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  • 简介:以MS为基本培养基,通过调整激素种类与浓度等培养条件,按正交试验设计原则,建立了百脉根高频再生体系。结果表明MS+2,4-D2.0mg/L+KT2.0mg/L培养基可高效诱导愈伤组织形成,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基可高效诱导芽分化,MS+NAA0.1mg/L培养基可快速诱导根生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体VP60-pBI121,研究了根癌农杆菌介导兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因对百脉根遗传转化影响因素,建立了百脉根快速高效遗传转化体系,结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株、以下胚轴为外植体,预培养3d,在OD600为0.6菌夜中浸染20min,共培养3d,以及300mg/L羧苄青霉素脱菌浓度和50mg/L卡那霉素筛选浓度为最佳转化条件。为利用百脉根生产动物口服型疫苗建立了技术基础。

  • 标签: 百脉根(Lotus comiculatus Linn) 高频再生体系 兔出血症病毒(RHDV) 转化
  • 简介:以阿蒂擎天凤梨乙烯处理和不处理植株为材料建立抑制性差减杂交文库中,筛选到一个被乙烯诱导并与已知植物谷胱甘肽-S-转移酶(GST)同源cDNA片段,通过RACE技术得到该基因全长eDNA序列。序列分析表明,该基因可能属于thioredoxin-1ikesuperfamily和GSTC_familysuperfamily两个超家族中成员。利用半定量RT—PCR检测该基因表达量在乙烯处理后先会在1h显著升高,然后随时间逐步降低,说明乙烯作为一种逆境胁迫相关激素,可在短时间内诱导凤梨中GST表达。推测其在受到外源乙烯信号诱导后,一方面可能参与了植物体内解毒作用,另一方面可能参与了花青素合成调控和运输。本实验中GST作为观赏凤梨中一个新发现GSTs家族成员,对于研究热带花卉中GSTs家族特点和提高其抗逆性和品质具有重要理论意义和实用价值。

  • 标签: 谷胱甘肽-S-转移酶 阿蒂擎天凤梨 乙烯 表达分析
  • 简介:研究借助近红外光谱分析技术对100个南方花生区试品种粗脂肪、蛋白质、脂肪酸和氨基酸含量等21个品质性状进行测定,结果表明,供试品种粗脂肪含量平均为51.37%,蛋白质为26.31%,总氨基酸为22.611%,油酸为44.84%,亚油酸为34.05%。主成分分析表明,21个品质性状可综合成3个主成分,分别为蛋白质和氨基酸因子、不饱和脂肪酸因子和粗脂肪因子,反映了原始数据信息量74.47%。聚类分析表明,100个花生品种可划分为4大类,各类别间品质存在不同差异。利用主成分分析和聚类分析进行花生品质综合评价,可避免单一标的片面性和不稳定性,为花生亲本利用和品质育种提供重要科学依据。

  • 标签: 花生 品质性状 主成分分析 聚类分析
  • 简介:以欧报春(Primulavularis)种子上下胚轴为外植体,通过外植体消毒、丛生芽诱导和增殖、生根、炼苗和移栽等技术研究,筛选出各阶段最佳培养基配方,从而建立欧报春再生体系。结果表明:欧报春种子上胚轴能诱导出不定芽,但下胚轴不能。欧报春上胚轴不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA0.4mg/L+6-BA0.6mg/L,诱导率达21.67%;丛生芽增殖最佳培养基为MS+NAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L,诱导率达62.96%;生根最佳培养基为MS培养基,诱导率达95.59%;最佳移栽基质为草炭:珍珠岩=3:1(体积比)混合基质,移栽成活率可达96.67%。

  • 标签: 欧报春 上胚轴 下胚轴 丛生芽 植株再生
  • 简介:鉴于泛素与植物受高温等环境胁迫下产生一些诱导型蛋白降解有关,本研究根据擎天凤梨Ostara早期花器全长cDNA文库,经大规模随机测序及重叠群(contigs)内EST序列拼接,获得了擎天凤梨多聚泛素基因全长cDNA序列(GenBank登录号:GQ890686),序列长1896bp,开放阅读框长1323bp,编码441个蛋白氨基酸残基,蛋白质分子质量为49.3kD,等电点pI为6.59。蛋白二级结构预测显示,该蛋白主要由随机卷曲、延伸链、α螺旋和β-转角组成;系统进化树分析表明与拟南芥推定多聚泛素UBQ10(gi|23397122|gb|AAN31845.1|)亲缘关系最近;经推断它是由5个单体泛素组成多聚泛素。本研究有助于进一步探讨该基因在低温胁迫下反应机理以及如何采用分子调控手段增强擎天凤梨耐低温能力。

