(重庆市璧山区人民医院重庆402760)
【摘要】本研究的主要目的是探讨CD244(rs3766377)基因多态性对乙肝慢性感染结局的影响。我们分组(无症状携带者组、慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组、乙肝后肝癌组检测了CD244(rs3766377)基因多态性。我们发现rs3766377可影响乙肝病毒感染者发展为肝硬化及肝癌。结论:CD244基因多态性rs3766377与慢性乙肝患者发展为肝硬化及肝癌有明确的关系。
【关键词】乙型病毒性肝炎,CD244,基因多态性
【中图分类号】R373.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2019)24-0079-01
慢性乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)感染是我国面临的一个严峻的卫生问题。成人感染乙型肝炎病毒后约10%的患者会发展为慢性感染[1]。
机体对HBV病毒的清除依赖于健全的细胞免疫功能,而慢性HBV感染者中,特异性免疫低下及病毒逃避机体免疫是导致持续性感染的重要原因。HBV特异性CD8+T细胞、CD4+辅助性T细胞的功能及数量是影响机体特异性免疫功能的关键因素[2]。大量的研究证明,慢性HBV感染者体内病毒特异性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞功能和数量均受损[3-5]。因此,本研究通过病例-对照方法来探讨CD244(rs3766377)基因多态性与慢性乙型病毒性肝炎的相关性研究。
1.资料与方法
1.1一般资料
收集从2016年09月至2018年09月就诊于重庆市璧山区人民医院的309名HBV慢性感染者(chronicHBVinfection,CH),包括无症状携带者(asymptomaticcarrier,ASC)28名,慢性乙型肝炎(chronicHBVhepatitis,CHB)90名、乙肝肝硬化(livercirrhosis,LC)93名、乙肝肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)98名。所有纳入的研究者之间均无血缘关系。本研究通过了重庆市璧山区人民医院医学伦理委员会的批准,且所有的受试者均签署了书面知情同意书。
1.2样本采集及生化酶学指标
从每位患者抽取3~5ml血液,于-80℃冰箱保存以备用。通过问卷调查记录其性别、年龄、吸烟及饮酒、既往病史等基本情况。HBV病毒血清标志物、肝功能等指标检测由重庆市璧山区人民医院检验科完成。
1.3基因组DNA的提取及基因分型
使用美国Promega公司WizardGe-nomicDNA纯化试剂盒进行外周血基因组DNA的提取。基因组DNA于-80℃储存备用。采用Sequenom实验平台对筛选的SNP进行高通量基因分型。为进行质量控制,每个96孔板设置了成对的样本及阴性对照。
1.4统计学分析
数据分析由SPSS22.0软件完成。使用HWE软件来检查正常组与清除组数据是否符合哈迪温伯格平衡(Hardy-Weinberg,H-W)(P<0.001)。计量资料使用Studentt检验或Mann-WhitneyU检验进行比较;计数资料使用χ2检验进行比较;使用二分类logistic回归分析校正性别及年龄后比较基因型及基因模型(显性模型(dominantgeneticmodel)和隐性模型(recessivegeneticmodels)在各组中的差异。Hardy-Weinberg(H-W)遗传平衡由Stata20.0软件完成。采用Haploviewsoftware(v4.2)软件分析单体型频率。所有检验P值均为双侧。P<0.05认为有统计学意义。
2.结果
2.1基本资料
相比于女性患者,男性患者在发生肝硬化和肝癌的风险更高(P<0.05)。在各个组间无显著差异,表1。
表1研究对象的临床特点
ASC,无症状携带者(asymptomaticcarrier);CHB,慢性乙型肝炎(chronicHBVhepatitis);LC,乙肝后肝硬化(livercirrhosis);HCC,乙肝后肝癌(hepatocellularcarcinoma)。
3.讨论
CD244(别名:2B4),来自于淋巴细胞活化信号分子(signalinglymphocyticactivationmolecule,SLAM)家族。其可表达于CD8+T细胞、NK细胞、粒细胞及单核细胞等细胞上。既往研究表明,在慢性HBV感染的患者中,其CD8阳性T细胞上CD244高表达,从而影响T细胞对病毒的杀伤作用。本研究发生,rs3766377与肝癌有明确的相关性,可导致肝癌的发生率增加为正常的3.3倍。
本研究也存在一定的不足:(1)纳入样本数目较小,可能造成一定的偏倚;(2)没有进行SNP的功能试验;(3)没有纳入乙肝病毒的相关因素。在今后的研究中,我们需要增大样本、设计更严谨的实验来验证本研究的结果。
总之,本研究表明CD244基因多态性rs3766377与慢性乙肝患者发展为肝硬化及肝癌有明确的关系,为临床的诊治提供更好的思路。
【参考文献】
[1]汤永志,陈巧玲,江挺,等.Rs4129009基因多态性与慢性HBV感染的相关性研究[J].浙江医学,2017(13):1068-1071.
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