摘要
摘要目的将已构建好的新型抗乳腺癌双重靶向性融合蛋白Del1-9-G129R-T3的原核表达载体转化入原核表达宿主，诱导融合蛋白的表达，对之进行鉴定后进行分离纯化。方法将融合蛋白重组表达质粒pET22b-Del1-9-G129R-T3转化入大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导融合蛋白表达，收集菌体进行超声破碎，高速离心分离沉淀和上清。通过SDS-PAGE和Westernblot对目的蛋白的表达进行检测和鉴定，利用亲和层析纯化融合蛋白。结果SDS-PAGE结果显示，在诱导表达菌超声破碎后的沉淀物中出现一与预期分子量约24.7kD大小相吻合的新蛋白区带，表明融合蛋白可能主要存在于细胞质中，形成不溶性包涵体。Westernblot分析显示，蛋白在预期分子量处出现印迹。结论融合蛋白Del1-9-G129R-T3已经在大肠杆菌中高效表达，为下一步融合蛋白的功能研究奠定基础。
出版日期
2014年03月13日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