  • 标签: 擎天凤梨 泛素 克隆 序列分析
  • 简介:本实验在形态学分析基础上,采用5对中国传统菊花芽变品种和2组形态相似品种,运用随机扩增DNA多态性(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)分子标记方法对其进行了品种鉴定。通过反复试验,建立了稳定RAPD反应体系;从22个20碱基随机引物中筛选出4个高效引物,扩增出13条带,扩增多态性片段多在501~1000bp之间,其中有2个引物(ch1.21和ch1.25)能将试验中7组材料全部清楚地区分开。研究结果表明:4个高效引物RAPD分析能够有效地将选定样本区分开。因此作者提出RAPD分析方法可以应用到菊花芽变及相似品种鉴定中。这就为进一步开发更多RAPD随机引物,开展菊花品种鉴定和保护工作提供了参考资料。

  • 标签: 菊花 芽变 相似品种 RAPD
  • 简介:以CTAB法提取马蹄金叶片DNA为模板,应用L16(4^5)正交表系统分析了DNA、Mg^2+、dNTP、Taq酶、引物5种ISSR反应成分浓度变化对扩增结果影响。量化分析结果表明:Taq酶、dNTP不同水平对PCR反应结果有显著影响,正交设计可以应用于ISSR-PCR反应体系建立,用这种方法建立马蹄金ISSR优化反应体系为:1×buffer,25ng模板DNA,1.75mmol/LMg^2+,225μmol/LdNTP,0.91μmol/L引物,1.25U7TaqDNA聚合酶,总体积20μl。这一优化系统建立为今后利用ISSR标记技术,研究马蹄金地理变异提供一个标准化程序。

  • 标签: 马蹄金 ISSR 反应体系 正交设计 优化
  • 简介:番茄颜色和色素含量是决定果实品质两个重要特性。在本研究中,使用绿色和紫色番茄植株分别作为母本和父本,分别产生了6个遗传群体,即P1、P2、F1、BC1、BC2和F2。通过数量性状多代联合分析研究果实颜色和色素含量遗传规律。结果表明,绿色和紫色果之间果实颜色最佳遗传模型为MX1-AD-ADI。BC1、BC2和F2代色度值主基因遗传率分别为82%、59%和77%,多基因遗传率分别为8%、10%和13%。番茄红素含量遗传符合MX2-ADI-AD模型,BC1、BC2和F2主基因遗传率分别为64%、74%和93%,而多基因遗传率分别为20%、0%和0%。叶绿素遗传模型为MX1-AD-ADI,BC1、BC2和F2主基因遗传率分别为59%、74%和59%,多基因遗传率均为0%。胡萝卜素遗传符合MX2-ADI-ADI模型,BC1、BC2和F2主基因遗传率分别为76%、4%/5%和54%,而多基因遗传率分别为0%、0%和13%。

  • 标签: 番茄(Solanum lycopersicum) 果实颜色 色素 遗传率 遗传模型
  • 简介:稻米香味是稻米食味品质重要指标,而香味是受隐性核基因控制,杂合基因型不表现出香味,因此在香米育种中需要寻找一种快速、简便、准确香味基因检测方法。本实验分别设计了水稻香米基因fgr2个等位基因基因标记(InDel-E2、InDel-E7),利用这两个标记对20个香米和2个非香稻品种(品系),以及2个香米/非香米组合F1进行快速检测。结果显示,InDel—E2能检测到11个香米品种(品系),InDel-E7可检测其余9个香米品种(品系),且2个标记都能检测杂合基因型,说明本研究20个香米品种(品系)受2个香米基因控制。供试材料分子检测结果与香米基因型完全相符,因此本研究开发2对标记可应用于香米育种基因标记辅助选择和新香米基因筛选。

  • 标签: 水稻 香米基因 基因标记 开发和应用
  • 简介:WRKY转录因子是高等植物中最重要转录因子基因家族之一,在植物应对生物胁迫(病原菌和病毒等)和非生物胁迫(干旱,盐害,冷害和热害等)等一系列逆境应答进程中发挥重要作用。目前高等植物中WRKY转录因子在调控植物应答生物胁迫和非生物胁迫中相关功能进行了总结。在目前已经报道WRKY转录因子功能基础上,分析了不同植物中WRKY转录因子逆境应答模式和功能特征,为未来探索作物WRKY转录因子逆境应答调控机理奠定基础。

