USP22、CDK6及Ki67在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性研究

USP22、CDK6及Ki67在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性研究

杨其武赵春清2

（1承德医学院，河北承德，067000；2保定市第二医院，河北保定，071000）

[摘要]目的检测结肠癌组织中USP22、CDK6和Ki67的表达并分析其与临床病理特征的关系。方法免疫组化法检测2015年9月至2016年9月就诊于保定市第二医院60例结肠癌患者癌组织及癌旁正常黏膜组织中USP22、CDK6、Ki67的表达情况，分析三者之间及其与年龄、性别、淋巴结转移、分化程度、Ducks分期等临床病理特征之间的关系。结果①结肠癌组织、癌旁正常黏膜组织表达率：USP22为68.33%、11.67%，CDK6为65.00%、8.33%，Ki67为70.00%、13.33%，三者在癌组织中的表达率均高于癌旁正常组织（P<0.05）。②USP22、CDK6及Ki67的表达率，在不同年龄、性别患者中接近（P>0.05），在不同分化程度、Ducks分期及有无淋巴结转移患者中存在统计学差异（P<0.05）。③Spearman秩相关分析显示：USP22、Ki67、CDK6三者两两均呈正相关（P<0.05）。结论USP22、CDK6、Ki67，在癌组织和癌旁组织中的表达率存在显著差异，与分化程度、分期、淋巴结转移有关，且三者紧密相关，有望成为结肠癌诊断、病情评估的辅助指标。

[关键词]结肠癌；USP22；CDK6；Ki67；诊断；病情评估

ExpressionofUSP22,CDK6andKi67incoloncarcinomaanditscorrelationwithclinicopathologicalfeatures

YangQiwu1ZhaoChunqing2

(1ChengdeMedicalCollege,Chengde,Hebei,067000；2SecondhospitalofBaoding,Baoding,Hebei,071000)

[Abstract]ObjectiveTodetecttheexpressionofUSP22,CDK6andKi67incoloncarcinomatissuesandtoanalyzetheirrelationshipwithclinicalpathologicalcharacteristics.MethodImmunohistochemicalmethodfromSeptember2015toSeptember2016inBaodingCitySecondHospitalexpressionin60HCCtissuesofpatientswithcoloncancerandadjacentnormalmucosatissuesofUSP22,CDK6andKi67,therelationshipbetweentheanalysisofthethreeandtheage,gender,degreeofdifferentiation,lymphnodemetastasis,Ducksstagingandclinicalpathologicalfeatures.Result①Thecoloncancertissue,adjacentnormalmucosatissueexpressionrateinUSP22was68.33%,11.67%,65%,CDK68.33%,Ki6770%,13.33%,threeincancertissueswerehigherthanthoseinnormaltissues(P<0.05).②TheexpressionratesofUSP22,CDK6andKi67werecloseto(P>0.05)inpatientsofdifferentagesandgenders,andthereweresignificantdifferencesinthedegreeofdifferentiation,Ducksstageandlymphnodemetastasis(P<0.05).③Spearmanrankcorrelationanalysisshowedthat:USP22,Ki67,CDK622werepositivelycorrelated(P<0.05).ConclusionUSP22,CDK6,Ki67expressionincancertissuesandtherateofsignificantdifferences,metastasisanddifferentiation,staging,lymphnode,andthethreearecloselyrelated,isexpectedtobecometheassistantindexforcoloncancerdiagnosisandseverityassessment.

[Keyword]Coloncarcinoma;USP22;CDK6;Ki67;diagnosis;conditionassessment

结肠癌的诊断和病情评估并不容易，寻求其新的辅助指标仍是研究的焦点。本研究检测USP22、CDK6、Ki67在大肠癌组织中的表达，分析其与大肠癌临床病理特征的关系，报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2015年9月至2016年9月就诊于保定市第二医院经病理确诊的60例结肠癌患者的标本，其中，男29例，女31例；年龄（28-80）岁，中位年龄54.6岁。

1.2标本染色方法

采用免疫组化法：所有标本连续4um厚度切片，PH6.0柠檬酸钠(0.01mmol/L)抗原修复液微波修复抗原，内源性过氧化物酶用3%过氧化氢阻断并封闭20min，添加兔抗人USP22、CDK6、Ki67多克隆抗体（1∶50），DAB显色，PBS和结肠癌阳性切片分别作阴性和阳性对照。

