探讨第三代与第四代ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性

探讨第三代与第四代ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性

鲁红霞

岳阳市中心血站414000

【摘要】目的：探讨第三代与第四代ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性,为血液的鉴定提供参考。方法：选择以在2018年4月1日-2018年5月31日进行无常献血的5842例献血者的血液样本为实验对象，同时使用第三代与第四代ELISA试剂去检测5842例样本。对单一试剂检测阳性的样本在使用核酸检测进行再确认。结果：第四代ELISA试剂检测抗HCV的检测值比第三代ELISA试剂检测抗HCV的检测值要高；第三代与第四代ELISA试剂检测的结果无明显差异；单一试剂检测程阳性的样本使用核酸检测均为阴性。结论：第四代ELISA试剂检测抗HCV的敏感度比第三代ELISA试剂检测抗HCV的敏感度要高，两代试剂检测的准确性比较还值得再次讨论。

【关键词】第三代ELISA试剂；第四代ELISA试剂；抗-HCV

HCV为是一种有包膜呈球形的正单链RNA病毒。它的中文名称为丙型肝炎病毒，是造成丙型肝炎的致病病毒，主要是通过血液和体液进行传播[1]。据世界卫生组织估计，由于丙型肝炎病毒的特点和人体的免疫功能不足等多方面因素，感染者的免疫系统往往难以有效清除病毒，导致大约有65%的丙型肝炎病毒感染者发展为慢性肝炎，慢性肝炎患者中的约25%将发展成肝硬化[2]。根据相关机构报道全球约有1.7亿人感染了丙型肝炎病毒，在我国健康人群抗HCV阳性约3800万人[3]。所以加强在血液检测中对于抗HCV的检验方法的探讨十分重要，为了提高血液检测的成功率，又能减少对于血液的消耗。本文将从试剂的选择方面进行探讨，具体研究过程如下。

1材料与方法

1.1材料

选择以在2018年4月1日-2018年5月31日进行无常献血的5842例献血者的血液样本为实验对象，所以血液样本都是使用ED-TA-K2进行抗凝。

1.2试剂

试剂：第三代和第四代ELISA试剂均是使用同一家公司生产的ELISA试剂盒。实验前都进行查看，所用的试剂盒均在使用期限内且没有破损。抗-HCV质控血清的使用规格为0.5NCU/ml。

1.3方法

使用第三代和第四代ELISA试剂盒检测所有的标本，检测不足均是按照使用说明来进行操作，其中检测值大于CUTOFF值的80%则被认定为反应阳性。再对单一试剂程阳性的样本使用核酸检测及使用罗式试剂进行检查，查看其是否是抗-HCV阳性。

1.4评价方法

根据试剂盒的检测值和CUTOFF值检的比较得出测抗HCV结果，其中检测值大于CUTOFF值的80%则被认定为抗-HCV检测程阳性；检测值小于CUTOFF值的80%则被认定为抗-HCV检测程阴性。其中阳性符合率=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）*100%；阴性符合率=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）*100%；总体样本符合率=（真阳性例数+真阴性例数）/总例数*100%。

使用两种试剂检测20次0.5NCU/ml的抗-HCV质控血清，观测其S/CO值。

1.5统计学方法

纳入SPSS22.0软件分析，计数资料用(%)表示，卡方检验，P＜0.05有统计学意义。

2结果

2.1检测结果对比

两种试剂实际的检测结果没有明显的差别第三代和第四代ELISA试剂检测程阳性的概率分别为2.74%（16/5842）和2.05%（12/5842）具体情况如下表：

2.2阴、阳符合率

两种试剂实际的检测结果的符合率差别不大，总符合率为99.79%（5830/5842）具体情况如下表：

2.3两种试剂检测值比较

两种试剂检测0.5NCU/ml的抗-HCV质控血清的检测值的差别较大，第四代试剂的检测值大约是第三代试剂的8倍具体情况如下表：

3讨论

丙型肝炎病毒（HCV）主要的传播途径是血液传播，为了血液的使用安全和输血病人的健康。根据《血站技术操作规程》中的规定，血站在收到献血者的血液后要对血液使用两种不同厂家生产的不同的测试试剂对血液进行两次丙型肝炎病毒的检测，两种试剂都是阴性反应才能将血液用于临床[4]-[5]。由于在试剂生产中使用的丙型肝炎病毒抗原的来源和组合等存在差异，所以可能使得使用两种试剂的检测结果存在明显的差异。

根据相关研究的结果表明使用两种试剂对血液进行丙型肝炎病毒检测时，两种试剂都程阳性反应的标本中有60%确认为阳性，而单一试剂反应程阳性的样本中很少会最终确认为阳性。从本次实验的结果中看，第三代和第四代ELISA试剂检测抗HCV结果和阳性符合率的差异性不大，可能的原因是，由于样本中抗-HCV检测程阳性的样本过少的缘故。从两种试剂对于0.5NCU/ml的抗-HCV质控血清的检测值比较发现，第四代的ELISA试剂对于丙型肝炎病毒抗体的检测更加的灵敏，第三代是使用间接测定法而第四代使用的是双抗原夹心法。两者相比之下，第四代ELISA试剂的灵敏性更高，提高了丙型肝炎病毒抗体的检出率。

虽然有部分血站已经引入了核酸检测这种更加准确的检测方法，但是还是有大量的血站使用的是使用两种试剂的检测方法。本次实验中对单一试剂检测程阳性的样本最终都确认为无阳性，使用两次ELISA试剂检验不能够很好的增加阳性标本的检出正确率，两次检验并没有起到相互检测的效果。两次检测还会导致大量的血液浪费。

综上所述，在选择ELISA试剂时，要尽量的选择对丙型肝炎病毒抗体的检测更加的灵敏第四代ELISA试剂。而为了提高检测的准确性和减少对血液的不必要浪费，在检测时要使用更加精确的检验方法和在血液的筛选模式中加以改进。

参考文献

[1]卢青松,江俊.ELISA试剂检测抗HCV反应性结果研究[J].临床医药文献电子杂志,2018,5(66):122+124.

[2]邹宵萌.ELISA检测抗-HCV灰区、弱反应标本与FQ-PCR检测结果对比分析[J].临床输血与检验,2017,19(5):505-507.

[3]陕西咸阳地区无偿献血者抗-HCV检测及RIBA确证分析[J].陕西医学杂志,2017,46(11):1612-1614.

[4]李莉华,韩雪峰,马印图.抗-HCV筛查反应性献血者的确证结果分析[J].临床输血与检验,2017,19(1):46-49.

[5]王文婷,胡兴斌,孙文利,等.97835例献血者传染性指标检测结果的不重合性分析[J].临床输血与检验,2017,19(2):148-150.