摘要
Puma为一种凋亡调控因子。本研究探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者p53上调pumamRNA的表达情况，并探索其在评估CLL预后中的意义。采用基于SYBRGreenI荧光染料法的实时定量逆转录PCR（qRT—PCR）方法检测100例CLL患者及11名健康对照者外周血标本中puma基因的表达，以β-actin为内参照，用2（-△Ct）方法计算puma的相对定量值，组间分析采用秩和检验。结果显示，qRT—PCR标准曲线的R^2均≥0．990，批内差及批间差变异系数（CV）均小于5％，灵敏度可达10^2copies／μgRNA。100例CLL患者puma基因表达水平中位数为1．038×10^-3（4．106×10^-4-2．806×10^-3）；11名健康对照者puma表达水平中位数为1．220×10^-3（7．233×10^-4-1．405×10^-3），二者无显著性差异（U=544．5，P=0．957）。临床分期较早（Binet分期A期）的患者puma表达水平明显高于临床分期较晚（Binet分期B期、C期）的患者（p〈0．001）；具有CD38表达阳性、ZAP-70蛋白表达阳性、血清乳酸脱氢酶水平增高、血清β2-微球蛋白水平增高的患者，其puma基因表达水平均明显低于无以上不良预后因素的患者，差异显著（P值分别为0．002，0．012，0．009和0．046）；FISH检测显示存在12号染色体三体和14q32易位的患者puma表达水平明显低于无以上分子遗传学异常者，其差异显著（P值分别为0．003和0．045）。结论：qRT-PCR方法检测puma表达灵敏可靠，puma表达水平与CLL多种预后因素存在相关性，在评估CLL预后中具有重要价值。
出版日期
2010年04月14日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
