【摘要】 目的 观察当归对Χ线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响。方法用100%当归浸出液定期给小鼠灌胃,5d后,用Χ线照射0.11 CGY,1次/d,共照射5次,检测小鼠骨髓细胞增殖和抗体的产生。结果用药组小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生有显著增强作用,与照射组相比均有非常显著性差异(P<0.001)。结论 当归有明显抗X线辐射、促进小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生的作用。
【关键词】 当归 骨髓细胞增殖 抗体 小鼠
AbstractObjectiveTo research the effect of Angelica sinensis Diels, (ASD) on hemopoietic rehabilitation of radiated mice . MethodsFilled the stomaches of the mice with 100% water extract of ASD regularly for 5 days. The mice were radiated with X-radiation with a dose of 0.11CGY once each day for 5 days. Proliferation of bone marrow cell and the production of antibody were tested. ResultsThe proliferation of bone marrow cell and the production of antibody increased significantly in ASD group compared with control group (P<0.001). ConclusionASD can resist X-radiation obviously and enhance bone marrow cell proliferation and the production of antibody.
Key wordsAngelica sinensis Diels (ASD); Bone marrow cell proliferation; Antibody ; Mice
当归,始载于《神农本草经》,列为中品,历代本草均有收藏。当归使气血各有所归,故名。其为伞形科多年生草本植物当归Angelica sinensis(OIiv.)Diels 的根,主产于甘肃东南部岷县(秦州)、武都、漳县、成县等地以及陕西、四川、湖北、云南,其中以岷县产量多,质量亦佳,均为栽培。当归的主要功效有补血活血,调经止痛,润肠通便。笔者主要研究了当归对Χ线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响,以期为临床提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
当归(购于滨州医学院附属医院中药房)200 g加水2 000 ml,温火煎煮2 h,去渣浓缩为200ml备用。美国Multiskan产全自动酶标仪;CO2培养箱由美国Forma公司生产;美国产(IE.USA)冷冻离心机;超净工作台由苏州净化设备厂生产;日本东芝DGW-20ATOSHIBA500mA遥控胃肠机;辐射剂量测量用中国测试技术研究院产9206剂量仪;LPS为美国Sigma产品;MTT为FLUKA公司产品;二甲基亚砜(DMSO)为苏州化工研究所生产;RPMI-1640为美国GIBCO公司产品。
1.2 动物分组与给药
BALB/C小鼠 36只,体重18~22 g,雌雄兼有,购于北京医科大学实验动物中心。将动物随机分3组,每组12只。Ⅰ组为生理盐水对照正常组;Ⅱ组为 盐水加照射组;Ⅲ组为当归药物加照射实验组。Ⅰ,Ⅱ组每天用生理盐水灌胃,0.5 ml/次,1次/d;Ⅲ组每天用当归液灌胃,0.5 ml/次,1次/d;Ⅱ,Ⅲ组于第6天在灌胃后30 min行全身暴露Χ射线 照射,用等效方野18 cm×18 cm,焦点-鼠距80 cm。每天照射0.11CGY,1次/d,共照射5次。
1.3 检测指标及方法
1.3.1 骨髓细胞增殖反应[1]
颈椎脱臼处死小鼠,无菌操作取小鼠双股骨骨髓细胞,调细胞浓度至5×106/ml,取100 μl加入96孔细胞培养板中,设5个复孔,置37℃,5% CO2 培养箱中培养72 h,终止前5 h,掺入MTT(5 mg/ml)10 μl/孔,终止培养时离心弃上清,每孔加入100 μl DMSO 溶解MTT还原产物甲臜(Formazan)溶解缓冲液,充分震荡10 min,全自动酶标仪用560 nm波长测OD值,以OD值代表骨髓细胞活性。1.3.2 定量溶血分光光度测定法(QHS)[2]
本法体外B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量(以OD值表示),其结果可反应机体体液免疫功能。实验第5天分别将5%的绵羊红细胞0.2 ml注入各组小鼠腹腔内,第11天眼球放血,颈椎脱臼致死,常规取脾脏,然后进行脾细胞计数,调细胞浓度至1×107/ml,取脾细胞1ml,1∶10新鲜豚鼠血清(补体)1 ml,0.2%绵羊红细胞(SRBC)1 ml,混匀,37℃水浴1 h,1 500 r/m离心10 min,取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450 nm波长处测A值,作为QHS反应值。
1.4 统计学方法
实验结果采用组间均数差异t检验的方法进行统计学分析。
2 结果
当归对小鼠骨髓细胞增殖、抗体产生的影响见表1。表1 当归对小鼠骨髓细胞增殖、抗体产生的影响(略)
3 讨论
当归是临床上常用的中药,现代研究[3]证实,当归有明显的抗辐射损伤作用。用当归对辐射损伤的家兔进行腹腔注射,引起家兔染色体畸形变率明显下降,连续注射9 d,家兔染色体畸变率完全恢复正常,体外用药实验结果与体内注射结果相同。对Co-γ射线辐射损伤后的小鼠通过腹腔给予当归注射液,连续给药80 d后发现,受辐射损伤后的卵巢于照射后第15天开始进入恢复期,比未给当归的对照组显著提前。当归多糖对受照小鼠的造血细胞亦有辐射防护作用,照射前注射当归多糖能促进照射小鼠脾脏内源性造血灶形成,提高受照小鼠骨髓有核细胞计数,当归多糖对CFV-C和CFV-S的放射敏感性影响较少,但能防止照射后效应,能显著促进小鼠CFV-C和CFV-S的恢复,这可能是其抗辐射作用原理之一。水浸液灌饲小鼠,能显著促进血红蛋白及红细胞的生成,其抗贫血作用可能与所含的维生素B12、烟酸、叶酸、亚叶酸等有关。从上述实验中可以看出,当归可刺激小鼠抗体的产生,使抗体分泌量增加,与照射组相比有非常显著性差异(P<0.001)。当归对骨髓细胞增殖有明显促进作用,与照射组相比有非常显著性差异(P<0.001)。骨髓细胞增殖归之于集落刺激因子(CSF)的存在[4],CSF是一组在体内外均能强烈刺激造血祖细胞增殖,分泌并形成细胞集落的低分子细胞因子。本研究结果表明,当归有明显抗辐射的作用,调节骨髓造血和促进抗体产生的作用。口服当归液可作为Χ线检查病人或接触Χ线者的保健饮品,有利于减轻Χ线接触者免疫造血功能下降的弊端,提高疗效。本文为当归的临床应用提供了科学依据。
【参考文献】
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