋酸钠和2倍体积无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA质量。结果:提取RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论:采用该方法提取总RNA纯度高、完整性好,适于进分子生物学研究

  • 标签: RNA提取 向日葵 航天诱变 多酚 多糖
  • 简介:在真核生物细胞中,许多具有生物活性多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白酶切割后激活形成.弗林蛋白酶(Furin)就是这个内切蛋白酶家族重要成员之,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白酶、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速而广泛研究,本文简介了它表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染关系,以及它抑制剂.

  • 标签: 弗林蛋白酶 前体蛋白 内切蛋白酶
  • 简介:探讨种菊科植物抽提物对小鼠血液生化成分影响.利用半自动生化分析仪测定血液生化成分,结果表明该抽提物可降低血清白蛋白和总蛋白含量;降低乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性和丙氨酸氨基转移酶活性;对血清中尿素、尿酸、肌酐都有明显降低作用;可减少血清二价金属离子Ca2+、Mg2+含量,增加Cl-含量;对碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清无机磷影响不明显.

  • 标签: 菊科植物 抽提物 小鼠 血液 生化成分 二价金属离子
  • 简介:从药用植物中华芦荟组织中分离出株抗菌内生细菌A11#,该菌产生广谱抗菌活性物质,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性细菌和植物病原真菌均有较强抑制作用;通过形态学观察及生理生化特征测定,初步鉴定归属于芽孢杆菌属(Bacillus).该菌在初始pH值为5.O~10.0PDA培养基上生长旺盛,生长最适pH为5~7,培养液初始pH为6~10时发酵产生大量粘性物质;生长温度范围在10~45℃,最适温度28~37℃;在初始pH5.0和30.5℃条件下发酵,其发酵液抑菌作用最强;该菌所产抗菌物质能耐121℃处理30min而不影响其活性.在阿须贝无氮培养基上生长良好,在不加葡萄糖、蔗糖或淀粉LB和牛肉膏蛋白胨培养基上不生长;同时还产生对高岭土有絮凝活性物质.

  • 标签: 芦荟 内生细菌 分离 鉴定 生物学性质 培养基
  • 简介:现代农业已经发展到了“分子农业”时代,基因工程、转基因技术等分子生物学手段广泛应用于植物遗传育种,基因组学研究成为植物基因资源发掘基本科学平台,分子育种成为植物育种最主要手段之。为加强与国际植物分子育种领域合作与交流,推动应用基因与组学植物分子育种科学发展,TheGenerationChallengeProgramme(全球挑战计划)、

  • 标签: 植物育种 分子育种 国际学术研讨会 三亚市 海南省 基因工程
  • 简介:人之初,性本善。每个人最初都拥有爱心,只是在成长过程中,生活环境和受到教育不同,人品行也发生了变化。幼儿时期尤其是孩子个性、品质形成重要时期,关键是成人怎样正确引导和培养。本人通过在日常生活中利用各种教育契机有目的、有计划地对幼儿进行'爱'行为教育,坚持在幼儿之间树立爱榜样,利用节日对孩子开展爱教育,充分利用文学艺术作品,对幼儿实施爱熏陶,通过家园共同合作教育,形成爱教育合力等等,使幼儿学会在享受爱同时,也懂得将爱付出,并最终让孩子成为富有爱心、乐于助人的人。

  • 标签: 幼儿感受 爱心教育
  • 简介:目的:建立种简便对抗体相对亲和力进行定性比较酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和力突变体。方法:将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟和后曲线判断抗体亲和力高低,并通过BIA-core法对该方法准确性进行验证。结果:通过该方法获得抗体亲和力高低情况与经测定抗体亲和力得出结果致。结论:该ELISA方法是种简便可行、准确有效抗体亲和力定性比较方法,可以应用于不同抗体亲和力成熟比较研究。

  • 标签: 抗体亲和力 定性比较 酶联免疫吸附测定
  • 简介:皮肤癌是种常见恶性肿瘤,大部分是基底细胞癌和鳞状细胞癌,85%以上基底细胞癌好发于颜面部[1].皮肤癌好发于暴露部位,尤以头面部居多[2].我院与2012年1月份为例99岁左面部皮肤癌患者行放疗,取得了理想效果.临床上皮肤癌以放射性治疗为治疗首选,皮肤癌位置表浅,边界清楚,直视下照射定位精确,对放射线特别敏感,而且皮肤耐受性较高,但考虑到患者99岁高龄并因骨折行动不便,肿瘤放疗风险大,几家医院均未收治.现为病人整个放疗过程护理做如下报道.

  • 标签: 高龄 皮肤癌 放疗 护理
  • 简介:目的:通过对例1例桥小脑角肿瘤患者护理病例讨论,探讨围手术期护理措施.方法:对我科收治1例桥小脑角肿瘤患者进行护理经验总结.结果:通过精心护理和治疗,病人恢复良好.结论:加强桥小脑角占位围手术期护理,是患者康复关键.

  • 标签: 桥小脑角 围手术期 护理