1.3染色评定方法

每例切片随机选取10个互不重叠的高倍镜视野进行染色强度和阳性细胞百分比评分，其中，无染色记0分，淡黄染色记1分，棕褐或棕黄染色记2分；阳性细胞在肿瘤细胞中的数量比例不足5%者记0分，5%至25%者记1分，26%至50%者记2分，超过50%者记3分。二者评分之和即为免疫组化染色的总积分，反映USP22、CDK6、Ki67表达情况，<2分为阴性表达，≥2分阳性表达。

1.4统计学方法

统计学分析用SPSS17.0完成，USP22、CDK6、Ki67之间及其与临床病理特征之间关系分别用卡方检验、Spearman秩相关性分析法，有统计学差异性的标准为P<0.05。

2结果

2.1USP22、CDK6及Ki67蛋白表达情况

USP22、CDK6、Ki67蛋白在结肠癌组织的阳性表达率分别为68.33%（41/60）、65.00%（39/60）、70.00%（42/60），高于其在癌旁正常组织中的11.67%（7/60）、8.33%（5/60）、13.33%（8/60）（P<0.05）。

2.2USP22、CDK6及Ki67与结肠癌临床病理特征的关系

经统计，USP22、CDK6及Ki67，在不同年龄、性别患者中表达的差异无统计学意义（P>0.05），在不同分化程度、Ducks分期及有无淋巴结转移患者中的差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3USP22、CDK6及Ki67三者之间的相关性分析

Spearman秩相关检验显示，Ki67与USP22、CDK6呈正相关（rs=0.584,P=0.009；rs=0.502,P=0.005），USP22与CDK6呈正相关（rs=0.673,P=0.007）。

3讨论

USP22属于去泛素化酶基因家族，本质是细胞正调节因子，经作用于G1-S期和G2-M期可促进肿瘤的发生和演变。另外，胚胎前植入、激活转录、信号传导均是其影响肿瘤行为的重要途径。CDK6是一种G1期调控因子，它不仅可与CyclinD形成的复合物消除pRb抑制转录作用，而且可经释放E2F而启动细胞周期，从而干预细胞增殖[1]。Ki67是半衰期较短、主要表达于胞核、与细胞增殖紧密相关的一种非组核蛋白，其在细胞周期G0期不表达，G1晚期低表达，S-G2期表达逐步上调，S期聚集，有丝分裂后期迅速降解后消失[2]。本研究USP22、CDK6、Ki67在癌组织和癌旁组织中的表达率存在显著差异，与姜争等[3]的研究一致，提示检测三者有助于结肠癌的诊断。本研究USP22、CDK6、Ki67在不同分化程度、分期及有无淋巴结转移患者中的表达率存在统计学差异（P<0.05），与周飞等[4]的报道相符，说明检测三者有助于结肠癌病情的评估。进一步分析发现，USP22、CDK6、Ki67三者两两呈正相关，与刘寿行等[5]的观点并不矛盾，提示联合检测可能有相互印证作用。但由于样本小，年龄等资料仍需深入分析才能得到更为客观的结果。

参考文献

[1]张渝,刘展,方圆,等.SiRNA抑制CDK6表达阻滞大肠癌细胞增殖和细胞周期进展[J].实用医学杂志,2015,31(12):1918-1921.

[2]刘睿.CK20、Nm23与Ki67蛋白在结直肠癌中的表达及意义[D].泸州医学院,2014.

[3]姜争,刘彦龙,王锡山,等.USP22及其可能靶点在结直肠癌中的表达研究[J].中华结直肠疾病电子杂志,2014,3(1):22-24.

[4]周飞,崔滨滨,刘彦龙,等.usp22和ki67在大肠癌组织中的表达及其临床意义[J].肿瘤防治研究,2012,39(1):68-70.

[5]刘寿行,刘展,谢雪飞,等.大肠癌组织中CDK6、Ki67表达及其与临床病理因素的关系[J].湖南师范大学学报(医学版),2012,9(1):76-80.