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  • 简介:考察了不同条件下重组人表皮生长因子(rhEGF)稳定性.结果表明,不同保存条件(物理状态、温度、pH、浓度等)对rhEGF稳定性有显著影响,使用适当添加剂(保护剂、抗氧剂、抑菌等)可以提高rhEGF稳定性.上述结果为rhEGF制剂学研究提供了依据.

  • 标签: 重组人表皮生长因子 稳定性 RHEGF 制剂学 保存条件
  • 简介:用纯化CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强一次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素保护免疫力。

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:白细胞介素4(IL-4)是一种由TH2细胞分泌具有多种生物学活性细胞因子,是机体免疫系统重要成员,在参与机体免疫调节方面有重要作用。据文献报道,IL-4在临床上与过敏性哮喘、皮炎等疾病有关,美国Genzyme公司已研制开发ELISA试剂盒检测IL-4水平,但价格昂贵。本实验制备rhIL-4抗血清以应用于IL-4生物学活性研究及临床检测IL-4水平等方面。

  • 标签: 抗血清 白细胞介素4 IL-4 IL一4 生物学活性 医学科学院
  • 简介:利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到特异作用于SV40启动子上9bp序列三锌指结构序列插入含有TAT蛋白蛋白质转导结构域表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好纯化融合蛋白.

  • 标签: TAT 蛋白质转导结构域 SV40启动子 三锌指结构 融合蛋白 可溶性表达
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:建立了商业化种植NeWLeaf-YTM转基因马铃薯筛选检测和鉴定PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段.PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min.本实验中F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计,具有很强特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定目的.

  • 标签: NewLeaf-Y^TM 转基因马铃薯 PCR检测鉴定方法
  • 简介:粘膜免疫是机体防御系统主要成分.致病性细菌侵入机体后,首先遭遇到天然免疫抵抗,随后产生获得性免疫,两者共同执行机体防御功能,消灭入侵细菌.最近研究表明上皮细胞对细菌感染有重要免疫调节作用,在天然免疫与获得性免疫防御机制中起重要作用.本文重点介绍肠上皮细胞在天然免疫中作用.

  • 标签: 肠粘膜上皮细胞 天然免疫 作用 粘膜免疫
  • 简介:阿维菌素(avermectin)是由除虫链霉菌(Streptomycesavermitilis)产生一种具有杀虫活性大环内酯类抗生素,在农业和畜牧业中应用广泛.本文综述了有关除虫链霉菌基因组序列分析、阿维菌素生物合成以及阿维菌素育种和代谢工程研究进展.

  • 标签: 除虫链霉菌 阿维菌素 生物合成 代谢工程
  • 简介:为了研究提高血红蛋白粘聚体稳定性,利用计算机同源模建、分子间氢键形成及表观静电势理论,探讨血红蛋白及相应突变体结构与功能与功能关系。分析发现两个α99位Lys突变为Cys后,它们之间可以形成二硫键,两个β82位Lys突变为Cys可以增强形成分了间氢键能力,分别起到稳定四聚体作用。分析表明,突变体血红蛋白将具有更高稳定性,从而提高血红蛋白稳定性及借助计算机工具设计新型奕变体提供参考。

  • 标签: 血红蛋白 同源模建 突变体 稳定性
  • 简介:促黄体激素释放激素(LRH)是动物下丘脑分泌一种十肽,分子量为1180,通过调节脑垂体分泌LH和FSH以及直接作用于性腺发挥生理作用,在控制机体生长发育和性周期活动中具有重要作用。在畜牧业生产上,促黄体激素释放激素能有效诱导和加速排卵,促进发情,提高动物繁殖率,能有效治疗卵巢囊肿。目前生产普遍使用化学合成LRH类似物,但成本高。如果能人工表达LRH,将会在畜牧业

  • 标签: 促黄体激素 释放激素 大肠杆菌中表达 卵巢囊肿 机体生长发育 大学研究
  • 简介:细胞培养过程中细胞自然凋亡是细胞受环境压力影响而发生现象。随着细胞自然凋亡分子生物学和生物化学研究深入,对以动物细胞产品生产为目的细胞培养产业将产生极有价值影响。采用DNA重组技术把预防细胞自然凋亡基因导入细胞和在培基中加入具有抗细胞自然凋亡化合物等手段已用于预防或减缓细胞培养过程中细胞自然凋亡。这些技术将大大延长细胞达到饱和密度后培养时间,从而使细胞培养系统生产效率得以显著提高。

  • 标签: 动物细胞 细胞培养 细胞自然凋亡
  • 简介:为研究人血小板因子4(hPF4)生物学性能和用于肿瘤生物治疗可能性,运用反转录聚合酶链反应(RTPCR)从人红白血病细胞系HEL细胞总RNA中扩增出hPF4基因cDNA序列,将其克隆至pUC18载体中.序列分析证实克隆片段与文献报道hPF4基因cDNA序列完全一致,说明已成功克隆到hPF4基因cDNA.

