乙肝两对半定量及 DNA定量联合检测的意义探讨与分析

乙肝两对半定量及 DNA定量联合检测的意义探讨与分析

尤少洪 陈梅云 张菊英

福建省泉州市永春县医院检验科 362600

【摘要】目的：分析乙肝两对半定量及DNA定量联合检测的意义。方法：选取我院2017年1月～2019年1月收治的120例乙型肝炎患者为研究对象，以酶联免疫法（ELISA）和荧光定量法（FQ-PCR）对乙肝两对半定量以及DNA定量进行检测，并探讨二者联合检测的意义和价值。结果：HBV-DNA在不同乙肝两对半模式下阳性者符合率存在较大差异（P＜0.05）；乙肝两对半和HBV-DNA对HBeAg阳性检出率对比无显著差异（P＞0.05）。结论：在乙肝早期检查中采用乙肝两对半定量以及DNA定量可以有效的反应HBV感染情况、治疗和传染性情况，值得应用。

【关键词】乙肝两对半；DNA；酶联免疫法；荧光定量法

乙肝即乙型病毒肝炎，是一种常见的感染性疾病。具有起病隐匿、病程常和诊断以及治疗难度大的特点，早期多表现为恶心、腹胀和肝区疼痛，疾病严重可出现肝掌、脾大和肝功能异常等症状，对患者身心健康和生命安全产生严重危害^[1]。为此，加强乙肝早期检测显得尤为重要。血清学标记物检查是目前临床早期分析和判断乙肝严重程度以及传染性的首选方法，而实践发现血清学标记物虽能够取得一定效果，但其准确新更无法肯定^[2]。为此，我院为进一步提供早期临床检测乙肝的准确性，将乙肝两对半和乙肝病毒DNA用于其检测中，并对其结果进行分析，以此为临床早期选择检查方式提供参考经验，内如如下。

1资料与方法

1.1一般资料

以2017年1月～2019年1月为研究时间段，选取就诊于我院感染科的120例乙肝患者。其中，男73例，女47例，年龄28～65岁，平均年龄（41.05±2.07）岁，病程4个月～5年，平均病程（2.31±0.48）年。

1.2方法

乙肝病毒DNA定量：仪器和试剂选用为德国Roche公司生产的自动荧光仪（Light Cycler），而试剂盒有深圳匹基生物工程公司提供，采用荧光定量法（FQ-PCR）对其进行检测，操作方法为：取机体肝组织RNA500ng，提取标本后根据反转录反应情况进行调整，根据组织特性选用一定目标基因并按照特定的组分配置PCR反应液，配置反应液的时候需要在冰面上进行，以此保证标本的活性。最后按照三步法、即变性、退火、延伸等进行循环，最后计算所得数据。

乙肝两对半定量：仪器和试剂均采购至美国Abbott公司，以酶联免疫吸附实验对其进行测定，方法为：取肝组织标本，将其中的特异性抗原和固相载体进行连接，由此形成固相抗原抗体。完成后，将未结合的抗原和杂质进行去除。在原本的抗原中加入稀释之后的标本血清，使其特异抗体和抗原进行结合，由此形成固相抗原抗体复合物。待其形成后，对其进行洗涤并确保载体上只存在特异性抗体。由于部分免疫球蛋白和血清的杂质无法和固相抗原进行结合，进而可增加洗涤过程中的有效性。最后，在复合物中加入酶标抗抗体，使其结合，进而间接形成标记酶。而洗涤后的载体上的酶量则可有效的代表特异性抗体的量。在经过常规HE染色后，根据颜色深度可判定标本受检抗体的具体量，而酶标仪显示读书则可对实验结果进行判定。

1.3统计学方法

数据纳入SPSS22.0软件分析，计量资料以（`x±s）表示，t检验；计数资料用（%）表示，卡方检验，P＜0.05有统计学意义。

2结果

2.1乙肝两对半和HBV-DNA检查结果分析

HBV-DNA在HbsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）以及HbsAg（+）、HBeAg（+）诊断阳性率均为100%；而对HbsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）以及HbsAg（+）、HBcAb（+）诊断阳性率不足50%，见表1。

表1：乙肝两对半和HBV-DNA检查结果对比

2.2乙肝两对半和DNA定量对HBeAg诊断情况

乙肝两对半和HBV-DNA对HBeAg阳性检出率对比无显著差异（P＞0.05），见表2。

表2：不同方式对HBeAg诊断情况对比[n(%)]

3讨论

近几年，随着环境污染和社会压力增大，慢性乙肝发生率呈现逐年上升趋势，调查发现，我国乙肝感染率高达7%，而全球每年因乙肝死亡的人数在100万左右。乙肝病毒是造成慢性乙肝的罪魁祸首，而乙肝病毒主要存在于肝细胞中，其出现定居和复制后，会导致机体肝组织出现损伤，由此引发多种肝病^[3]。为此，加强早期对慢性乙肝的诊断显得尤为重要。

本次研究发现，在HbsAg、HBeAb和HBcAb杨兴忠，乙肝患者血清HBV-DNA阳性率为25.71%，其结果的发生说明抗HBe的存在并不能完全的表示机体内没有病毒复制，其结果和相关文献资料报告一致而^[4]。HbsAg、HBcAb二者阳性中，HBV-DNA阳性率为42.31%，其结果提示机体可能存在较为严重的病毒复制。而根据结果2发现，乙肝两对半和HBV-DNA对HBeAg阳性检出率均在70%以上。其中HBeAg是乙型肝炎E抗原，其主要提示乙肝病毒存在复制或具有强烈的传染性。而根据其他血清学标志物，包括HBsAg、HBsAb、HBcAg、HBcAb等变化情况，均可提示乙肝病毒的发展程度以及发作情况^[5]。由此可见，乙肝两对半和HBV-RNA在早期判断机体慢性乙肝程度和进展情况中具有重要意义。

综上所述，将乙肝两对半标志物以及HBV-DNA定量用于早期慢性乙肝的检查中，可有效的反应机体的感染情况、传染性以及治疗和预后改善效果，值得推广。

参考文献

[1]戴淑惠, 赵军. 乙肝五项检测与HBV-DNA定量的相关性在乙型肝炎诊断中的应用分析[J]. 中外医学研究, 2018, 16(27):15-17.

[2]方菊, 李欢, 綦鹏,等. 乙型肝炎患者乙肝两对半模式和乙肝病毒DNA定量相关性研究[J]. 中国中西医结合消化杂志, 2017, v.25(07):54-56.

[3]张雪丹, 翁跃颂. 慢性乙型病毒性肝炎患者血清HBV-DNA定量检测水平与肝功能指标及乙肝标志物间的关系分析[J]. 中国基层医药, 2017, 24(22):3445-3448.

[4]邓婷, 袁炜华. 乙肝标志物定量检测指标与乙肝病毒DNA定量、ALT的关系[J]. 中国实用医药, 2017, 12(19):10-12.

[5]赵棉, 张力, 赵亚妮. HBV DNA定量与乙肝血清学标志物定量联合检测乙肝病毒感染的效果分析[J]. 实用临床医药杂志, 2018, 22(15):37-40.