基于临床免疫检验的质量控制的研究

基于临床免疫检验的质量控制的研究

刘喜萍

刘婧媛(辽阳市疾病预防控制中心质量管理科辽宁辽阳111000）

【摘要a

刘喜萍(奎屯市计划生育宣传技术指导站新疆奎屯833200)

【摘要】目的分析质量控制在临床免疫检验中的应用效果。方法随机选取2012年3月至2013年3月在我站门诊部接受治疗的50例患者，所有患者均进行免疫检验，对患者的临床资料进行回顾和总结，从免疫检验各个环节，分析免疫检验影响因素，并提出针对性措施，严格控制免疫检验质量，观察质量控制对免疫检验的作用。结果影响免疫检验的因素较多，包括检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等因素。结论对临床免疫检验进行质量控制，可有效提高检验准确性，为临床提供更可靠的诊疗信息。

【关键词】临床免疫检验质量控制

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）39-0180-02

免疫检验对临床诊断和治疗具有重要指导作用，检验结果的准确性直接关系到患者的疾病治疗，因此，应加强免疫检验质量管理，采用质量控制，确保免疫检验的准确性。本文对我站免疫检验影响因素进行了探讨，分析质量控制应用于免疫检验中的作用，现总结如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

随机选择2012年3月至2013年在我院门诊接受治疗、并进行免疫检验的50例患者，对患者的临床资料进行回顾性分析。从各方面分析免疫检验影响因素，如实验室卫生情况、湿度及温度变化，检验人员专业水平、工作经验、检验技术、检验操作、质量管理，检验仪器和设备维修、故障、保养、操作及计量校准等情况，找出免疫检验影响因素，通过质量控制措施，保证检验结果的准确性。

1.2质量控制方法

1.2.1标本质量控制

标本质量直接影响检验结果，因此，应重视免疫检验标本采集工作，严格控制标本采集时间，采用标准姿势采血，合理选择稳定剂及抗凝剂，并在进行标本采集前，告知患者相关注意事项，如标本采集前14d保持规律作息和饮食，前24h避免饮酒，空腹12h后再进行抽血[1]。标本采集完成后，应做好标本保存工作，详细记录患者的检测项目、标本采集时间以及基本资料等，以免出现混淆现象，根据检测项目和检测标本，选择合适的保存方式。标本采集后应尽快进行检测，以免保存时间过长，导致标本变质，影响检验结果的准确性。

1.2.2检验设备和仪器管理

检验设备和仪器在免疫检验中十分重要，对检验结果具有直接影响作用，因此，应提高检验设备仪器管理力度，做好维修保养工作，定期进行检验设备仪器检查，一旦出现设备故障或仪器故障，应立即进行更换，避免检验误差现象。定时进行仪器校正，确保检验设备和仪器良好工作状态，尤其进行仪器维修后，应及时进行矫正处理，以免影响检验结果。

1.2.3选择合适的检验试剂

在进行免疫检验时，应做好试剂准备工作，根据检验项目特点选择合适的检验试剂，对试剂的生产日期和有效期进行详细检查。另外，为了确保检验准确性，应尽量选择质量好、信誉高的试剂生产厂家，并避免频繁更换厂家，以免由于检验试剂差异，影响检验结果。

1.2.4加强检验人员和检验环境管理

检验人员的专业水平、操作技能以及职业素质等，也会对检验结果造成影响，因此，应定期开展检验培训，不断提高检验人员的专业能力，并通过考核制度，确保检验结果的可靠性[2]。由于免疫检验属于精密性、微量实验，对检验环境要求较高，应定期进行消毒和杀菌处理，保持实验室清洁，确保生物污染、通风、湿度、温度以及照明等与免疫检验环境要求相符。

2.结果

通过分析得出，影响免疫检验结果的因素较多，包括检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等因素。本站采用质量控制进行免疫检验管理后，检验结果的可靠性和准确性得到了进一步的提高。

