目的分析鼠伤寒沙门菌(St)细菌影负载防龋DNA疫苗对黏膜免疫效能的影响。方法收集St减毒株J357,同时转入噬菌体PhiX基因E表达质粒与pREP4质粒,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导,收集负载防龋DNA疫苗。按照随机原则,将20只SPF级BALB/c雌性小鼠分为A组(布比卡因包裹pVXA15μg)、B组(布比卡因包裹pGJGLU/VAX5μg)、C组(细菌影负载空载体pVXA15μg)、D组(细菌影负载防龋DNA疫苗pGJGLU/VAX5μg)共4组经鼻免疫小鼠,每组均为5只。采用酶联免疫吸附试验对各组小鼠唾液抗体的产生情况进行检测。结果经IPTG诱导后,对照组细菌生长速度较快;而表达基因E经IPTG诱导后,大量细菌出现死亡,随着诱导时间的延长,细菌的死亡数量明显进一步增多。经IPTG诱导前,取携带基因E的St中J357活菌数为2×1012个/L;而经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,其活菌数仅为5×108个/L,表明大量细菌被杀死。经酶联免疫吸附试验检测结果发现,唾液总IgA抗体水平在各组小鼠免疫前的比较,并无显著差异(P>0.05);相比A组,C、D组小鼠免疫后唾液总IgA抗体水平均明显升高(P<0.05);而C、D组唾液总IgA抗体水平与B组比较,均无显著差异(P>0.05)。经酶联免疫吸附试验检测结果发现,各组小鼠免疫前均未检出唾液特异性抗葡聚糖结合区IgA抗体;免疫后8周,D组唾液特异性抗葡聚糖结合区IgA抗体水平较A、B、C组均明显升高(P<0.05),而B组抗体水平与A、C组比较,均无显著差异(P>0.05)。结论经鼻黏膜途径免疫小鼠经St细菌影负载防龋DNA疫苗后可明显改善其免疫效能。
