非小细胞肺癌患者血清Hpa和MMP-9水平检测及临床意义

非小细胞肺癌患者血清Hpa和MMP-9水平检测及临床意义

涂祥俊1，兰四友2，戴曦2，苏永强2，邓述恺2

（1.四川省高县中医医院内科，四川高县645150；2.泸州医学院附属医院呼吸内一科，四川泸州646000）

【摘要】目的：通过对非小细胞肺癌患者血清Hpa水平和MMP-9水平表达的检测来探讨其临床意义。方法：选取2012年6月-2013年8月的于本院进行治疗的72例非小细胞肺癌患者为观察组，另选取同一时期进行健康体检的20名健康人员为对照组，然后将两组患者的血清Hpa和MMP-9水平进行比较，并将观察组中不同年龄、性别、病理分类、分化程度及TNM分期者的血清Hpa和MMP-9水平进行比较。结果：观察组患者的血清Hpa和MMP-9水平均明显高于对照组，且TNM分期Ⅳ期者高于Ⅰ～Ⅲ期者，Ⅱ～Ⅲ期者则高于Ⅰ期患者（P＜0.05），而不同性别、年龄、病理类型及分化程度之间则无显著性差异（P＞0.05）。结论：Hpa和MMP-9对非小细胞肺癌的发生及发展有重要作用；Hpa和MMP-9对于了解患者的病情进展情况有较高的临床价值。

[关键词]非小细胞肺癌；血清；乙酰肝素酶；基质金属蛋白酶-9

MeasurementandclinicalsignificanceofserumlevelsofMMP-9Hpainpatientswithnon-small-celllungcancer

TuXiangjun1，LanSiyou2，DaiXi2，SuYongqiang2，DengShukai2

（1.TheDepartmentofInternalMedicine,?theHospitalofTraditionalChineseMedicine,SichuanGaoxianCounty645150,China；2.TheFirstDepartmentofRespiratoryMedicine,theAffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege,Luzhou646000,China）

基金项目：四川省卫生厅项目（编号：100260）

作者简介：涂祥俊（1976-），男，硕士，主治医师，主要从事呼吸系统疾病研究。E-mail：tuxiangjun128@163.com。

通讯作者：邓述恺（1968-），男，教授，硕士生导师，主要从事肺癌的基础与临床研究。E-mail：dsk_lan@163.com。

[Abstract]Objective：ToinvestigatetheexpressionofserumHpa,MMP-9inpatientswithnon-small-celllungcancer，inordertoprovidetheevidencefortheirclinicalsignificance.Methods：72patientswithnon-small-celllungcancerinourhospitalfromJanuary2012toDecember2012wereselectedasobservationgroup，and20healthypersonsatthesameperiodwereselectedascontrolgroup;thentheserumlevelHpaandMMP-9oftwogroupswerecompared，andtherelationshipbetweenserumlevelofMMP-9,Hpaandpatientsandages，gender，pathologicaltypesandstagesofdifferentiationwerealsoanalyzed.Results:serumlevelsofHpaandMMP-9inpatientswithTNMstageIVwerehigherthanthoseofstageⅠtoⅢ（P＜0.05）;stageⅡandⅢwerehigherthanthoseofstageⅠ（P＜0.05）.Conclusion：HpaandMMP-9mayhaveanimportantroleindevelopmentofNSCLC,andtheyhadhigherclinicalvalueforunderstandingthedevelopmentandprognosisofpatientswithNSCLC,HpaandMMP-9mayhavecooperativeeffectiveininvasionandmetastasisinNSCLC，butthemechanismsarestillunclear.

[Keywords]non-small-celllungcancer(NSCLC)；serum；heparanase(Hpa)；Matrixmetalloproteinases-9(MMP-9).

转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为，也是恶性肿瘤致死的主要原因。肿瘤细胞细胞转移必须首先穿过细胞外基质（Extracellularmatrix，ECM）和基底膜（Basementmembrane，BM）才能向远处转移，乙酰肝素酶（Heparanase,Hpa）与基质金属蛋白酶-9（Matrixmetalloproteinases-9,MMP-9）在降解ECM和BM的过程中起着十分重要的作用，本文中我们通过酶联免疫吸附法（enzyme-linkedImmunosorbentassay，ELISA）检测非小细胞肺癌患者和正常健康对照组血清中MMP-9、Hpa表达水平并与疾病进展情况的关系进行研究，分析血清Hpa和MMP-9表达水平与非小细胞肺癌的发生发展及浸润转移的关系。

