简介:摘要目的利用条件性重编程细胞(CRC)技术培养人源性前列腺癌细胞,为前列腺癌体外实验研究建立个体化原代细胞库。方法2019年1—4月共获取3例新鲜的前列腺癌病理组织标本,将标本分为2份,一份经术中快速冰冻病理检查确定为癌组织;另一份用0.25% EDTA酶消化为分散的悬浮单个的癌细胞,利用CRC技术对癌细胞进行培养。培养方法:将原代细胞与经30 Gy照射的3T3-J2小鼠成纤维细胞共培养于条件性培养基中,观察癌细胞克隆团生长情况。使用差异性消化对原代细胞进行传代:先用0.25% EDTA胰酶消化1 min去除饲养层细胞,PBS清洗后再用0.25% EDTA胰酶消化原代细胞。待癌细胞稳定后,通过免疫荧光、免疫组化染色、免疫印迹和荧光原位杂交技术等实验,验证所培养的癌细胞性质。结果体外利用CRC技术建立3例前列腺癌原代细胞株,细胞培养约15 d建系成功,并可持续稳定传代。细胞鉴定结果显示,所培养的细胞均表达AR、CK5、CK18和P504s,同时也弱表达PSA。荧光原位杂交技术显示细胞出现≥1.6%的TMPRSS2/ERG基因融合,这些现象符合前列腺癌的细胞特征。结论利用CRC技术能稳定地体外持续培养前列腺癌原代细胞。
简介:摘要医用负压吸引设备系统是一般大中型医院(特别是综合性医院)的重要共用医疗设备,各临床科室都要使用,部分医技科室也需使用,特别对于手术室、ICU等科室显得特别重要,直接会影响到患者手术和救治,因此系统的稳定可靠性要求高。我们应用PLC可编程控制器对老系统进行升级改造,就是为了提高负压吸引系统的可靠性,降低设备故障发生几率,提高设备完好率。
简介:摘要目的研发一款"酸碱平衡紊乱分析软件",用于快速判断酸碱平衡紊乱(酸碱失衡)的类型。方法以Henderson-Hasselbalch方程式和代偿公式为基础建立数学模型,确定酸碱失衡分析的重要参数,制定分析流程。使用Visual Basic 2010.NET编程语言完成软件的编译,调试后生成安装程序包。用计算机检索PubMed、万方和中国知网数据库中从1980至2015年发表的酸碱失衡案例文献,详细记录每个案例提供的血气参数〔pH、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、碳酸氢根(HCO3-)和阴离子隙(AG)〕及酸碱失衡类型(文献结果);使用软件对上述案例的酸碱失衡类型重新进行分析得出判断(软件分析结果),对两种判断结果进行Kappa一致性检验和McNemar配对χ2检验。结果以"四参数-四步骤"程序化分析方法作为判断酸碱失衡类型的分析流程。其中,"四参数"指pH、PaCO2、HCO3-和AG。"四步骤"概述为:①根据pH初步判定血气的酸碱状态,结合HCO3-、PaCO2判断酸碱失衡的原发类型;②根据代偿情况判断是否存在双重混合型酸碱失衡(DABD);③根据AG判断是否存在三重混合型酸碱失衡(TABD);④使用ΔAG↑/ΔHCO3-↓比值,判断AG增高型代谢性酸中毒(AG↑型代酸)是否同时伴有代谢性碱中毒(代碱)或AG正常型代酸。"酸碱平衡紊乱分析软件"具备界面简洁、操作方便、判断迅速、分析结果系统而全面的特点,可以判断除"AG正常型代酸合并代碱"以外的所有酸碱失衡类型。应用"酸碱平衡紊乱分析软件"对文献报道的112例酸碱失衡案例进行再次分析,软件分析结果与文献结果的一致率为87.50%,具有较好的一致性(Kappa检验:κ=0.84,P<0.01;McNemar检验:χ2=0.87,P=0.65)。结论"酸碱平衡紊乱分析软件"可以作为判断酸碱失衡类型的重要工具,为临床医生提供诊断参考,具有很高的实用价值和应用前景。
