PTH和ALN对去卵巢大鼠骨密度的影响

PTH和ALN对去卵巢大鼠骨密度的影响

付炜骅

关键词：骨质疏松，甲状旁腺素，阿仑磷酸钠，骨密度。

AbstyactAsthecurrentincidenceofosteoporosisincreases，Thenumberofpatientswithfracturesduetoosteoporosishasincreased，andosteoporosishasseriouslyendangeredpublichealthandaffectedpeople'squalityoflife.Makinglifeharder.Amongthem，thenumberofwomensufferingfromosteoporosiscausedbymenopauseishigher.Therefore，byevaluatingtheeffectsofparathyroidhormoneandalenophosphate，wefindthebesttherapeuticdruginreallife.Methods：Usingparathyroidhormoneandalenophosphate，subcutaneousadministrationwasperformedonovariectomizedrats，andbonedensitywasscannedafteradministrationtomeasurebonedensity.QuantitativeanalysisusingSPSS20.0statisticalsoftware.Basedonthedataofbonedensityandbiomechanics，itisconcludedthatparathyroidhormone，Alenphosphate，andosteoporosisinovariectomizedratsarealleffective.Conclusion：Twomethodsfortreatingosteoporosis，parathyroidhormone，increasebonedensityobviously.

Keywords：Osteoporosis，parathyroidhormone，Alenphosphate，bonedensity.

据相关资料显示，目前全球数以亿计的人患骨质疏松症，在全球常见疾病中占比很高。世界年龄较大的人群中中有很多人发生椎体骨折。由于雌激素和骨质疏松症的发生有密切关系，在多数受骨质疏松疾病危害的人群中50岁以上的女性患者较多，因此骨质疏松症在女性尤其是绝经后女性中的发病率相当高[1][2]。更年期是女性生殖能力结束的时期。这一时期可能与心血管，泌尿生殖系统，和骨骼的许多症状有关。性激素缺乏导致骨转换加速，负平衡的形成和微结构的恶化，从而影响骨骼强度，增加骨脆性，增加骨折风险。临床表现为骨密度（BMD）降低，骨皮质变薄，髓腔增宽，骨小梁变少，易于折断。随着中国经济的快速发展，社会人口的增多和老龄化加快，骨质疏松患者日益增多。尤其女性绝经之后，由于激素的下降导致骨密度的下降的病人数量越来越多。其中中老年妇女尤为明显。主要是老年妇女雌激素下降较为明显。人体骨骼也同其他组织一样不断地进行新陈代谢，即骨的重构。成年人的骨重构率约为每年5-15%[4]。成骨细胞负责骨的形成，破骨细胞负责骨的吸收。两种细胞在骨表面同一部位相继进行活动，称为基本多细胞单位。雌激素缺乏相关性骨量丢失的机制是由于单核细胞或成骨细胞产生的各种细胞因子的增加，它们促进破骨细胞生成和破骨细胞活化，随着TNF浓度的增加，雌二醇缺乏也导致IL-7生成的增加，从而直接抑制成骨细胞的活性，导致骨形成减弱。雌激素缺乏引起的骨丢失导致骨髓腔增大，骨皮质变薄，骨小梁量减少，最终引发骨质疏松。这就是雌激素缺乏导致骨质疏松症的发病机制。

骨质疏松症的直接后果就是骨折。治疗骨折的费用很多，无论对社会还是患者的家庭都是沉重的负担，给患者精神上肉体上的折磨也是不言而喻的。骨质疏松症导致的骨质是由于骨脆性增加进而导致的骨折，临床上也叫脆性骨折，是骨质疏松症最严重的后果。在我国据统计，女性50岁后髋部骨折概率非常高。另外如腰椎，前臂的骨折也呈逐年上升的趋势。骨折是骨质松症最重要的并发症，因骨的显微结构破坏而引起，即使没有较大的外力作用也易引起[3]。它易发于松质骨较多的部位，如椎体或骶骨；或者应力较集中处，如桡骨远端、股骨上端踝关节等处。骨折给老年患者造成的痛苦很大，往往使老年人的晚年生活质量严重下降。

目前研究骨质疏松的病理机制、预防措施和治疗药物，成为了重要的科学任务。针对骨质疏松的药理学研究是探讨骨质疏松病理机制和防治措施的重要内容，不仅关系到骨质疏松发病机制以及药物的发现和研发，而且关系到对骨质疏松的防治和药物的应用。因此，深入和广泛的抗骨质疏松的药理学研究可以促进新型防治骨质疏松药物的研发，预防骨质疏松的形成，治疗形成的骨质疏松病理状态，减轻由于骨质疏松引起的危害。

