简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）CTA-796E4.4在膀胱癌组织和细胞株中的表达，并观察其对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法采用荧光实时定量聚合酶链反应（qPCR）法检测湖北省天门市第一人民医院2016年11月至2019年1月手术切除标本73例膀胱癌组织及癌旁组织、4种膀胱癌细胞株（UM-UC-3、BIU-87、5637、T24）及正常膀胱上皮细胞中CTA-796E4.4的表达。以携带CTA-796E4.4基因的重组慢病毒（LV-CTA-796E4.4）感染UM-UC-3细胞作为实验组，以阴性对照慢病毒（LV-NC）感染UM-UC-3细胞为对照组。采用qPCR法检测过表达CTA-796E4.4对叉头框转录因子O1（FOXO1）基因mRNA表达的影响，通过Western blotting检测FOXO1蛋白的表达，分别以噻唑蓝（MTT）法、Transwell侵袭实验检测高表达CTA-796E4.4对UM-UC-3细胞增殖和侵袭能力的影响。结果CTA-796E4.4在膀胱癌组织中的表达水平低于癌旁组织（1.22 ± 0.33比4.30 ± 0.64），差异有统计学意义（P<0.01）。CTA-796E4.4在膀胱癌细胞株（UM-UC-3、BIU-87、5637、T24）中的表达均低于膀胱上皮细胞（0.11 ± 0.03、0.61 ± 0.03、0.33 ± 0.03、0.73 ± 0.04比1.01 ± 0.10）（P<0.01）。LV-CTA-796E4.4感染细胞后，CTA-796E4.4表达量显著增加（P<0.01），FOXO1基因表达升高（P<0.01）。高表达CTA-796E4.4能明显抑制细胞增殖能力和侵袭能力（P<0.05）。结论lncRNA CTA-796E4.4在膀胱癌及细胞株中表达降低，高表达CTA-796E4.4可抑制UM-UC-3细胞的增殖和侵袭，其分子机制可能是上调CTA-796E4.4促进FOXO1基因的表达。

简介：摘要目的5E康复模式在糖尿病患者延续性护理中的应用及对患者治疗依从性的影响。方法选取该院2018年1～12月进行延续性治疗的糖尿病患者150例作为对象，按随机数字表分为对照组和观察组，各75例。对照组给予常规康复模式，观察组采用5E康复模式。应用1个月后对患者的血糖水平及心绞痛稳定程度进行评分，患者治疗依从性情况及患者并发症情况进行评估。结果应用前两组血糖水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。经1个月应用后，观察组康复模式PPBG及HbAlC、FBG水平均明显低于对照组；经1个月应用后，观察组康复模式应用后患者康复锻炼、按时用药、饮食依从及戒烟戒酒依从率均明显高于对照组。经1个月应用后，观察组康复模式应用后患者局部压疮、低血糖、骨折、肺部感染、跌倒发生率均低于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。结论采用5E康复模式用于糖尿病患者延续性护理中，有助于稳定患者的治疗效果，提高患者的治疗依从性，有效降低患者并发症的发生。

简介：摘要目的探讨老年人群载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与血脂代谢水平、老年常见慢性心脑血管病的相关性。方法回顾性分析，入选我院门诊和住院的老年患者4 322例，分析ApoE亚型在老年人群中的分布。分析600例老年人(动脉粥样硬化组321例，健康体检对照组279例)血脂相关生化指标，ApoE基因测定采用基因芯片法。结果ApoE亚型E3最常见为67.1%(2 898/4 322)；ApoE亚型在老年慢性心脑血管疾病中的分布与人群分布水平基本一致，但在神经退行性变的患病人群中，E4亚型的携带率高于E2亚型[(26.4%，152/576)比(12.2%，70/576)]，差异有统计学意义(P<0.01)；在动脉粥样硬化组与对照组患者中，携带ε2与ε4等位基因三酰甘油水平分别为(1.85±2.09)mmol/L比(2.00±1.44)mmol/L、(1.53±1.31)mmol/L比(1.84±1.32)mmol/L(均P<0.05)。三酰甘油(OR＝4.360，95%CI：2.150～8.844)、高密度脂蛋白胆固醇(OR＝0.486，95%CI：0.307～0.770)、低密度脂蛋白胆固醇(OR＝2.321，95%CI：1.020～5.281)及ApoE等位基因(OR＝0.335，95%CI：0.210～0.533)均为动脉粥样硬化的危险因素(均P<0.01)。结论ApoE多态性与老年患者血脂代谢水平有关，遗传因素可能是影响血脂代谢的因素之一，携带ε4等位基因者的血脂异常风险增加，心血管患病、神经退行性疾病患病率风险增加。