  • 标签: 植物 WRKY转录因子 胁迫应答 功能
  • 简介:为获得南瓜ISSR最优扩增体系,为后续南瓜遗传多样性分析和亲缘关系鉴定奠定基础,本研究以‘密本’南瓜为筛选体系材料,采用单因素试验,对ISSR反应体系Mg2+、dNTP、Taq酶、引物和DNA浓度等5个因素进行优化。研究结果表明,南瓜ISSR25μL最佳反应体系为:2.5μL10×Buffer,2.0mmol/LMg2+,0.3mmol/LdNTP,1UTaq酶,0.48mmol/L引物,75ngDNA。在此基础上,对筛选出12条引物进行退火温度优化,最终确定每条引物最佳退火温度。利用该反应体系,选用引物891对85个南瓜品种进行所确立扩增体系验证,结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强、重复性好,表明本研究所确定反应体系适用于南瓜ISSR分子标记。

  • 标签: 南瓜 ISSR 分子标记 PCR扩增
  • 简介:研究对贵州喀斯特地方4个叶用芥菜品种采用盆栽试验,设置不同程度干旱胁迫,研究其在不同干旱胁迫下抗旱性。结果显示,随着干旱胁迫加重,三大渗透调节物质Pro、SS、SP含量逐渐增大;超氧化物歧化酶(POD)、过氧化物酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性随着干旱胁迫加重呈先上升后下降趋势,丙二醛(MDA)也呈逐渐增大趋势。贵州地方4个叶用芥菜品种综合抗旱性评定结果为:2号≧1号>3号>4号。因此本试验研究干旱胁迫对叶用芥菜生理方面的影响,筛选出适合喀斯特地区种植高抗旱品种,提高芥菜产量和经济效益,为贵州筛选高抗旱芥菜品种提供一定基础数据。

  • 标签: 叶用芥菜 干旱胁迫 渗透调节 抗氧化物酶 抗旱性评价
  • 简介:硒不但是人类和动物必需微量元素,其在植物生长发育过程中也起着重要作用。已有研究表明,适当硒处理可以提高植物产量和品质,增强植物抗逆性,但是过高硒会损害植物结构,抑制生长,降低叶绿素含量。但对于硒对植物叶绿体及光合作用影响尚未进行过系统总结。本研究通过分析和总结硒是如何通过对叶绿体及光合作用实施调控,进而改变作物品质及植物抗逆性,为合理、安全施用硒肥提供理论依据,使之可以更好地发挥有益于农业生产和人类健康生物学效应。

  • 标签: 植物 叶绿体 光合作用 抗逆性
  • 简介:种子萌发期,筛选、鉴定高粱抗旱材料对挖掘种子萌发期抗旱基因以及培育抗旱性更强高粱品种都具有重要意义。本研究采用聚乙二醇(PEG6000)模拟干旱胁迫,设置0(CK)、5%、10%、15%、17.5%、20%、22.5%和25%8个不同浓度梯度PEG6000对粒用高粱BTx623和甜高粱Rio进行干旱处理,确定PEG6000初步筛选浓度,然后利用PEG6000初步筛选浓度对全球收集396份高粱进行初步筛选,筛选出较抗旱材料逐渐加大选择压力,最终筛选出高抗旱性高粱材料。基于以上试验,确定了大批材料初步筛选时PEG6000浓度为15%较为适宜。396份高粱材料经过15%PEG6000初步筛选时,相对出苗率达到80%以上有89份,逐步加大筛选压力,最终筛选出4份抗旱能力很强高粱材料,其中3份来自中国粒用高粱,1份来自东亚粒用高粱。随着处理浓度增加,高粱抗旱性和耐盐性两之间相关性存在不确定性。

  • 标签: 高粱 种子萌发期 干旱胁迫 相对出苗率
  • 简介:培育高产稳产、对环境钝感优质杂交稻新组合已成为当前水稻育种重要目标;近年高温造成水稻结实率显著下降而导致产量严重损失,水稻耐热性改良也日益迫切。本研究用一个籼粳交重组自交系群体构建遗传连锁图谱,图谱拟合157个SSR标记位点,覆盖水稻基因组2352.62cM,标记间平均遗传距离14.89cM。以常温和高温结实率差值作为耐热指数,采用复合区间作图法,对水稻抽穗扬花期耐热性进行了QTL分析,在第2、3、5连锁群上检测到3个新耐热QTL。贡献率为:6.59%、10.72%和10.7%,联合贡献率为28.01%。