1.材料与方法

1.1研究对象选取本院治疗的NSCLC患者72例为观察组，另选取同一时期进行健康体检的20名健康人员作为对照组。分组及各组情况见表1和表2

表1TNM分期病理类型及分化程度

1.2方法将对照组健康体检人员和观察组非小细胞肺癌患者的血清MMP-9和Hpa水平进行检测，取两组人员晨起空腹静脉血4.0ml送检，由资深检验人员进行操作检验，试剂盒为购自美国RD公司由苏州卡尔文生物科技有限公司分装的乙酰肝素酶（Hpa）ELISA检测试剂盒和基质金属蛋白酶9（MMP-9）ELISA检测试剂盒；各步骤严格按照说明书操作。

1.3．统计方法计数资料以例数表示，采用SPSS21.0统计软件对数据进行分析处理，方差齐的样本多组间的差异显著性比较采用单因素方差分析（one-wayANOVA）；方差不齐的采用非参数检验完全随机设计多样本比较（Kruskal-WallisHtest），并采用Independent-sampletesMann-WhitneyU检验进行组间的两两比较。相关性检验Spearman相关分析。双侧P<0.05被认为差别有统计学意义。

2.结果

2.1不同性别、年龄、病理类型及分化程度在各组间构成情况比较，差别没有统计学意义，见表3。

表3对照组及TNM各组间年龄、性别、病理类型、分化程度比较

2.3各组间Hpa、MMP-9水平比较，NSCLC患者血清Hpa和MMP-9水平显著高于对照组，P均＜0.05，TNM分期各组血清MMP-9和Hpa水平也存在显著差异，TNM分期Ⅳ期者高于Ⅱ～Ⅲ期，Ⅱ～Ⅲ期高于Ⅰ期P均＜0.05，。

表5Hpa、MMP-9对照组、TNM分期各组比较

3．讨论

Hpa是人体内唯一能够降解ECM和BM中有一种重要的非结构蛋白—硫酸乙酰肝素蛋白多糖（Heparansulfateproteoglycans，HSPG）的内切酶，在肿瘤细胞的发生与发展过程中起着极其重要的作用。Chen等[1]研究发现：Hpa在原发性肝癌组织中的表达水平明显高于肿瘤临近正常肝组织、肝硬化组织及正常肝组织，提示HPA在促使原发性肝癌发生、浸润、转移中发挥着重要作用；Cohen-Kaplan等[2]在对头颈部肿瘤的研究中发现，Hpa的高表达能够促时表皮生长因子受体发生磷酸化，从而促进肿瘤细胞增殖、集落形成以及肿瘤细胞发生迁徙、转移；ZhangQF等[3]在对肺腺癌的研究发现，HPA的高表达能促进肺腺癌细胞的增值及转移；ZhangJ等[4]研究发现:乙酰肝素酶多抗原肽2的过度表达与胃癌浸润、转移相关。近年来针对Hpa位点的基因治疗已经陆续有报道，PI-88和siRNA是针对Hpa有明确价值的肿瘤抑制剂[5-6]。

MMP-9是迄今为止发现的与肿瘤侵袭和转移关系最密切的一类蛋白水解酶[7]。较多的研究[8-10]发现，MMP-9的高表达与消化道肿瘤胃癌、结直肠癌等的发生、侵袭、淋巴转移密切相关；Cupic等[11]MMP-9的表达水平与乳腺癌明显相关；Peng等[12]从17篇论文中的2029例NSCLC分析发现：MMP-9的高表达与非小细胞肺癌转移及预后不良明显相关。近年来针对MMP-9的药物及抑制剂一直是研究的热点，目前发现番石榴叶提取物的丁醇成分、牛樟芝果实乙提取物、橙皮苷和木蝴蝶素A等对MMP-9有一定的抑制作用[13-15]。

本实验研究显示：不同性别、年龄及病理类型及分化程度之间的血清Hpa和MMP-9水平无明显差异，非小细胞肺癌患者血清中的Hpa和MMP-9水平均明显高于健康人群，同时不同TNM分期患者之间也存在明显差异，分期越高者其水平越高，说明Hpa和MMP-9参与了非小细胞肺癌的发生发展和浸润转移，对于了解患者的病情进展情况有较高的临床价值。Hpa水平与MMP-9水平Spearman相关系数为0.783，有明显的正相关，说明Hpa和MMP-9在非小细胞肺癌的发生发展及浸润转移过程中可能存在协调作用。但在NSCLC的浸润转移过程中，Hpa、MMP-9两者如何相互作用，是否存在激活后的Hpa能与MMP-9某个位点结合增强MMP-9的作用，或者激活后的MMP-9能对Hpa的活性有直接的促进作用等目前还不清楚，还有待于今后进一步的研究证实。

参考文献

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