简介:摘要结直肠癌(CRC)是一种高度侵袭性的恶性肿瘤,在全球范围内,其发病率和死亡率分别位居第3位和第2位。近年来,免疫检查点抑制剂(ICIs)的问世,为恶性肿瘤患者带来了新的希望。但是这些以T细胞为基础的免疫治疗仅在少数患者中有效。研究显示,肿瘤细胞和CD8+T细胞之间的相互作用是影响免疫治疗疗效的关键因素。像快速增殖的肿瘤细胞一样,活化后的CD8+T细胞主要依赖糖酵解维持细胞增殖和功能发挥。在肿瘤微环境(TME)中,CRC细胞通过消耗大量的葡萄糖挤压CD8+T细胞的营养来源,同时伴随着乳酸等代谢毒物的产生和胞外堆积,最终导致CD8+T细胞糖酵解受损,细胞逐渐丧失功能变为耗竭和衰老,阻碍有效的抗肿瘤免疫治疗。因此,深入了解肿瘤细胞与CD8+T细胞糖代谢之间的相互作用,可以为研发更加有效的联合治疗提供策略。本文就此研究领域的进展做一综述。
简介:摘要目的观察数字编程温控热凝技术治疗下鼻甲肥大的效果。方法在鼻内镜下采用数字编程温控热凝技术,对126例肥大的下鼻甲进行微创治疗。结果106例患者1次治疗鼻腔通畅;12例患者经2次治疗后鼻塞症状消失,8例症状减轻。结论数字编程温控热凝技术治疗下鼻甲肥大疗效显著,手术操作简便、微创,视野清晰,有良好的临床应用价值。
简介:摘要肾脏是一个具有高度代谢活性的器官。肾小管上皮细胞(tubular epithelial cell,TEC)是肾脏进行能量代谢的核心场所,其主要依赖脂质代谢为生理性水和溶质的重吸收提供能量。近来研究显示,TEC的脂质代谢重编程是肾间质纤维化的重要病理表型。肾间质纤维化过程中往往伴随有TEC的异位脂质蓄积、脂肪酸转运紊乱及氧化功能缺陷等脂质代谢途径障碍,上述脂质代谢重编程可参与加重肾间质纤维化;越来越多的研究表明,重塑TEC脂质代谢平衡,恢复TEC正常脂质代谢功能可能是潜在的肾间质纤维化治疗靶点。本文通过概述生理和纤维化状态下TEC的脂质代谢特征,阐明TEC脂质代谢参与调控肾间质纤维化的最新分子机制,总结目前逆转TEC脂质代谢紊乱的干预手段,为今后临床从TEC脂质代谢角度防治肾间质纤维化提供新的思路及策略。
简介:摘要目的探索基于Python编程的形成性评价在提高神经外科住院医师临床思维能力方面的作用。方法选择2019年在浙江大学附属邵逸夫医院神经外科进行住院医师规范化培训的116名学员为研究对象,以随机数字表法将其随机分为试验组(49人)和对照组(67人)。试验组学员每周安排1次形成性评价,带教教师使用Python编程快速制作考题并进行快速评价。对照组学员按照常规方式和流程进行培训。培训结束后对两组学员进行出科考试,并收集学员对教学的评价。结果试验组学员出科考试理论和技能成绩均高于对照组学员[(89.94±5.43)分比(84.82±5.73)分,(80.18±7.23)分比(73.67±7.48)分],其差异均具有统计学意义(均P<0.01)。在访谈中,有61.2%(30/49)的试验组学员表示基于Python编程的形成性评价对提高临床思维能力非常有帮助。结论基于Python编程的形成性评价有助于提高神经外科住培学员的临床思维能力,其优点是可以快速、多次实施,可以作为其他形成性评价的有益补充。
简介:摘要目的基于PACS系统的医学影像学标准化考试软件的基本编程逻辑及模块化设计。方法在PACS系统中,临床医生对典型病倒图像注释后进行归类,然后存储于SQLSERVER2000服务器中,采用模块化管理方式,归类的文件夹在Internet网络环境下操作。同时介绍了一种基于PHP和MySql技术的校园网络考试系统的设计方案,阐述了系统的逻辑结构、开发环境、模块组成。结果该软件由4个子系统组成,并通过直接与PACS系统连接使试题库具备多样性、临床性、资源共享性和便利性。结论基于PACS系统的医学影像学标准化考试软件具有方便、直观、互动性好,操作简便,资源网络共享可靠等优点,值得推广应用。
