ERCC1基因多态性对晚期结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性的相关性研究

ERCC1基因多态性对晚期结直肠癌患者奥沙利铂化疗敏感性的相关性研究

马金华骆玉霜沈存芳

马金华骆玉霜沈存芳

青海大学医学院附属医院肿瘤内科青海西宁810001

【摘要】目的:探讨切除修复交叉互补基因1（ERCC1）Asn118AsnC→T,rs11615多态性与晚期结直肠癌患者对奥沙利铂为主方案一线化疗疗效的关系。方法:108例晚期结直肠癌患者采静脉血提取DNA,以real-timePCR法对ERCC1基因进行SNP分型。患者接受奥沙利铂为主方案化疗,观察疾病有效率（CR+PR）及肿瘤进展时间（TTP）,比较不同基因型与其有效率的关系。结果:108例入组患者总有效率为565%(61/108),其中ERCC1基因进行SNP分型，纯合基因型（C/C）与杂合基因型（C/T+T/T）在疾病有效组和无效组之间分布有统计学意义(χ2=7959，P=0005)。入组患者总中位TTP为6个月,C/T+T/T基因型患者中位TTP为6个月,与C/C中位TTP7个月相比,差异有统计学意义（χ2=24247P=0039）。结论:ERCC1Asn118Asn基因多态性与晚期结直肠癌患者接受奥沙利铂为主方案一线化疗的临床疗效有相关性,有待进一步临床研究。

【关键词】晚期结直肠癌;基因多态性;ERCC1;奥沙利铂ResearchontheclinicaloutcomeofadvancedcolorectalcancertreatedwithoxaliplatininfluencedbyERCC1genepolymorphisminperipheralblood

MaJinghuaLuoYuxiangShenCunfang

【Abstract】Objective:ToassesstheeffectofthepolymorphismofERCC1Asn118Asn(C→T,rs11615)ontreatmentresponseandTTPofadvancedcolorectalcancerpatientstreatedwithoxaliplatinasfirst-linechemotherapyregimen.Methods:DNAwasextractedromperipheralvenousbloodfrom108advancedcolorectalcancerrpatients.Real-timePCRwasusedforgenotyping.ERCC1genotypeswereanalyzedforassociationswithresponserate(RR)andtimetoprogression(TTP).Results:TheRRofcaseswas565%.Inthissubgroup,patientswithC/CgenotypedidshowdistinctlypreponderancecomparedtothosewithC/T+T/T,(X27959，P=0005).ThemedianTTPforall108patientswas6months,patientspossessingC/CgenotypeshowedamedianTTPof7months,wasdifferentfrom6monthsinpatientswithC/T+T/Tgenotype(OR=24247,P=0039).Conclusion:TheresultssuggestthattheERCC1Asn118Asngeneticpolymorphismsmaybeassociatedwithclinicaloutcomesofpatientswithadvancedcolorectalcancerracceptedoxaliplatinasfirst-linechemotherapy,butneedfurtherobservationanddemonstration.

【Keywords】Colorectalcancer;Genepolymorphism;Pharmacogenetics;Excisionrepaircross-complementationgroup1;Oxaliplatin

【中图分类号】R7353+7【文献标识码】B【文章编号】1674-8999(2013)08-0252-02

结直肠癌的发病率在世界各国尤其是发达国家中明显上升，是世界上最常见的恶性肿瘤之一.在美国,结直肠癌的发病率和死亡率均居所有肿瘤的第3位［1］。目前，对于已经出现转移的结直肠癌患者，5年生存率仍然很低［2］。复发转移性结直肠癌的主要治疗手段是化疗，奥沙利铂是第三代铂类抗肿瘤药,其药理作用主要是引起靶细胞DNA链内和链间的交联，阻碍DNA合成与复制，从而抑制肿瘤细胞的生长。奥沙利铂在5-Fu/CF的基础上提高了疗效和无进展生存时间［3］。

越来越多的研究表明［4］，核苷酸切除修复交叉互补组1（ERCC1）表达水平与肿瘤铂类耐药及患者生存时间相关，后续研究发现其118位密码子上存在C—T的多态性AAC—AAT,此突变虽未导致氨基酸的改变Asn—Asn,但却影响其基因的转录水平,进而影响DNA损伤修复能力,使不同基因型的患者呈现铂类化疗敏感性的差异。本实验针对晚期结直肠癌患者ERCC1基因118位密码子的多态性与奥沙利铂疗效及肿瘤进展时间(TTP)相关性进行前瞻性研究。

1资料与方法

11临床资料:入选2010年7月～2012年12月就诊于我院经病理学确诊的初治晚期结直肠癌患者108例,其中男性36例,女性72例,年龄21～80岁，中位年龄59岁。按2009年AJCC结直肠癌TNM分期标准,ⅢC期26例,Ⅳ期患者82例。腺癌104例，鳞癌4例。均有经CT、MRI等扫描可测量的评价病灶，ECOG≤2。

12化疗方案:所有入组患者均以奥沙利铂为主的化疗，FOLFOX6:L-OHP100mg/m2,静滴2h,d1;亚叶酸钙（CF）200mg/m2，静滴2h,d1;氟尿嘧啶（5-FU）400mg/m2,静注;5-FU24g/m2,46h持续性泵入，14d为1周期。XELOX:L-OHP130mg/m,静滴2h,d1;希罗达（Xeloda）1250mg/m2，2次/d，口服d1～d14;21d为1周期。

1．3疗效评价及观察指标:108例患者为了应用药物剂量等同在FOLFOX6方案化疗3个周期后或XELOX方案化疗2个周期后，评价其近期疗效。有效患者完成至少4个周期化疗，无效患者换用其他方案，同时终止该患者研究。按照RESIST11疗效评价标准进行评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD),以CR+PR计算有效率（RR）。所有患者均观察其至肿瘤进展时间(TTP)。

