不同真空采血管对38项生化检验项目的可比性分析

【关键词】  真空采血管 生化检验

　　随着临床检验仪器自动化程度的提高，样品前处理已成为限制检验项目测定速度的瓶颈，这时传统的自然析出血清样本无法满足临床快速检测的要求。近年来，不同的抗凝真空管广泛用于临床生化项目的检测，在速度提高的同时，能否保证检验结果准确非常重要。为此，作者选择了普通促凝真空管和两厂家的肝素锂抗凝管，比较三者之间检验结果的一致性，为指导临床正确采用真空采血管提供参考数据。现报告如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  抗凝管 

　　血清组采用拱东促凝真空管；肝素锂A组采用拱东肝素锂抗凝真空管；肝素锂B组采用泰尔茂肝素锂抗凝真空管。

　　1.2  仪器和试剂 

　　雅培AEROSET全自动生化分析仪。前白蛋白（PALB）试剂，由芬兰ORION诊断公司提供，相应配套标准品和质控品；钾（K）、钠（NA）、氯（CL）、尿素（UREA）、淀粉酶（AMY）、碱性磷酸酶（ALP）试剂由美国雅培公司提供，相应配套标准品和质控品；载脂蛋白E（apoE）、载脂蛋白小a (LP-a)、高敏C反应蛋白（hs-CRP）试剂由日本日东纺绩株式会社提供，相应配套标准品和质控品；其余项目均为北京利德曼试剂及相应配套标准品和质控品。

　　1.3  样本采集与处理 

　　收集2008年1至3月本院急诊患者23例，其中男14例，女9例；分别用拱东促凝管、拱东肝素锂抗凝管与泰尔茂肝素锂抗凝管采集外周血各3ml，室温放置15min后，3000rpm离心15min。标本测定前,进行定标并测定质控品，结果均在控时,再进行标本检测,重复测定三次取平均值。

　　1.4  数据处理 

　　用SPSS 13.0软件进行统计学处理，结果以(x±s)表示，三组间均数采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

　　2  结果

　　2.1  三组间的均数和方差分析 

　　肝素锂A、B组与血清组经F检验结果显示，钙（CA）、肌酸激酶MB（CK-MB）、铁（FE）、前白蛋白（PALB）4项的差异有统计学意义（p<0.05）,其余34项差异无统计学意义。见表1。表1  三组间38项生化项目检测结果的比较(略)

　　2.2  三组间部分项目的两两比较
 
　　经q检验发现，其中CA、FE在肝素锂组（包括A与B两组）和血清组中有显著性差异；而PALB在三组间均有差异，CK-MB则仅在肝素锂A组与血清组中有区别，见表2。表2  三种试管间部分项目的两两比较（略）注: A-血清组；B-肝素锂A组；C-肝素锂B组　3  讨论
      
　　生化检验目前已经成为临床医师诊断疾病、观察疗效、判断病情的发展和预后不可或缺的手段，但是几乎每个实验室均存在着影响生化检验的各种因素。随着近年来自动化程度的不断提高，各医院检验科先后引进了各种类型的自动化生化分析仪，提高了临床生化分析的精密度，同时检测方法学的改进和校准品质量的提高，使分析的准确度有很大程度提高，但分析过程之外的影响因素常被临床医生和检验工作者所忽视，尤其是分析前的质量控制。分析前质控是临床生物化学实验的首要环节，不恰当地收集标本，不注意影响标本成分变化的各种因素，常是导致实验不可靠的主要因素，且又不容易被发现，因而必须加以重视。肝素锂对检验项目的影响,不同文献给出了不同的结论［１～５］。
       