简介：摘要目的比较恩替卡韦与替诺福韦酯对乙型肝炎E抗原(HBeAg)阳性的慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效及安全性。方法选取承德市中心医院2017年1月至2018年12月收治的HBeAg阳性CHB患者158例，采用随机数字表法将其分为恩替卡韦组和替诺福韦酯组各79例，比较两组治疗6个月、12个月时HBeAg转阴率、HBV DNA转阴率、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常率，并记录不良反应发生情况。结果经治疗6个月、12个月后，替诺福韦酯组的HBV DNA转阴率(59.49%、72.15%)明显高于恩替卡韦组(44.30%、55.70%)，两组差异均有统计学意义(χ2＝4.232、6.334，均P<0.05)；而两组患者的HBeAg转阴率(χ2＝0.328、0.037，均P>0.05)及ALT复常率(χ2＝0.767、0.694，均P>0.05)差异均无统计学意义，两组总有效率分别为75.94%、59.49%。替诺福韦酯组不良反应发生率为7.59%(6/79)，恩替卡韦组为11.39%(9/79)，两组差异无统计学意义(χ2＝0.558，P>0.05)。结论替诺福韦酯在抑制HBV复制方面优于恩替卡韦，并且安全性类似。

简介：摘要目的探讨乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)和乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)双阳性的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)携带产妇采用母乳喂养对其所生婴儿HBV感染率的影响。方法采用前瞻性队列研究方法，纳入2016年2月至2018年5月在浙江大学医学院附属妇产科医院进行产前检查及分娩的HBsAg和HBeAg双阳性携带HBV产妇及其所生的婴儿各323例，将其分为母乳喂养组和人工喂养组。采用化学发光免疫分析法和聚合酶链反应-荧光探针法，分别检测两组婴儿在出生<24 h及7月龄时的血清HBV标志物和HBV DNA的阳性率。统计学方法采用χ2检验。结果最终纳入297例患者，其中母乳喂养组149例，人工喂养组148例。母乳喂养组与人工喂养组婴儿在出生<24 h及7月龄时的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、HBV DNA>100 IU/mL的阳性率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。母乳喂养组出生<24 h新生儿抗-HBs阳性率为58.39%(87/149)，低于7月龄时的95.97%(143/149)；母乳喂养组出生<24 h新生儿HBeAg阳性率为65.10%(97/149)，高于7月龄时的13.42%(20/149)；差异均有统计学意义(χ2＝59.75、40.49，均P<0.01)。母乳喂养组出生<24 h新生儿的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为2.01%(3/149)和2.68%(4/149)，其7月龄时的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为2.68%(4/149)和2.68%(4/149)，两个时间点比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。人工喂养组出生<24 h新生儿抗-HBs阳性率为47.97%(71/148)，低于7月龄时的95.94%(142/148)；人工喂养组出生<24 h新生儿HBeAg阳性率为55.41%(82/148)，高于7月龄时的19.59%(29/148)；差异均有统计学意义(χ2＝85.37、39.84，均P<0.01)。人工喂养组出生<24 h新生儿的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为4.73%(7/148)和1.35%(2/148)，其7月龄时的HBsAg和HBV DNA>100 IU/mL阳性率分别为1.35%(2/148)和1.35%(2/148)，两个时间点比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论母乳喂养不是增加HBsAg和HBeAg双阳性HBV携带产妇垂直传播风险的决定性因素，建议这类产妇在正规预防的前提下进行母乳喂养。