  • 标签: 水稻 SSR标记 QTL 耐热性
  • 简介:淀粉含量是烤烟烟叶醇化品质高低一项重要指标,但目前淀粉含量测定方法较多且缺乏系统比较,造成不同测定方法获得结果横向比较性较差。本研究系统地比较了连续流动法、碘显色法、费林试剂滴定法、离子色谱法以及高效液相色谱法5种常见淀粉含量测定方法在红花大金元和K326烟叶淀粉含量测定中应用。使用5种方法测定了两个醇化初期烟叶样品中淀粉含量,采用标准偏差、回收率以及t检验法,比较了烟草行业标准方法连续流动分析法与其他测定方法结果之间差异性。结果表明,与行业标准连续流动法相比,费林试剂滴定法以及酶水解—离子色谱法,测定结果偏高,且准确度偏低;酸水解-高效液相色谱法测定结果偏低,虽具有很高精密度,但准确性不高;而碘显色法测定结果不但表现出较高准确性和精密度,且与连续流动法测定结果之间不存在显著性差异(t

  • 标签: 烟叶 淀粉 连续流动法 碘显色法
  • 简介:研究通过3年4环境田间试验,在BIL(backcrossinbredlines)群体中选取断裂比强度最大材料NMGA-062(32.5cN/tex)和断裂比强度最小材料NMGA-144(26.67cN/tex),利用Affymetrix棉花基因芯片,比较分析NMGA-062和NMGA-144纤维发育10d时基因表达谱。在24029条转录本中,两个基因型中差异表达转录本6504条,占筛选转录本总数27.07%;其中差异表达倍数在2倍或2倍以上转录本有3461条,占筛选转录本总数14.41%,对其进行功能分类。对8个差异表达明显基因(Ghi.10655.1.S1_s_at,ACO1,ARF1,SAHH,TUA6,TUA7,β-tub1,β-tub10)进行实时荧光定量PCR检测,发现表达模式均与芯片结果一致,说明芯片数据具有生物学意义上可重复性,结果是可信。本研究为以后克隆及功能验证纤维发育相关基因提供了重要参考。

  • 标签: 棉花 基因芯片 差异表达基因 实时荧光定量PCR
  • 简介:随着不同转基因生物(GMO)制品不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定甘蔗红糖DNA提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖商业化所需转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要转基因甘蔗白糖DNA提取及分子鉴定提供借鉴。

  • 标签: 甘蔗红糖 转基因生物 外源基因 分子鉴定 荧光定量PCR
  • 简介:利用153个株系组成源自美国半矮秆有限性品种Charleston和亚有限性品种东农594重组自交系群体。在东北农业大学香坊试验站与东北农业大学校内试验田进行了两年三点试验。采用国际标准对大豆营养生长期进行划分,对观察株系从破土开始记录,每日跟踪调查,直到群体全部成熟。结果表明生育期在群体中呈正态分布,在不同环境条件下,个体间有差异。采用QTLmaper2.0统计软件对生育期进行QTL定位和上位性分析。共检测到主效应QTL59个,上位性QTL61对。涉及到A1、C2、D1a、D1b、B1、I、N、G等七条连锁群,上位性分析也首次揭示出不同位点间互作关系。揭示了大豆营养生长过程中,其QTL发育特点,找到了可以在不同环境下稳定存在QTL位点。

  • 标签: 大豆 营养生长期 环境 上位性 QTL
  • 简介:为了解决‘丹霞’铁皮石斛市场供需矛盾,本研究利用植物组织培养技术,采用10种不同培养基培养‘丹霞’铁皮石斛种子,比较分析其种子萌发、原球茎形成和组培苗生长发育情况。结果表明,‘丹霞’铁皮石斛种子活力为89.54%,原球茎在1/2MS+20%马铃薯培养基上生长发育良好,种子培养49d后形成原球茎。其株高、分蘖数、根长和根数等指标分别可达6.68cm、1.96株、5.16cm和5.88条,均高于其他培养基。在栽后115d统计成活率可达99.45%。说明培养基1/2MS+20%马铃薯适合于‘丹霞’铁皮石斛组培苗培养和快速繁殖。本研究为‘丹霞’铁皮石斛工厂化育苗提供技术支撑。

  • 标签: '丹霞’铁皮石斛 培养基 组织培养 快速繁殖