简介:摘要表观遗传调控,如组蛋白乙酰化修饰,是决定干细胞分化方向的重要机制。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)通过影响不同亚类的组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性,提高组蛋白乙酰化水平,调控基因表达,从而影响胚胎干细胞自我更新,以及沿神经元、心肌和造血等细胞谱系的定向分化。HDACi类小分子化合物在体细胞重编程中也有广泛的应用,可替代致癌因子c-Myc和Klf4,促进体细胞克隆。研究显示,HDACi的效应与药物剂量、细胞类型和细胞分化状态密切相关。本文主要阐述了HDACi在干细胞分化和体细胞重编程中的应用进展,并对所涉及的分子通路进行讨论,有助于揭示干细胞定向分化的关键分子机制,优化干细胞定向分化诱导策略,对干细胞诱导分化具有重要的理论和实用价值。
简介:摘要目的探究长链非编码RNA-重编程调控因子(Linc-ROR)对胰腺癌细胞侵袭、迁移及脂肪酸合成的调节及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Linc-ROR在4种细胞中的表达水平。在PANC-1细胞系中单独转染pCDH-Linc-ROR过表达质粒或联合转染该质粒和脂肪酸合酶(FASN)的小干扰RNA(siRNA)后,尼罗红染色法观察脂肪酸合成;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;蛋白免疫印迹法检测脂肪酸合成相关蛋白的变化。结果Linc-ROR表达水平在3种胰腺癌细胞系中明显高于正常胰腺导管上皮细胞(1.56±0.10、45.53±3.74、147.80±7.21比1.00,F=869.1,P<0.01)。与对照组比较,转染pCDH-Linc-ROR质粒后侵袭能力增强(272.70±25.70比101.00±16.52,P<0.01),Transwell迁移实验显示该组迁移能力增强(691.30±34.67比274.70±12.06,P<0.01),划痕实验同样证明该结果(35.01±2.22比22.47±2.09,P<0.01),染色后荧光显示脂肪酸合成增强,脂肪酸合成相关蛋白增加(3.11±0.17、1.77±0.08、1.22±0.08、1.15±0.06、1.2±0.09、1.88±0.10、1.13±0.08比1.00,P<0.05)。进行联合转染Linc-ROR过表达质粒及siRNA后,pCDH-Linc-ROR+si-FASN相较于pCDH-Linc-ROR+si-NC组划痕实验证明显示迁移能力下降(34.38±1.12比52.88±2.19,P<0.01),Transwell迁移实验提示相同的结果(382.00±19.08比771.70±13.58,P<0.01),并且该组侵袭能力减弱(309.00±22.34比601.70±20.03,P<0.01),FASN蛋白水平明显下降(1.004±0.05比3.122±0.17,P<0.01),且染色后荧光示细胞脂肪酸的合成降低。结论Linc-ROR可能通过影响FASN来蛋白的调控脂肪酸合成进而促进PANC-1细胞的侵袭和迁移。
简介:干细胞再生医学在器官组织修复中已凸现出非常重要的地位。通过外源性表达基因进行体细胞的重编程,是目前最有希望获得供移植细胞的方式。微环境对于移植细胞的存活、迁移、分化起决定性作用。内源性一氧化氮合酶抑制剂系统(ADMA/DDAH)不但在调控血管生成中起着关键性作用,而且对肌细胞的诱导分化和促进肌生成方面发挥重要作用。本文就ADMA/DDAH对重编程"功能性心肌细胞"的作用予以阐述。