简介：摘要目的探讨丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症的临床特征及基因突变遗传学特点。方法回顾性分析由河北省人民医院确诊的1例丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症罕见女婴患儿的临床特点及基因学特征，并结合本病的研究进展做文献复习。结果罕见女婴发病，起病早，重度精神运动发育落后，持续高乳酸、高丙酮酸血症，代谢性酸中毒，头颅MRI显示透明隔较小，隔间腔缺如；穹隆显示不明确，胼胝体压部细小，呈蓬状向前突。第三脑室顶向背侧抬高，左侧侧脑室扩张向右侧突，左侧室间孔明显扩大。脑电图间歇期：左侧后头部(O1、T5)导联可见大量中高幅棘慢波、慢波，少量多棘慢波散发或连续发放。双侧半球各导联可见大量低幅慢波活动。二代基因测序发现患儿PDHA1基因在chrX-19371287位置有C>T(p.A169V)的杂合错义突变，父母PDHA1基因未见该突变。确诊为丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症。结论PDHA1突变所致的丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症在早期缺乏特异性表现，且女性患者因有X染色体随机失活，更为少见。对原因不明的精神运动发育落后、持续高乳酸血症、难以纠正的代谢性酸中毒患儿，需警惕该病。可通过基因分析诊断。

简介：摘要目的观察核因子E2相关因子2 (nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2）在白藜芦醇（resveratrol, Res）预处理减轻糖尿病大鼠心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）中的作用。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠，体重200~220 g, 4~5月龄，采用先喂养高脂饲料4周后，一次性腹腔注射链脲佐菌（streptozotocin, STZ) 30 mg/kg的方法制备糖尿病大鼠模型。取糖尿病模型制备成功的大鼠30只，采用随机数字表法分为3组（每组10只）：假手术组（Sham组）、心肌缺血／再灌注组（MI/R组）和心肌缺血／再灌注＋Res组（MI/R+Res组）。采用结扎冠状动脉左前降支30 min，恢复灌注120 min的方法制备大鼠MI/RI模型。MI/R+Res组于MI/RI模型建立前7 d腹腔注射Res 15 mg/kg，1次／d，连续7 d。Sham组与MI/R组腹腔注射等容量二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）与PBS的混合液。B超测量左心室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）以及左室短轴缩短率（fractional shortening, FS）。于再灌注120 min时处死5只大鼠，用2, 3, 5氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-Triphenyl-2H-tetrazolium chloride, TTC）染色法测定心肌梗死面积；另再处死5只大鼠，经腹主动脉取血测心肌损伤标志物乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）和肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme, CK-MB）的浓度，并取心肌组织，采用ELISA法检测心肌组织的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）及活性氧自由基（reactive oxygen species, ROS）的含量，免疫组织化学法观察Nrf2的含量，Western blot法测定心肌组织Nrf2、细胞核-核因子E2相关因子2(n-nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, n-Nrf2）和血红素加氧酶-1 （heme oxygenase-1, HO-1）的表达。结果与Sham组比较，MI/R组与MI/R+Res组的LDH和CK-MB浓度、ROS及MDA含量均显著增高，LVEF和FS、SOD活性显著降低，心肌梗死面积增加，Nrf2、n-Nrf2与HO-1蛋白表达下调（P均<0.05）；与MI/R组比较，MI/R+Res组的LDH和CK-MB浓度、ROS及MDA含量均显著降低，LVEF和FS、SOD活性显著增加，心肌梗死面积减少，Nrf2、n-Nrf2与HO-1蛋白表达上调（P均<0.05）。结论RES预处理减轻糖尿病大鼠MI/RI的作用可能与激活Nrf2有关。

简介：摘要目的研究1，2-二氯乙烷（1，2-dichloroethane，1，2-DCE）染毒过程中不同脑区细胞色素P450 2E1（cytochrome P-450 2E1，CYP2E1）表达的变化，探讨CYP2E1对1，2-DCE中毒引起的脑水肿形成的影响和作用。方法于2018年12月，选择雌性SPF级昆明种小鼠40只随机分为对照组、染毒1、2和3 d组共4组，每组10只。将染毒组小鼠置于100 L静式染毒柜中（5只/柜），以1.2 mg/L 1，2-DCE每天吸入染毒3.5 h，分别染毒1、2和3 d，对照组不进行染毒，其他处理方式与染毒组相同。分别于染毒结束后次日处死，取脑组织并分区，采用HE染色法对不同脑区进行组织病理学观察，检测不同脑区丙二醛（malondialdehyde，MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量和过氧化氢酶（catalase，CAT）活力；同时以蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测不同脑区中CYP2E1、occludin和claudin5蛋白含量，再以实时荧光定量PCR法检测CYP2E1、occludin和claudin5 mRNA表达水平。实验数据采用SPSS 20.0进行统计分析，多组组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间两两比较采用SNK（q检验）法分析。结果与对照组比较，染毒2 d和3 d组小鼠小脑组织出现明显的脑水肿改变；与对照组比较，染毒3 d组小鼠小脑组织中MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，各个染毒组小鼠小脑组织中GSH含量、CAT活力及occludin和claudin5蛋白表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。各组小鼠额叶皮质组织中上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论1，2-DCE染毒可以诱导小鼠小脑组织中CYP2E1的表达增强，引起脑组织氧化损伤和脑水肿，对小鼠额叶皮质组织中CYP2E1的表达无明显影响。