14样本收集和基因分型:108例晚期结直肠癌患者采外周静脉血5ml,应用上海华舜生物有限公司生产的血液基因组DNA抽提试剂盒,提取基因组DNA。基因分型采用美国应用生物系统公司(ABI)生产的TaqManSNP基因分型试剂盒及TaqMan-PCR混合试剂盒。用SDS软件进行分型分析。

15统计学分析:基因分布情况经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验。基因多态性与108例晚期结直肠癌患者疗效用卡方检验,并用Logistic回归模型计算OR及95%CI。用Kaplan-Meier法计算中位TTP,基因型与TTP之间的关系以Log-ranktest进行检验,并计算OR及95%CI。统计分析采用SPSS130软件进行。

2结果

21患者基本情况及其FOLFOX6或XELOX方案疗效本研究的108例晚期结直肠癌患者ERCC1基因118位密码子的第3位碱基存在3种等位基因型,其基因频率经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验,差异无统计学意义（P=0604）。各种可能影响化疗疗效的因素与化疗疗效进行比较,发现其疗效与化疗方案，病理分型,肿瘤部位，民族，性别ECOG评分差异无统计学意义,年龄及ERCC1基因型与疗效之间具有统计学差异(P=0025，P=0018)

108例患者给予FOLFOX6或XELOX方案化疗后,总的化疗有效率为565%(61/108),将至少含有一个T碱基的等位基因型合并(CT+TT)为一组,用Logistic回归将可能影响到化疗疗效因素进行校正后，T/T+C/T基因型组患者对FOLFOX6或XELOX方案化疗有效率为378%，而C/C基因型组对FOLFOX6或XELOX方案化疗有效率为662%，C/C基因型组患者有效率较T/T+C/T基因型组高，差异有统计学意义(χ2=7678P=0006)，提示：ERCC1的基因型与疾病疗效有关。

22ERCC1基因型与入组患者中位TTP的关系:108例晚期结直肠癌患者中位TTP为6个月,将至少含有一个T碱基的等位基因型合并CT+TT,其中位TTP为6个月,与纯合基因型CC中位TTP7个月相比,Log-rank检验发现差别具有统计学意义（χ2=24247P=0039）。

3讨论

化疗在晚期结直肠癌的治疗中占有重要地位，耐药是影响患者化疗疗效和生存率的主要原因。草酸铂是第三代铂类抗肿瘤药物，药学特性得到了改善，与氟尿嘧啶和亚叶酸钙联合方案，已成为结直肠癌的基本化疗方案。

目前研究［5］认为铂类耐药机制主要包括：药物外排增加、耐药相关基因的改变、DNA损伤修复功能增强、细胞凋亡受抑制等。其中，DNA损伤修复功能是铂类耐药机制研究的热点。越来越多的研究［6］表明，ERCC1表达水平与肿瘤铂类耐药相关。许多研究指出118C/T单核苷酸多态可能与铂类化疗药耐药相关。OkudaK［7］等人发现接受铂类为基础化疗的非小细胞肺癌患者中ERCC1多态性C118T与预后相关,密码子118野生型C/C较C/T或T/T均分别有更好的预后。

本实验入组的108例晚期晚期结直肠癌患者ERCC1基因118位密码子的第3位碱基存在3种等位基因型,其基因频率分别为:CC型667%（72/108）,CT型269%(29/108),TT型65%(7/108)。所有患者接受奥沙利铂为主方案一线化疗,其结果显示：将至少含有一个T碱基的等位基因型合并（CT+TT）后与纯合基因型CC之间RR有统计学差异（χ2=7959P=0005）；总中位TTP为6个月,CT+TT中位TTP为6个月,与CC中位TTP7个月相比,Log-rank检验发现差异具有统计学意义（χ2=24247P=0039）。我们的研究表明ERCC1118密码子C/C为优临床研究势基因型,与好的反应率和较长的TTP成正相关。

综上所述,ERCC1基因与恶性肿瘤的铂类耐药、治疗反应及预后具有一定关系。但基因型研究的争论仍在继续,需要我们更为大规模严格设计的研究进行深入探讨。

参考文献

［1］李学鹏,周军.了解大肠癌治疗新进展,改变大肠癌治疗观念［M］.中国全科医学,2009;12:4849

［2］SiegelR，NaishadhamD，JemalA.Cancerstatistics，2012［J］.CACancerJClin，2012，62（1）：1029

［3］温钦生，李邦华.结直肠癌组织中ERCC1表达与奥沙利铂耐药的研究进展［J］.江西医药,2010,45(3):260263

［4］ChenS,HuoX,LinY,etal.AssociationofMDR1andERCC1polymorphismswithresponseandtoxicitytocisplatin-basedchemotherapyinnonsmall-celllungcancerpatients［J］.IntJHygEnvironHealth,2010,213(2):140145

［5］LiSL,YeF,CaiWJ,etal.Quantitativeproteomeanalysisofmultidrugresistanceinhumanovariancancercellline［J］.JCellBiochem,2010,109(4):625633

［6］KweekelDM，GelderblomH，GuchelaarHJ.Pharmacologyofoxaliplatinandtheuseofphamacogenomicstoinpidualizetherapy［J］.CancerTreatRev，2005，31(2)：90105

［7］OkudaK,SasakiH,HikosakaY,etal.Excisionrepaircrosscomplementationgroup1polymorphismspredictoverallsurvivalafterplatinum-basedchemotherapyforcompletelyresectednon-small-celllungcancer［J］.JSurgRes,2009