  • 标签: 人血小板因子4 CDNA克隆 序列测定
  • 简介:CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28结合,从而阻断B7介导T细胞活化必需共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI-dhfr,并用脂质体方法转染到COS7和CHO-dhfr-细胞中,用氨甲喋呤筛选转染CHO-dhfr-细胞。用RT-PCR、ELISA、细胞免疫荧光染色和Western-blot鉴定重组蛋白表达。采用A蛋白纯化重组蛋白。

  • 标签: CTLA4Ig融合蛋白 CHO细胞 表达 免疫抑制剂
  • 简介:血清钠离子和钾离子测定在临床诊断上意义重大,其常规检测方法火焰光度法和离子选择性电极法都需要昂贵仪器且操作复杂,因此近年来开发了一些均相直接测定方法。本文综述了近年研制出血清中钠、钾离子各种均相直接测定方法,评述了各种直接测定方法优、缺点。血清中钠、钾离子进行均相直接测定有着准确度高、重复性好等优点,可在临床生化自动化分析仪上应用。

  • 标签: 均相测定 血清钾离子 血清钠离子
  • 简介:多发性硬化症(MS)是一种慢性中枢神经系统疾病,目前在临床上难以治愈.β-干扰素(IFN-β)是一种多功能细胞因子,具有抗病毒、抑制生长、诱导凋亡和免疫调节等作用.近年来IFN-β在缓解MS急性发作和延缓病程方面表现出很好效果,但IFN-β对MS作用机制却仍不明了.本文简要综述近年来有关IFN-β治疗MS作用机理.

  • 标签: Β-干扰素 多发性硬化症 免疫治疗 细胞凋亡
  • 简介:重组组织型纤溶酶原激活剂(rtPA)经肝素处理后与未经处理rtPA比较,结果显示,rtPA在体外溶纤活性提高50%~90%,在兔体内半衰期延长1min,同时也提高了rtPA对热稳定性

  • 标签: 肝素 重组组织型纤溶酶原激活剂 半衰期
  • 简介:腺相关病毒(AAV,AdenoassociatedVirus)是一类线状单股DNA微小病毒。腺相关病毒因共具有定点整合(19q13qter)及非病原性等特点而在基因转移与治疗中可望作为较为理想载体。其在宿主染色体DNA上整合需要辅助病毒共转染。根据Cavalier-Smith线状SSDNA分子复制模式,即复制过程中3′OH端作为引物在DNA聚合酶作用下合成另一姊妹股DNA分子,然后共价地连接到亲代未折叠5′端回纹末端而进行DNA复制。本文

  • 标签: 腺相关病毒 ITRs NEOMYCIN 染色体基因 DNA 末端反向重复
  • 简介:人类基因组测序工作完成使人们可以方便地调用任何基因序列,但仅有基因序列并不能解释众多生物学问题,这要求发展一种高通量技术用于研究基因生物学功能以及基因相互作用.DNA微阵列技术以其高通量特点,已经在肿瘤生物学研究中逐渐被采用.由于癌症是源于基因表达谱改变基因疾病,通过DNA微阵列技术研究癌症细胞和对应正常细胞基因表达差异,将会使人们更好地了解肿瘤形成和发展过程.

  • 标签: 功能基因组 微阵列 表达谱 肿瘤
  • 简介:从动物组织中提取总RNA是现代分子生物学研究中经常使用重要实验技术,按常规方法获得总RNA产品中常伴有大分子量染色体DNA污染.为此,我们摸索出了保证RNA制品纯度、质量和产量DNA酶消化最佳反应条件.利用改良后方法提取了小鼠脏器组织总RNA,进行了新基因mPC-1在小鼠脏器中表达组织分布研究.

  • 标签: 动物组织 提取 高纯度总RNA 改进 应用
  • 简介:NanoLC-1DPlus液相色谱系统用于纳米喷雾质谱分析,这个色谱系统配置了第三个泵用于快速进样和清洗。是理想蛋白组学和生物标记发现研究设备。液相色谱系统NanoLC-1DPlus可以允许高流速快速进样,因此可以节约大量时间。第三个泵操作已经整合到公司专用EksigentControlSoftware软件中。

  • 标签: 液相色谱系统 泵用 SOFTWARE软件 Control Plus 质谱分析