简介：摘要目的探讨黄芪甲苷通过激活核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路抑制大鼠腹主动脉缩窄所致心力衰竭，改善大鼠心功能。方法2017年9月至2019年1月选取SD雄性大鼠40只，采用腹主动脉缩窄法(AAC)建立大鼠慢性心力衰竭模型，分为三组：模型组、贝那普利组、黄芪甲苷组，另外建立假手术组。贝那普利组和黄芪甲苷组分别给与10 mg·kg-1·d-1的贝那普利和50 mg·kg-1·d-1的黄芪甲苷灌胃，假手术组及模型组给与相同体积的生理盐水灌胃。8周后通过心脏彩超及血流动力学检测大鼠心脏结构及功能参数，免疫荧光法检测大鼠心肌细胞形态学变化，ELISA法检测大鼠血清中BNP水平变化，RT-qPCR检测大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1 mRNA的表达情况。结果与假手术组相比，模型组大鼠的心脏股骨颈比(495.47±12.38)、心脏体重比(6.44±0.18)、左室舒张末期内径(4.72±0.04)mm、左室后壁舒张期厚度(1.87±0.03)mm、B型钠尿肽(BNP)含量(151.61±5.67)mmol/L均增高，Nrf2(0.36±0.02)及HO-1 mRNA(0.27±0.02)较假手术组均下降。与模型组相比，贝那普利组心脏股骨颈比(261.88±12.97)、心脏体重比(3.38±0.13)、左室舒张末期内径(5.84±0.05)mm、左室后壁舒张期厚度(1.57±0.03)mm、BNP(99.40±4.97)mmol/L降低，黄芪甲苷组心脏股骨颈比(286.40±12.56)、心脏体重比(3.71±0.15)、左室舒张末期内径(6.01±0.10)mm、左室后壁舒张期厚度(1.64±0.03)mm、BNP含量(120.66±5.80)mmol/L，较模型组均降低，贝那普利组Nrf2 mRNA水平(1.06±0.01)、HO-1 mRNA(1.08±0.06)与黄芪甲苷组Nrf2mRNA(1.04±0.01)、HO-1 mRNA(0.95±0.02)表达均增高(P<0.01)。结论黄芪甲苷具有抗氧化应激作用，可抑制心力衰竭，改善心功能，其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路有关。