3.讨论

免疫检验是临床诊治的重要依据，对免疫检验进行质量控制，是确保检验结果可靠性的重要前提。但在检验过程中，存在许多影响因素，标本是免疫检验最常见影响因素，在进行检验前，应对标本进行稀释，尽量降低标本干扰。标本凝固不全、出现细菌感染、储存时间过长或出现溶血现象等，均会对检验结果造成干扰影响，采血不当是导致溶血的主要原因，因此，检验人员应做好标本采集工作，避免检验受到干扰影响[3]。免疫检验步骤较多，应将质量控制贯穿于整个检验过程中，工作人员应做好交接工作，密切配合，确保检验结果的可靠性和准确性。检验完成后，应仔细审查检验结果，若出现异议，应通过核对来确保检验结果的准确性。另外，检验人员还要加强与医生的沟通，对于错误现象应及时改进，不断提高免疫检验质量，为临床诊治提供可靠信息。在本研究中，通过对我院50例患者免疫检验的临床资料分析发现，检验试剂、检验设备或仪器、检验标本等均是影响免疫检验结果的重要原因，在免疫检验过程中进行质量控制，可提高检验人员的综合素质，提高检验质量。

综上所述，采用质量控制进行免疫检验质量管理，可有效提高检验结果的可靠性，为临床诊断和治疗提供重要参考。

参考文献

[1]张智英,朱瑞敏.临床免疫测定中存在的问题及对策[J].中国现代药物应用,2011,12(09):124-125.

[2]任国庆.影响检验结果的因素分析及质量控制[J].临床合理用药杂志,2011,10(06):218-219.

[3]马洪滨,王晗,刘立明.质量控制在临床免疫检验中的作用[J].医疗卫生装备,2012,16(04):162-163.】流行性感冒病毒是引起急性呼吸道感染的重要病原，传播迅速,常会引起暴发，甚至造成世界大流行。上世纪流感病毒就引起四次世界大流行，造成相当严重的损失[1]。目的为了探究流感病毒流行和变异规律，了解其根据流感病毒核蛋白（NP），M1蛋白抗原性和基因特性的不同分为甲（A）乙（B）丙（C）三型[2],病毒具有抗原性变异的特性,提供控制流行的科学依据,对2011—2013年度辽阳市流行性感冒的病原学监测结果进行分析。方法采集流感样病例的咽拭子标本,采用realtime-PCR进行核酸检测，分别用人红细胞、狗肾细胞(MDCK)进行病毒分离,采用血凝抑制方法(HAI)进行流感病毒型别鉴定。结果2011年4月~2012年3月共检测辽阳市流感哨点医院咽拭子标本388份,核酸检测PCR阳性13例，分离到流感病毒10株,阳性分离率为2.58%,经分型鉴定A型H3N2亚型2株(20%),B型Victoria5株(50%),B型Yamagata3株(30%),A型H1N1亚型、新H1N1未检出；2012年4月~2013年3月共检测辽阳市流感哨点医院咽拭子标本593份,核酸检测PCR阳性40例，分离到流感病毒30株,阳性分离率为5.06%,经分型鉴定A型H1N1亚型2株(6.67%)，A型H3N2亚型,15株(50%),新H1N112株(40%)，B型Yamagata,1株(3.33%)，B型Victoria未检出。结论:2011~2012年度流感流行季节中辽阳市有流感流行,流行的优势毒株为B型,同时有A型H3N2亚型毒株的存在；2012~2013年度流感流行季节中辽阳市有流感流行,流行的优势毒株为A型H3N2亚型和新H1N1,同时有A型H1N1亚型、B型Yamagata毒株的存在。

