干化学法测定血氨的临床意义

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干化学法测定血氨的临床意义

刘果霞杨丽薄晋魏白强

刘果霞杨丽薄晋魏白强(包头医学院第一附属医院检验科014010)

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)13-0391-02

【关键词】血氨干化学法

人体内血氨含量极微,体内氨是蛋白质代谢过程中通过氨基酸脱氨基形成,大部分在肝脏内通过鸟氨酸循环合成尿素。血液中氨的来源主要为肠道中细菌分解尿素和由氨基酸脱氨所生成。此外,组织细胞中有多种脱氨酶,能使蛋白质、核苷酸脱氨而生成氨。在正常情况下,氨的主要去路是在肝脏通过鸟氨酸循环合成尿素。此外,脑和肾脏等器官的氨与谷氨酸作用生成谷氨酰胺后被运输到肝脏,在肝脏转变成尿素或其它含氮化合物后由肾脏排出体外,或形成铵盐随尿排出。是蛋白最终代谢产物。

一、血氨特性

氨对人体有毒,能影响神经细胞的新陈代谢。对人体的中枢神经有潜在的毒副作用,血氨的来源增加和去路减少,都会引起血氨增高。血氨测定对肝性脑病,肝硬化末期肝昏迷,肝衰竭的诊断和鉴别诊断有极其重要的意义,对急性/亚急性肝坏死和雷氏综合症[1]。高血氨症在饮食蛋白过多摄入时也有发现。

二、影响血氨的因素

1、吸烟者是血氨假阳性增高的主要原因,采血前一天午夜后禁止吸烟,严重者采血前应淋浴。

2、实验室周围环境,空气是氨标本污染的主要原因必须通过化学处理。

3、血氨测定应用血浆[2],不能血清做标本。血液在凝固过程中会产生氨,抗凝剂可用非铵盐的肝素,EDTA和草酸盐三(Li,K,Na)、不能用肝素胺,氟化物。

4、采集标本后15分钟内测定,滞留15分钟就可引起血氨增高,最多30min内检测完成。显著溶血不能用来测定。

5、如超出测定系统线性范围,可用去氨水稀释血浆后重新测定。

三、标本采集

血氨测定的准确性在很大程度上取决于标本的留取收。

1、应用加抗凝剂的密封负压管采集。防止环境中的氨污染标本

2、低温离心5min,取血浆迅速测定,30min内检测完成。

3、如不能立即测定,2~4℃可保留2h,-20℃可稳定24h。

4、红细胞氨浓度是血浆的2.8倍,故标本应禁止溶血,溶血可使红细胞内的氨进入血浆。红细胞和血小板中的γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、谷丙转氨酶(ALT),可引起血氨的浓度的自然增加,在0、20、37℃时,氨平均增加的比率分别是3.9±0.23、5.2±0.23、25.2±0.59umol/L/h,在肝病时γ-GT和的ALT活性比正常人的增加很多,γ-GT是血氨测定引起标本氨浓度增加的一个主要因素。为了降低血标本在放置中氨的增加,测定出标本中真实的氨含量,可在血标本中加入γ-GT抑制剂,如6-二氨基-5氧-L-己氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucin)或硼砂加丝氨酸等。

四、血氨的测定方法

1、原理:血氨测定干片(比色法)方法通过生化系统上使用血氨测定干片和血氨与脑脊液蛋白复合物校准品来完成。血氨测定干片为途覆在聚酯基材上的多层分析成分。将一滴患者样本滴在干片上,并通过扩散层均匀地分布到下面的试剂层。水和非蛋白组分扩通过,散到下面的缓冲试剂层,氨离子转化为气态氨。半透明只允许氨通过,并且阻止缓冲液或氢氧基离子到达指示剂层。经过固定的孵育时间后便可将扩散层作为白色背景测定显色剂的反射强度。

2、反应步骤:NHз+溴酚蓝(氨指示剂)—蓝染剂

3、参考值:9-33umol/L。干扰物:33.3mmol/浓度葡萄糖可以导致8-40umol/L的氨浓度降低。

五、临床意义

1、正常情况下氨在肝脏中转变为尿素,重症肝病时尿素生成功能低下、门静脉侧支循环增加、先天性鸟氨酸循环的有关酶缺乏等。使血氨增高。血氨的测定主要用于肝昏迷(肝性脑病)的诊断以及疗效观察[3]。肝硬化末期,急性亚急性肝坏死和雷氏综合症血氨也会增高。

门脉高压,经肠道吸收氨未经门静脉入肝脏解毒直接进入大循环血氨增高。

2、消化道出血,使肠道内含氮物质增高,经细菌或酶的作用产生大量氨。

3、尿毒症,肾功能不好尿素排出减少使血氨增高。

4、高蛋白饮食,便秘者(青少年)血氨也会增高。

5、血氨低于100umol/L时,患者表情多正常。血氨在100-200umol/L之间时,可能表现为兴奋,行为性格异常,呕吐喂养困难,厌食高蛋白的倾向。血氨200umol/L以上时,出现意识障碍,惊厥。血氨400umol/L时将出现昏迷,呼吸困难。当血氨增高时,氨能降低大脑内的ATP水平,进而影响神经元的功能。有关专家研究[4],对44例急性肝衰竭(ALF)动脉血氨浓度和脑疝形成的关系进行了研究,14例急性肝衰竭脑水肿形成脑疝患者动脉血氨水平为230±58umol/L,30例无脑疝形成患者动脉血氨浓度为118±48umol/L,明显低于有脑疝形成者(P<0.001);而半乳糖、胆红素、肌酐和凝血酶原水平二组无明显差异。急性肝衰竭患者动脉血氨浓度为148±73umol/L,较肝静脉血氨浓度(203±108umol/L)明显降低(P<0.001);而急慢性肝病9例动脉血氨水平是91±26umol/L,比肝静脉氨的水平66±18umol/L。Huizenga[5]等用BAC血氨检测仪测定91例肝硬化伴肝性脑病患者的血氨浓度,其中70例氨的浓度显著增高。刘宏用流动注射法测定血氨,36例门静脉高压症患者血氨浓度为100.0umol/L,较对照组(81.2umol/L)显著增高(P<0.001),10例肝昏迷患者的血氨浓度为306umol/L,较门静脉高压症患者增高更明显。

参考文献

[1]WangXiaoqing,TsuiHark,SunYunhui.Drychemistrymethodfordeterminationofammoniainplasma[J].ZhejiangLaboratoryMedicine,2004,5(2):152-153.

[2]刘怀萍,庞国菊.干化学法测定血浆氨的全自动分析[J].《中华实用中西医杂志》,2002,4(11):1374-1374.

[3]王小青,徐克.干化学法测定血浆氨的价值[J].《现代中西医结合杂志》,2004,6(8):1057-1058.

[4]余良芳,左江成.干化学法测定血氨的影响因素分析[J].《实用医技杂志》,2007,7(21):1121-1123

[5]钟白云,等.干化学法与湿化学法测定血氨及影响因素的分析[J].中国现代医学杂志.2009,19(15).

[6]WangShuhui,LiGuifang,TanWen.Drychemistrymethodfordeterminationofammoniainplasmaautomaticanalysis[J].JournalofYoujiangMedicalCollegeForNationalities.2001,23(2).

[7]ZhangGuohui,LiuHanxin,GaoYueting.Effectofheparinonbloodammoniadeterminationmethodfortwokindsofinterference[J].Jilinmedical.2010,31(18).