简介：摘要目的初步探讨高危型人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16，HPV16)E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制。方法构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞，获得C33A-E6稳定细胞系，采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达。放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western blot法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率。超速离心法提取两组细胞外泌体，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量。提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体，ELISA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平。将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养，CCK-8法检测C33A细胞增殖。Transwell小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态。结果与C33A细胞相比，C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P<0.05)，但蛋白质水平没有明显变化(P>0.05)。经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P>0.05)，但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P<0.001)。C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P<0.001)，并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001)；而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.001)。结论高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达，进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10，并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的探讨核因子NF-E2相关因子（nuclear-factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）在急性敌草快（diquat，DQ）中毒大鼠肺脏中的表达及敌草快在大鼠肺脏中的分布特点。方法选择54只无特定病原体（SPF）级Wistar雄性大鼠随机分为对照组（6只）和染毒组（48只），染毒组根据时间点分为2 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d、11 d和14 d共8个亚组，每个亚组6只。所有大鼠按1 ml/100 g给予一次性灌胃染毒，对照组给予生理盐水，染毒组给予11.55 mg/ml的DQ溶液（生理盐水配置）。观察各组大鼠肺组织病理变化，用免疫组织化学方法检测肺组织Nrf2的表达，并通过高效液相与质谱联用仪测定肺组织匀浆中DQ的浓度。结果染毒组大鼠肺组织在染毒后2 h即可检测出DQ，浓度为0.157 6 ng/mg，随时间延长DQ在肺组织中的浓度逐渐降低，至染毒后第11天肺组织内未检出，无长时间富积现象。肺组织在中毒早期病理改变不明显，第3天损伤最重，肺泡腔和肺间质可见大量炎性细胞浸润，第7天肺组织病理损伤开始减轻。Nrf2主要表达在肺细胞的细胞核，与对照组比较，染毒12 h亚组大鼠肺组织Nrf2表达量明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。随时间延长大鼠Nrf2表达阳性细胞数量逐渐增加，第3天达高峰（P<0.05），之后逐渐减少，染毒第14天与对照组大鼠肺组织Nrf2表达量差异无统计学意义（P>0.05）。结论DQ在大鼠肺组织中无长时间富积，且DQ通过氧化还原反应导致的肺损伤存在滞后现象。Nrf2在DQ中毒大鼠肺组织中高表达，且与肺组织病理损伤情况存在相关性。

简介：摘要目的比较不同剂量泼尼松联合伏立康唑对变应性支气管肺曲霉病患者肺功能及外周血中免疫球蛋白E(IgE)水平的影响。方法选择2018年1－12月绍兴市中心医院接诊的变应性支气管肺曲霉病患者100例为研究对象，采用随机数字表法将患者分为两组，每组50例。对照组给予大剂量泼尼松(0.5 mg·kg－1·d－1)联合伏立康唑治疗，观察组采用小剂量泼尼松(0.25 mg·kg－1·d－1)联合伏立康唑治疗，两组疗程均为4周。对比治疗后的临床效果，用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/FVC、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)、IgE、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)及不良反应发生情况。结果观察组、对照组总有效率分别为94.00%(47/50)、68.00%(34/50)，观察组高于对照组(χ2＝10.981，P<0.05)。治疗前，两组FVC、FEV1、FEV1/FVC差异均无统计学意义(均P>0.05)；治疗后，观察组FVC、FEV1、FEV1/FVC[(3.29±0.21)L、(1.86±0.25)L、(73.81±5.16)%]均高于对照组[(2.61±0.21)L、(1.58±0.28)L、(65.85±5.07)%]，差异均有统计学意义(t＝16.190、5.274、7.781，均P<0.05)。治疗前，两组外周血EOS、IgE差异均无统计学意义(均P>0.05)；治疗后，观察组外周血EOS、IgE[(0.21±0.11)×109/L、(187.36±37.12)U/mL]均低于对照组[(0.34±0.14)×109/L、(689.35±40.16)U/mL]，差异均有统计学意义(t＝5.163、64.907，均P<0.05)。治疗前，两组TNF-α、IL-6、IL-8差异均无统计学意义(均P>0.05)；治疗后，观察组TNF-α、IL-6、IL-8[(13.59±5.14)pg/L、(6.15±3.01)ng/L、(276.25±87.51)ng/L]均低于对照组[(19.48±5.01)pg/L、(10.25±3.52)ng/L、(322.27±99.74)ng/L]，差异均有统计学意义(t＝5.802、6.259、2.452，均P<0.05)。观察组对照组不良反应发生率分别为6.00%(3/50)、26.00%(13/50)，观察组低于对照组(χ2＝7.441，P<0.05)。结论在变应性支气管肺曲霉病患者中使用小剂量泼尼松联合伏立康唑效果显著，可有效改善患者肺功能及IgE水平，减少不良反应的发生。