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）39-0179-02

1.材料和方法

1.1标本

2011年4月1日-2012年3月31日采集的辽阳市中心医院咽拭标本388份；2012年4月1日-2013年3月31日采集的辽阳市中心医院咽拭标本593份。

1.2流感病毒核酸realtime-PCR

1.2.1采用QuantOnestepRT-PCRkitRNA提取试剂盒提取流感病毒样本核酸。

1.2.2QIAGENrealtime(荧光定量PCR法)检测试剂盒扩增病毒核酸，反应体系见表1

组分体积（μl）2×QuantiTextProbeRT-PCRMasterMix12.5×上游引物（40μM）0.5×下游引物（40μM）0.5×Probe（10μM）0.5×QuantiTextRTMix0.25×RneasyFreeWaterUPto25病毒核酸RNA5.0×

1.2.3将上述加好的反应体系的反应管放于PCR仪进行反应，反应程序如下：见表2

步骤反应温度(℃)时间(min)是否采集荧光循环数逆转录酶605否15030否1预扩增9515否1950.25否45扩增及荧光收集550.5否45720.5是45725否1

1.2.4结果判定及标准

对照：阴性对照无CT值或CT值为零，阳性对照CT值＜30。

样品：CT值≤35报告为阳性。

样品：37≤CT值≤40为灰区，需重新采样检测。

样品：无CT值或CT值为零报告为阴性。

1.3流感病毒分离

上述PCR结果为阳性的样本接种培养好的MDCK细胞生长液，观察细胞病变情况。

1.3.1将已长成单成的MDCK细胞生长液，用DPBS液洗两遍。

1.3.2每瓶接种标本0.5ml，每个标本接种1瓶，轻摇，使标本完全覆盖细胞，置35℃吸附2小时。

1.3.3倒掉感染液，用DPBS液洗两遍，每瓶加入含2μg/ml胰酶的病毒维持液10ml，35℃培养。

1.3.4次日起每天观察有无细胞病变（CPE）并记录，如病变明显细胞脱落可收获并做血凝，如未有病变，继续观察7日收获做血凝。

1.4血凝实验

1.4.1取聚乙烯96孔板。

1.4.2从第二排起每孔加50μL生理盐水。

1.4.3第一排每孔加入待测物100μL。

1.4.4从一排取50μL向后微倍比稀释至最后一排50μL，弃去。

1.4.5每孔加1.5%豚鼠血球50μL，混匀，置室温1小时看结果。

2.结果

2011年4月~2012年3月共检测咽拭子标本388份,核酸检测PCR阳性13例，分离到流感病毒10株,阳性分离率为2.58%；2012年4月~2013年3月共检测辽阳市咽拭子标本593份,核酸检测PCR阳性40例，分离到流感病毒30株,阳性分离率为5.06%。2011~2013年度流感流行季节中辽阳市均有流感流行,流行的优势毒株不同，2011~2012流行的优势毒株为B型,同时有A型H3N2亚型毒株的存在；2012~2013年度流行的优势毒株为A型H3N2亚型和新H1N1,同时有A型H1N1亚型、B型Yamagata毒株的存在。详细情况见表3：

年份标本数量(份)PCR结果分离毒株数分离率型别甲1甲3新H1N1BVBY株%株%株%株%株%11-1238813102.58%00220%00550%330%12-1359340305.06%26.67%1550%1240%0013.33%3.讨论

2011-2013年两年间辽阳市均有流感病毒流行,通过实验室检测得知两年的流行病毒毒株型别不同,证实了流感病毒抗原性变异的特性。2011年-2012年采用人红细胞做的血抑实验，分离率为2.58%；2012年-2013年采用豚鼠红细胞做的血抑实验，分离率为5.06%。两年分析比较得出，采用豚鼠血做血抑实验明显优于人红细胞做血抑实验。

参考文献

[1]LambR,KrugRM.Orthomyxoviridae;theVirusesandtheirreplication[M].In:FieldsBN.3rded.Philadelphia;Lippincott,2001:1487-1532.

[2]WS285-2008流行性感冒诊断标准2.1