组织蜡块处理过程中出现的问题及解决方法

组织蜡块处理过程中出现的问题及解决方法

肖飞盈1许林杰2

肖飞盈1许林杰2

（1浙江省肿瘤医院病理科浙江杭州310022）

（2浙江省第一医院病理科浙江杭州310000）

【摘要】为了解决组织蜡块处理过程中出现的问题，通过工作经验的累积及阅读大量相关的文献，本文就组织蜡块无法制片或制片困难的原因及处理进行综述，以求在日后的工作中更好地解决问题,制作出优秀的常规HE石蜡切片。

【关键词】组织蜡块；处理不足；处理过度；解决方法

【中图分类号】R36【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）27-0012-02

Paraffintissueprocessingproblemsandsolutions

XiaoFeiying1,XuLinjie2.

1.DepartmentofPathology,ZhejiangProvinceTumourHospital,Hangzhou310022,China;2.DepartmentofPathology,FirstHospitalofZhejiangProvince,Hangzhou310000,China

【Abstract】Inordertosolvetheproblemsoforganizationalwaxblockprocessing,throughalargenumberofrelevantliteratureaccumulatedworkexperienceandreading,thispaperistosummarizethecausesandtreatmentoftheblockdifficultorimpossibletocut.Inordertosolvetheprobleminthefutureworkandmakeparaffinsectionbetter.

【Keywords】Theparaffinblock;Under-processed;Over-processed;Solution

在病理常规制片过程中，经常会遇到石蜡组织切片困难或无法切片的情况。在某些情况下，即使是正确及时的固定及处理程序，也可能会因为组织本身的大小、质地的不同而使组织蜡块的处理出现一定的问题。如子宫肌瘤、甲状腺、皮肤严重角化、指甲及血凝块等都是具有挑战性的标本。本文就组织蜡块处理不足和组织蜡块处理过度两个方面进行综述。

1.对问题蜡块进行评估

通常，我们遇到难切或无法切出的蜡块，首先是要找出哪里出错了，然后决定怎么处理。一般我们从组织的处理过程进行判断[1]：(1)取材大小是否规范；(2)固定是否及时，固定液配制是否正确；(3)组织处理试剂的使用情况，机器是否出现故障；(4)如果试剂是新更换的应重新检查试剂瓶，确认液体平面，是否有污染，试剂顺序是否正确，试剂瓶密封状况等[3]；(5)如果还是无法判断问题所在，还可以通过粗修蜡块，仔细检查组织情况，并有鼻子闻一闻，以确定组织中是否有有机溶剂残留来帮助评估。

2.引起组织蜡块处理不足的原因，表现以及解决方法

2.1蜡块经切片24小时以后，组织表面发生凹陷，这是由于组织中含有溶剂残留，无法被石蜡完全替换，经切片后组织表面长时间暴露在空气中，残留溶剂蒸发，组织块退缩到蜡块中，解决方法，我们以热丙酮为介质，脱去组织内剩余的水分并使石蜡充分渗透，所制蜡块可能会顺利切片[2]。

2.2蜡块经切片后，只有破碎零散的组织轮廓可以被切除，组织的中央区并不缺水干燥，也不是被脱水试剂融化清除了，而是石蜡渗透不完全，组织松软空洞，不支持切片，通常会引起这个问题的组织是大的乳腺组织，脂肪较多，溶剂渗透缓慢，处理周期太短，应相应延长处理周期，重新处理会得到理想的效果。

2.3粗修蜡块可以闻到残留试剂的味道，用手按压组织质地与边上的石蜡不同，是较软的，这是由于组织中有水分，酒精及二甲苯的残留，固定不足，脱水不足，透明不足，均可导致残留以致渗蜡不完整，这种情况再处理时最好的选择。