简介：摘要目的探讨Bcl-2腺病E1B 19kD蛋白相互作用蛋白3类似物(也称NIX)介导PC12细胞线粒体自噬的可能机制。方法PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)放置于含体积分数1%O2的缺氧培养箱中培养，建立细胞缺氧损伤模型。分为常氧组和不同时相点缺氧损伤组(缺氧6，12, 24, 48 h组)。Western blot检测缺氧不同时相点NIX、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)和细胞色素C氧化酶4(COX4)的表达水平。电镜观察PC12细胞缺氧24 h后细胞中自噬体的形成。激光共聚焦显微镜观察NIX过表达48 h后细胞中线粒体-NIX-LC3-自噬体膜复合体的形成。免疫共沉淀(CoIP)检测NIX与LC3之间的相互作用。激光共聚焦显微镜观察抑制NIX对线粒体形态的影响。PC12细胞分为常氧组、常氧＋NIX抑制组、缺氧组、缺氧＋NIX抑制组Western blot检测抑制NIX后各组NIX、LC3、TOMM20、COX4蛋白的表达变化。结果PC12细胞缺氧24 h后NIX和LC3的表达量与常氧组相比明显升高[(0.44±0.03)∶(0.21±0.01)、(1.04±0.03)∶(0.32±0.01)](P均<0.05)；TOMM20和COX4的表达量在缺氧24 h后较常氧组明显降低[(0.78±0.07)∶(1.46±0.08)、(0.52±0.04)∶(0.98±0.06)](P均<0.05)。电镜观察发现，缺氧24 h后细胞中有包含线粒体的自噬体形成。激光共聚焦检测发现，NIX过表达48 h后细胞中线粒体-NIX-LC3-自噬体膜复合体的形成。CoIP检测发现，NIX与LC3之间存在相互作用。激光共聚焦显微镜观察发现，与缺氧组相比，抑制NIX能保存缺氧条件下线粒体的完整性。Western blot检测发现，与缺氧组相比，缺氧＋NIX抑制组中NIX和LC3-II的表达[(0.80±0.02)∶(1.18±0.06)、(0.68±0.05)∶( 0.97±0.13)](P均<0.05)，使TOMM20和COX4的表达量升高[(0.78±0.06)∶( 0.69±0.08)、(0.81±0.07)∶( 0.81±0.07)](P均<0.05)。结论在PC12细胞中NIX与LC3相互作用介导线粒体自噬的发生，抑制NIX能保存缺氧条件下线粒体的完整性、降低自噬水平，为线粒体提供保护作用。

简介：【摘要 】目的 探讨MTA1和E-cadherin蛋白的表达与贲门癌的浸润、转移和分化程度之间的关系，以及它们三者之间的相关性。方法 采用免疫组织化学方法对60例贲门癌组织和18例癌旁组织中MTA1和E-cadherin蛋白的表达情况进行检测。结果 MTA1的表达与贲门癌的浸润深度无显著相关性，与贲门癌的淋巴结转移呈正相关，与分化程度呈负相关(P值分别是0.045和0.039)，E-cadherin的表达与贲门癌的浸润深度、转移呈负相关(P值分别是0.039、0.020)，与分化程度无关。Spearman等级相关分析显示， MTA1与E-cadherin的表达呈负相关(rs = -0.293，P

简介：摘要BRAF基因是RAF激酶家族的一员，约14%的原发性结直肠癌和8%转移性结直肠癌（mCRC）患者发生BRAF突变。BRAF V600E，作为BRAF突变mCRC最常见的类型，常规治疗效果差，疾病进展快、生存期短、预后差。中国医学科学院肿瘤医院收治一例BRAF V600E突变晚期结肠癌患者，二线化疗＋靶向治疗肿瘤均无明显缩小，三线BRAF抑制剂联合化疗及靶向治疗取得部分缓解（PR），现报告如下。