1.实验与方法

1.1实验设计

将32只SD大鼠分为4组，每组动物数量8只。第1组为Sham组（假手术组），即空白组，所给空白药物为生理盐水。第2-4组为OVX组（即手术组），分别给予药物为：生理盐水、甲状旁腺素、阿仑磷酸钠。在手术之前通过DXA骨密度仪进行骨密度检测，扫描部位为SD大鼠腰椎2-5节，右股骨中段。将扫描后的骨密度数据和动物体重通过软件进行分组，共产生4组，手术前分组数据请看表1。同时通过SPSS20.0软件进行统计分析。分别对比相同时间腰椎和股骨骨密度在4组间的差异性，结果显示：在0天时，4组对比无显著差异，说明4组在实验初的腰椎和股骨骨密度具有可比性；实验可以如期进行。在实验开始后分别于2个月、3个月、4个月、5个月、6个月，对动物进行腰椎和股骨的骨密度测定。并且体内实验结束后，对动物的左侧股骨和第四节腰椎进行生物力学测试。最后通过SPSS20.0软件进行统计分析。

表1SD大鼠手术前分组BMD及体重数据

1.2手术阶段

动物分组后进行手术，手术中使用呼吸麻醉机进行麻醉，待动物麻醉后，使用剃毛器对腹部进行剃毛。剃毛后，动物置于手术台上，麻醉呼吸面罩接在动物口鼻处，同时对腹部使用碘伏消毒液进行消毒。使用无菌手术器械将动物腹部切开1-2cm切口，首先找到子宫，宫角末端可见包裹卵巢的脂肪团，拨开脂肪可以见到卵巢，找到双侧卵巢，对输卵管进行结扎后将卵巢摘除，同时分层闭合伤口。假手术组（Sham组）大鼠不摘除卵巢而是去除卵巢周围的一块与卵巢大小相同的脂肪。

1.3DXA扫描阶段

手术后每隔半个月每组动物随机抽检两只进行DXA扫描，和分组时的DXA数据进行对比，通过骨密度的对比来观察动物的骨密度是否还在快速上升，如果骨密度还在快速上升说明动物的雌二醇下降不明显。这时动物自身还是含有一定量的雌二醇的，此时不利于实验进行。同时也说明了，雌性大鼠卵巢摘除后，雌二醇不会第一时间流失，而是一个渐进式的过程。在该批动物手术后2个月，我们通过DXA扫描，发现卵巢摘除（OVX）动物骨密度下降明显，并且体重出现快速上升。见表2。

表2SD大鼠手术后2个月BMD及体重数

*：与组别1对比，有统计学差异，p<0.05；

#：与组别2对比，有统计学差异，p<0.05；

2.骨密度分析结果

综上所诉，在整个实验体内治疗阶段。给予PTH（1-34）药物的3组和给予ALN药物的4组，在卵巢摘除大鼠的骨密度增加的效果上优势强于第二组。而且其治疗效果从开始给药之后的较短时间即显现出来。同时经过4个月治疗的3组与给予安慰剂的1组比较发现，给予PTH（1-34）药物治疗的动物骨密度已经与未手术动物骨密度水平持平。所以通过骨密度差异的判断，我们发现PTH（1-34）药物更加优秀。

同时我们也能够发现，去卵巢后大鼠的腰椎和股骨的骨密度下降趋势并不一致，根据实验我们发现，去卵巢后，腰椎的骨密度下降很快，并且趋势明显，但是作为长骨代表的股骨的骨密度在实验开始后的一段时间里下降趋势较缓，早期并不明显，只有等到动物雌二醇缺乏到一定程度时，骨密度才会出现较快的下降。

3.结论

本试验条件下，通过去卵巢手术，成功的构建了骨质疏松模型，模型组动物的BMD改变率、骨体积分数等指标水平与假手术组有显著性差异。为实验继续顺利进行提供对照标准。

两种测试药对比发现在受试剂量范围内，均可改善去卵巢模型动物的BMD及BMD改变率，提高腰椎骨质量分数，增加骨小梁厚度，提高腰椎和股骨内膜骨形成水平及减少腰椎骨吸收水平，提高腰椎荷载强度。可明显改善骨质疏松大鼠的抗骨折能力。其中甲状旁腺素（PTH1-34）和阿仑磷酸钠（ALN）治疗效果十分明显。提升了骨质量和骨强度，更加能够对抗骨折。并且经过甲状旁腺素（PTH1-34）治疗后与正常组（Sham）的对比无明显差异。可以看出药物起到了很好的治疗效果，所以甲状旁腺素（PTH1-34）和阿仑磷酸钠（ALN）治疗效果十分优秀，可以随时开始治疗。二者对比中，甲状旁腺素（PTH1-34）更为理想，治疗效果各方面表现十分突出，是临床的最佳选择。

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