2.4当摊片的时候，切片出现‘出汗’现象，即部分组织遇到热水迅速瓦解[3]，这是由于不完全脱水，在切片表面有时伴有试剂残留的小油滴或仅仅是因为浸蜡的石蜡纯度不够，里面掺杂了加多二甲苯也会引起这个情况。遇到这种情况，降低摊片池水温及缩短漂片时间[3]，便可以获得较完整的切片。

通常在组织固定及时正确的前提下，出现的组织处理不足时可被补救的除了上述临时补救方法以外，我们还可以适当调整延长处理周期或者直接更换试剂[4]，对其从头进行再处理。这也是解决方法中效果最理想的一种。

3.引起组织蜡块处理过度的原因，表现及解决方法

3.1组织处理后出现酥，脆。易碎的现象，表现该组织被过度处理，纯酒精脱水时间太长，二甲苯透明时间太长，石蜡中二甲苯掺杂均可引起。应将粗修过的组织面放在冰水中浸泡或用氨水等软化剂软化再重新仔细切片。

3.2包埋时组织显得干瘪，很硬，通常被描述为‘熟嵌入’，常由于组织处理过程中温度太高，特别是浸蜡温度太高，浸蜡时间太长所造成的组织不可递的损伤。

3.3组织出现‘干粉状’或‘豆腐渣’样[4]，多数是由于组织本身比较质嫩，无法适应常规的处理周期引起的，如甲状腺，肝脏，淋巴结等，切片在镜下呈‘百叶窗’状，严重的甚至肉眼可见广泛的裂纹。

3.4组织边缘区域脆不能被切片，而中间部分则比较满意。这是由于组织长期暴露在处理试剂中，而外部形态受到影响，中间部分与接触试剂少，形态保持较好。

总之，处理过度的组织经重新处理一般是不会有帮助的，通常我们的处理方法是把蜡块粗修后放在冰水中浸泡或用5mmol/L盐酸水[5]浸泡或者用氨水[6]等软化剂软化，再缓慢仔细地重新切片可以得到更完整的切片，切片时刻度比平时薄一些效果可能会更好。

4.如何制作出一张优质的HE切片[7]

在日常的工作中，不论是大医院还是小一些的基层医院。HE石蜡切片都会出现各种的问题，其中除了经验及设备等原因外，组织蜡块的处理往往受到组织大小，质地，环境温度，湿度等客观因素的影响，而出现个别组织甚至一整批组织不能做出满意的切片，从而影响病理医生作出正确的诊断，从而造成误诊。

我们除了要分析出现蜡块难切甚至无法切出的原因并及时补救外，更要对可能出现的问题做出有效的预防：（1）设定不同的处理周期酱大小标本分类处理；（2）根据每个单位不同的情况按时间或者标本量更换试剂；（3）定期对脱水机进行保养维护等;(4)制定一系列操作规范，并严格按照规范进行操作[8]，降低出现问题蜡块的几率。

【参考文献】

[1]陈涛.病理制片中的常见差错及应对的措施[J].基层医学论坛，2011，15:1142.

[2]徐建勤，程国平.含蜡组织脱水不足的补救[J].临床与试验病理学杂志，2010，26(3):378.

[3]赵丽辉，冷东明.不同组织病理切片中常见的问题与对策[J].诊断病理学杂志，2010，17(3):231.

[4]廖首生，李里香.LEICA300S生物组织脱水机试剂更换时间的探讨[J].实验与检验医学，2009，27(3):264.

[5]马恆辉，章如松.组织切片裂隙产生的原因及对策[J].诊断病理学杂志，2007，24(2):478-481.

[6]戴炜力，王群姬.病理组织切片缝隙补救方法的技术改良[J].温州医学院学报，2010，30(2):173.

[7]王晓鸿，曹婉雅.制作优质HE病理组织切片的要素[J].中国实用医药，2011，(6):135-136.

[8]徐思行，余心如.病理诊断与技术规范[M].第1版.杭州:浙江大学出版社，2003.3.