目的：分别构建Livin、Survivin基因短发夹RNA（shRNA）真核表达载体，探究联合转染Livin和Survivin真核表达载体对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响。方法：分别设计并构建针对Livin、Sur—vivin基因shRNA真核表达载体pSD11-Livin和pSD11-Survivin，脂质体法单独或联合转染肝癌HepG2细胞，分空白对照组、质粒对照组、Survivin组、Livin组和共转染组。荧光定量PCR、Westernblot分别检测Livin、SurvivinmRNA及蛋白的相对表达量，MTT法检测细胞增殖的变化，TUNEL法检测细胞凋亡率。结果：针对Livin、Survivin基因的shRNA真核表达载体构建成功。共转染组Livin、SurvivinmRNA相对表达量分别为0．120±O．022、0．325±0125，与单独转染组相比显著降低（P〈0．05）；共转染组Livin、Survivin蛋白相对表达量分别为O．412±O．099、0．473±0．051，与单独转染组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。共转染组转染后48、60、72h细胞生长抑制率均显著高于单独转染组（P〈O．05），转染后48h细胞凋亡率明显上升（P〈O．05）。结论：针对Livin、Survivin基因的shRNA真核表达载体构建成功。联合转染pSD11-Livin和pSD11-Survivin更有效地降低了Livin和Survivin基因在HepG2细胞中的表达，更显著地抑制了肝癌细胞的增殖，促进了肝癌细胞的凋亡。