　　本研究探讨了拱东和泰尔茂肝素锂试管测定某些生化项目的结果比较（以促凝管作为对照），结果表明：两种肝素锂对腺苷脱氨酶（ADA）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、谷丙转氨酶（ALT）、淀粉酶（AMY）、载脂蛋白A（ApoA）、载脂蛋白B（ApoB）、载脂蛋白E（ApoE）、谷草转氨酶（AST）、β2微球蛋白（β2—MG）、尿素（UREA）、胆碱脂酶（CHE）、总胆固醇（CHOL）、肌酸激酶（CK）、总胆汁酸（TBA）、甘油三酯（TG）、氯（CL）、总二氧化碳（CO2）、肌酐（CREA）、直接胆红素（DBIL）、γ-谷氨酰转氨酶（GGT）、糖（GLU）、果糖胺（GSP）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、高密度脂蛋白（HDL）、乳酸脱氢酶（LDH）、脂蛋白小a ［LP(a)］、镁（MG）、钠（NA）、总胆红素（TBIL ）、总蛋白（TP）、尿酸（URIC）的测定不产生影响，三者无显著性差异（p>0.05）。钙和铁的测定经过q检验发现：促凝管和两种肝素锂有显著性差异，两种肝素锂之间无显著性差异。血清钙明显低于血浆钙，可能与CA 参与了凝血有关；此外，血液在凝固时由于消耗了纤维蛋白原和某些参与血液凝固的蛋白质，同时血小板在凝固时所释放的物质也进入血清，使血浆与血清的蛋白质浓度、pH、黏度等不相同，基于这些差异对不同反应体系可产生不同的基质效应［６］，特别是pH的差异对血浆与血清中钙影响较大。而对于FE测定，作者更倾向于肝素锂本身对FE测定方法的一种干扰，因为几乎所有肝素锂血浆FE均高出正常较多，因此临床测定FE如用了肝素锂抗凝血将产生严重错误。CK-MB测定差异，一方面肝素锂可能会抑制CK-MB活性，也可能是试管里的其它成分抑制了CK-MB活性，亦或者是对该测定方法中的某一步产生了干扰尚有待研究。对于PALB的测定，三者之间两两有显著性差异，作者认为两种肝素锂管中的某一成分对抗原抗体反应的某一步产生了影响，干扰程度与该成分浓度有关系。另外需指出的是：本实验钾的测定，虽然无统计学意义,但从均数来看血清钾的浓度＞血浆钾0.20mmol／L，实际上方差分析显示P值略＞0.05，如果增加例数可能将得到更有价值的结果。血浆与血清钾两者的差异有如下原因：首先血液凝固过程中血块收缩挤压，细胞膜通透性发生改变，使血细胞中的钾释放到血清中。血浆中细胞破碎的几率＜血清，释放出的钾离子也较血清少；再则肝素是一种酸性粘多糖阴离子多聚电解质，能够与血液中的阳离子结合。肝素与血钾结合生成肝素钾降低了钾的活性度导致钾测定结果偏低，偏低程度与肝素浓度密切相关［７］；血浆中血小板也可能破裂阻止血凝块形成，血浆钾降低 。

   
　　由此可见，鉴于上述部分项目在血清与血浆之间的差异，甚至不同厂家相同类型肝素锂试管采集的血样之间的差异,将造成临床无法预测的误差和混乱。因此,作者认为：在日常工作中应明确血清与血浆各自的医学决定水平和参考值范围，以便为临床提供准确和真实的实验数据；同时规范真空采血管生产工艺，缩小试管本身带来的差异；再者就当前条件下，建议各医院实验室做类似实验，指导临床正确使用真空管。

【参考文献】
  1 阴斌霞,黄芳,高宁,等. 肝素锂抗凝血浆与血清样品28项生化检验项目的可比性分析. 实用医技杂志, 2006,(18)：3167～3169.

　　2 谭云昌. 血清与血浆中常规生化指标测定结果分析. 中国误诊学杂志, 2007,7(19)：4522～4523.

　　3 王龙武,葛亚娟,王妹芳,等. 肝素锂抗凝血用于门急诊临床化学检验的可行性评价. 检验医学, 2007, 22(1)：75～76.

　　4 周艳. 肝素锂抗凝真空管对临床生化结果的影响.实用医技杂志, 2005,12(9)：2370.

　　5 信朝霞,柴连海,黄燕. 肝素管取血浆与干燥管取血清心肌酶谱检测结果的比较研究.华北煤炭医学院学报,2006,8(1)：12～13.

　　6 苏增留,张克坚. 基质效应与准确度评价.江西医学检验，2000，18（3）：176～179.

　　7 邱志林,方建伟. 肝素钠抗凝血测定钾钠氯及影响. 上海医学检验杂志，2001，16（6）：337～378.