简介：目的：研究血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）基因沉默对D-（-）-MTX/A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法：采用siRNA技术沉默D-（-）-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因,细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2mRNA,Westernblot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果：VEGFsiRNA序列及阴性对照成功转染至D-（-）-MTX/A549后,VEGFmRNA表达水平明显下降,与阴性对照相比下降了2.29倍,差异具有统计学意义（P=0.002）,表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义（P〉0.05）。转染后,D-（-）-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降（P值均〈0.05）,D-（-）-MTX/A549耐药细胞MMP-2mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降（P值均〈0.05）。结论：抑制VEGF基因表达可以抑制D-（-）-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力,这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。
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