简介：摘要目的探讨白藜芦醇在糖尿病心肌缺血再灌注（I/R）损伤中对转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶1（HO-1）信号通路的影响。方法将2型糖尿病模型制备成功的60只大鼠分成假手术组、I/R组、白藜芦醇（R）组、白藜芦醇+ EX527（RE）组，每组各15只。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、恢复灌注120 min的方法制备心肌I/R损伤模型。R组及RE组大鼠于术前7 d连续腹腔注射白藜芦醇15 mg/kg，假手术组及I/R组大鼠腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液，RE组大鼠于缺血前15 min尾静脉注射EX527 1 μg/kg。于再灌注120 min末，采用酶联免疫吸附测定法检测血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）。随后处死大鼠取心肌组织，采用苏木素-伊红（HE）染色观察心肌病理学变化，采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑法检测心肌梗死面积百分比，并检测心肌组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。采用Western-blotting法检测各组大鼠心肌沉默信息调节因子1（SIRT1）、Nrf2及HO-1蛋白表达水平。结果HE染色可见，假手术组大鼠心肌细胞轻度断裂、水肿，少量炎症细胞浸润；I/R组大鼠心肌纤维排列杂乱，心肌间质充血水肿伴大量炎症细胞浸润；R组大鼠心肌组织结构相对整齐，偶见核固缩；RE组大鼠心肌纤维排列杂乱，核固缩现象明显，炎症细胞浸润明显。假手术组大鼠无心肌梗死发生，I/R组大鼠心肌梗死面积占比为（51 ± 6）%，R组大鼠占比为（37 ± 4）%，RE组大鼠占比为（41 ± 3）%，各组间比较差异有统计学意义（F = 160.703，P < 0.001），R组及RE组大鼠心肌梗死的占比面积均显著小于I/R组大鼠，且R组大鼠心肌梗死面积的占比更小（P均<0.05）。各组大鼠血清LDH、CK-MB、丙二醛、SOD、SIRT1、Nrf2及HO-1表达水平比较，差异均有统计学意义（F = 144.101、158.545、53.682、99.273、50.121、59.153、143.702，P均< 0.001）。进一步两两比较发现，与假手术组比较，I/R组、R组、RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著升高，SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著降低（P均<0.05）；与I/R组比较，R组及RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著降低，SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著升高，且LDH、CK-MB及丙二醛含量在R组大鼠更低，SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平在R组大鼠更高（P均<0.05）。结论白藜芦醇可通过促进SIRT1激活Nrf2/HO-1信号通路来减轻2型糖尿病大鼠心肌的氧化应激反应及心肌I/R损伤。

简介：摘要目的研究核转录因子E2相关因子2（Nrf2）及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对高糖状态下人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖的影响，并探讨糖代谢相关酶在Nrf2及PI3K/Akt影响K1细胞增殖中的作用。方法根据不同处理因素将K1细胞分为5组：正糖组（正糖5.5 mmol/L培养48 h）、高糖组（正糖5.5 mmol/L培养24 h后，换25 mmol/L高糖继续培养24 h）、Nrf2siRNA组（正糖条件下siRNA转染细胞24 h后，换高糖继续培养24 h）、NcsiRNA组（正糖条件下阴性转染细胞24 h后，换高糖继续培养24 h）、LY294002组（正糖条件下培养24 h后，加50 μmol/L LY294002预孵育0.5 h再换用高糖培养24 h）。K1细胞按照上述分组处理后分别用以下方法检测相关指标：MTT法检测细胞增殖，细胞免疫荧光法检测Nrf2蛋白的分布，Western blot检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、核Nrf2、浆Nrf2、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）、丙酮酸激酶M2（PKM2）蛋白的表达水平。两组数据比较采用独立样本t检验，多组数据比较采用单因素方差分析。结果与正糖组比较，高糖组K1细胞增殖率、PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、G6PD、PKM2表达显著升高[分别为（87.31±3.67）%比（126.64±5.41）%、0.272±0.039比0.425±0.019、0.168±0.035比0.446±0.021、0.308±0.026比0.597±0.014、0.421±0.024比0.626±0.026、0.198±0.023比0.314±0.023，t=6.109~16.951，均P<0.05]，Nrf2在细胞核分布的比例显著升高[（21.6±4.5）%比（91.2±3.5）%，χ2=98.497，P<0.01]；与高糖组比较，Nrf2siRNA组K1细胞增殖率明显下降，G6PD、PKM2的蛋白表达明显下调，差异有统计学意义（t=8.936、7.056、8.843，均P<0.01），LY294002组也呈现相似的趋势（t=7.228、6.351、7.910；均P<0.01）；与高糖组比较，LY294002组K1细胞PI3K、Akt蛋白水平无明显改变，而p-PI3K、p-Akt、核Nrf2、浆Nrf2蛋白水平及Nrf2核浆蛋白比值均被显著抑制（t=5.748~23.572，均P<0.01）。结论高糖可激活PI3K/Akt信号通路，上调Nrf2表达与核转位，上调磷酸戊糖和糖酵解途径相关酶PKM2、G6PD的表达，促进K1细胞增殖。