正交试验优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺研究

正交试验优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺研究

莫元涛邓丽丽赵秋华

莫元涛邓丽丽赵秋华

(右江民族医学院广西百色533000)

【摘要】目的优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺。方法采用L9(34)正交试验，超声提取，以齐墩果酸含量为指标，紫外分光光度法进行检测，确定最佳提取工艺条件。结果优选出齐墩果酸的最佳提取工艺条件是：超声提取40min，90％乙醇溶液，料液比1：8。结论此工艺提取方法快速、简单。可作为进一步研究柿蒂提供参考。

【关键词】柿蒂正交试验齐墩果酸

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）17-0261-01

齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用[3]，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，临床上用于治疗传染性急性黄疸型肝炎，具有明显的降低谷丙转氨酶及退黄效果，改善病毒性和慢性迁延性肝炎患者的症状、体征和肝功能，是开发治疗肝病和降血糖等药理作用[4]。

本文采用超声波提取法从柿蒂中提取齐墩果酸，优化柿蒂中齐墩果酸的提取工艺，旨在进一步研究和开发利用新的药用植物资源，进一步促进柿植物资源的开发利用，同时优化提取工艺为工业生产提供依据。

1仪器与试药

1.1仪器

TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；台式连续投料粉碎机(温岭市林大机械有限公司)；DF-16型数显恒温水浴器(常州国华电器有限公司)；台式离心机(上海安亭科学仪器厂，TDL80—2B)等。

1.2试药

柿蒂采购于百色市右江区，经右江民族医学院民族医学门诊部覃道光副教授鉴定为柿蒂。齐墩果酸对照品(批号110709-201206),中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用的的甲醇为色谱纯，乙醇、冰醋酸、甲酸、高氯酸等分析用试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1标准曲线的绘制

2.1.1对照品溶液的配制取齐墩果酸对照品，精密称取2.3mg置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配成0.23mg/ml的对照品溶液，备用。

2.1.2最大波长的选择用微量移液器吸取100μL的对照品液于具塞试管中，70℃水浴蒸干后，冷却，在试管中加入新配制的5％的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml和高氯酸溶液0.8ml，摇匀盖塞，于70℃恒温水浴加热15min，立即冰水冷却2-3min，然后分别加入冰醋酸10ml，在200～700nm范围内扫描，发现对照品溶液在545nm处有最大吸收峰，且空白对照无干扰，因此选择545nm为检测波长。

2.1.3标准曲线的绘制用微量进样器分别吸取齐墩果酸标准液0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml置于具塞试管中，按2.1.2法操作，随行溶剂作空白。结果表明齐墩果酸在0.05-0.45mg/ml浓度范围内线性关系良好。

2.1.4样品溶液的制备及测定取1g柿蒂粗粉置于试管中，加入适量的的乙醇，超声提取一定时间。布氏漏斗抽滤后，取供试品10ml于离心管中，4000r/min离心，取上清液0.1ml，按2.1.2项方法处理，在545nm处测定吸光度值，计算齐墩果酸的含量。

2.2单因素实验

选定提取时间、乙醇浓度、料液比对超声提取率的影响进行单因素实验。在单因素的基础上，确定正交实验的因素和水平范围，以齐墩果酸的含量为指标。从单因素实验数据分析，以提取时间(A)、乙醇浓度(B)、料液比(C)、空白(D)为考察因素，每个因素各取3个水平，得到正交试验的因素水平表。如表1所示

2.3正交试验及结果分析

根据单因素实验的结果，设计正交试验的因素水平表，并按L9(34)正交试验安排表进行实验。准确称取柿蒂药材粗粉1g9份，如表2设计，超声提取后按2.1.4项处理，记录吸光度值，计算齐墩果酸的含量。结果见表2。

由表2的直观分析可知，3个因素中乙醇浓度B的R值最大，也就是乙醇浓度对提取工艺的影响最大，各因素对超声提取影响大小的顺序是B>C>A。较佳提取工艺条件是A2B3C1。各因素对提取均有一定影响，但差异不显著性。所以最佳提取工艺为A2B3C1，即提取时间40min、乙醇浓度90%、料液比1：8。

3讨论

本实验采用单因素结合正交设计优化柿蒂中齐墩果酸提取工艺，对提取时间、乙醇浓度、料液比三个因素进行了考察，以齐墩果酸的含量为指标，筛选出最佳提取工艺条件为：提取时间40min、乙醇浓度90%、料液比1：8。该工艺条件简单，稳定可行。

高效液相色谱法方便、准确度高，曾参考文献的齐墩果酸色谱条件进行摸索，但是由于齐墩果酸与熊果酸为同分异构体，性质相近，较难分离，色谱条件不易建立，进而采用紫外分光光度法进行测定。从实验结果表明，本法操作简便，测定结果快速。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].中国医药出版社,2010:233

[2]《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编:上下册[M].北京:人民卫生出版社,1973:680

[3]田丽婷,马龙,堵年生.齐墩果酸的药理作用研究概况[J].中国中药杂志,2002,(12):884-886

[4]陈志辉,徐良梅,李建平.齐墩果酸研究进展[J].饲料博览,2010(6):7-9

[5]蒋莺,程建宇,钟晓红.柿蒂的研究进展[J].现代园艺2013,(4):23

基金项目：右江民族医学院2013年度自治区级大学生创新训练计划项目（No.QJCX201331）