尿液脱落细胞的检查

/ 1

尿液脱落细胞的检查

马玉芹

马玉芹(黑龙江省大庆市第四医院163712)

尿液细胞学检查主要用于泌尿系统恶性肿瘤。泌尿系统的恶性肿瘤以膀胱癌多见,其次为肾肿瘤。

1标本的采集与制片

1.1标本采集的要求

1.1.1尿液标本要新鲜泌尿系统脱落的上皮细胞在尿液中易退化变性或自溶。因此,尿液排出后在1h内完成制片、固定。若不能及时制片,可按标本1/10量加入甲醛或等量的95%乙醇。

1.1.2注意防止污染除要求盛尿容器清洁以外,女性患者在自然排尿时,尿液中常混有大量阴道上皮细胞和白细胞而影响诊断。故可采取导尿,或清洁外阴后留取中段尿。

1.1.3留取标本的量要充足,一般不少于50ml。

1.2采集标本的方法

1.2.1自然排尿一般留取晨尿,也可留取日问新鲜尿,通常连续留取3天。

1.2.2导尿管导尿此法细胞成分较多,可见输尿管和肾盂的脱落细胞。

1.2.3膀胱冲洗用50~100ml生理盐水或Ringer液由尿道作膀胱冲洗,注入和抽取数次,获得膀胱冲洗液。

1.2.4细胞刷片在内镜的直视镜下,可对膀胱、输尿管及肾盂等可疑部位,刷取细胞成分,直接涂片。

1.3制片方法

1.3.1离心沉淀法尿液中的细胞成分较少时,采用二次离心浓集法处理效果较好。

(1)先将全部尿液标本摇匀后,倒入4~6只离心管内,以2000r/min,离心10min。

(2)取出上述试管,倾出上清液,将各个试管底部沉淀物摇匀后集中在一只试管内,以同样的条件再离心5~10min。

(3)倾去上清液,将沉淀物混匀。如细胞成分多,可制成薄片,如细胞成分少则取沉淀2~3滴,制成厚片,厚度以略能流动为度。每份标本一般制4张涂片。待干后,立即浸入固定液固定。

由于正常尿液中不含蛋白成分,所以细胞不易粘附在玻片上。为了防止脱落,可在沉淀物内滴加一滴血清,或在玻片上涂抹少量的甘油蛋清,然后再涂片。

若尿中含有大量盐类结晶或胶胨样物质,会引起背景污浊,影响诊断。可用0.5mol/LNaOH或0.5mol/LHCl调节尿液pH为6.0,使盐类结晶溶解。离心沉淀后,在沉淀物内加人5~10ml95%乙醇。静置5min固定细胞,然后逐渐加入蒸馏水轻轻振动试管使胶胨样物溶解,再做第二次离心,留沉淀物涂片。

1.3.2自然沉淀法同脑脊液细胞沉淀法。用毛细吸管吸取尿液底部的沉淀物放入沉降筒中,尿中的细胞成分自然下沉,尿中水分被滤纸不断吸干,沉降时间一般为30min,待干后固定染色。此法所获得的细胞形态较好,但由于所取用的尿标本少,检查肿瘤的阳性率不高。

2尿液中正常细胞形态

2.1移行上皮细胞主要覆盖于肾盂、肾盏、输尿管、膀胱和部分尿道,故正常尿液中多见。组织学上移行上皮细胞可分为3层,即表层、中层和基底层。

表层细胞体积较大,呈圆形、卵圆形或多边形,直径约20~30μm,核居中,直径为6~8μm,可有双核或多核,又称伞细胞。细胞越近底部,体积越小,基底层细胞直径为8~10μm,而核的大小都与表层细胞相似,直径约6μm。中层细胞大小介于两者之间。不管表层、中层或底层的细胞,胞核的染色质细致而分布均匀。

2.2复层柱状上皮细胞主要分布于尿道中段,因此尿液中极少见,只是在尿道炎症时可见。

2.3鳞状上皮细胞女性尿液常混入阴道分泌物,故常可见,形态同阴道涂片中的鳞状上皮细胞。男性尿液标本中,只有在尿道慢性炎症时才见较多的鳞状上皮细胞。

2.4非上皮细胞可见白细胞、淋巴细胞、组织细胞、红细胞等。

3泌尿道恶性肿瘤细胞形态

泌尿道恶性肿瘤中最常见的是膀胱癌,其次发生的部位是肾盂、尿道及输尿管,其中移行细胞癌占90%,鳞癌占6%~7%,腺癌占1%~2%。

3.1移行细胞癌移行细胞癌依细胞分化程度分为Ⅰ~Ⅲ级。Ⅰ级属于早期,分化程度高,细胞的大小、形状和排列与正常的移行上皮细胞很相似,仅部分细胞核出现轻度至中度异形。Ⅱ级属中度分化异形细胞癌,部分癌细胞呈较典型癌细胞特征,细胞形态多样化,大小不一,核边不规则,呈锯齿或芽突。Ⅲ级属低分化移行细胞癌,有较多的典型癌细胞,恶性特征明显,癌细胞单个散在或成团脱落,细胞大小形态各异,排列紊乱。胞核明显增大,核边不规则,呈锯齿状,大小不一,高度畸形、深染,胞质量多少不等。染色呈红色,有空泡出现,核胞质比明显增大。

3.2鳞状细胞癌较少见,以高分化鳞癌多见,其形态与阴道鳞癌细胞相同。

3.3腺癌少见,多来自肾小管。细胞形态基本与一般腺癌细胞相同。

参考文献

[1]王翔,张元芳,叶烈夫.膀胱癌患者尿脱落细胞端粒酶活性检测及其临床意义.中华泌尿外科杂志,1999年第5期.

[2]卫立辛,郭亚军,阎振林.检测人端粒酶活性的端粒酶TRAP-ELISFA法的建立.中华肿瘤杂志,1998年第4期.

[3]祝怀平,凌斌,戴海明.检测端粒酶活性的PCR-ELISA方法的建立.安徽医科大学学报,1999年.