肖琦1阳文武1薛梅2
(1重庆万州食品药品检验所重庆万州404100)
(2重庆三峡中心医院重庆万州404100)
【摘要】目的建立舒肺糖浆的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中的甘草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对盐酸麻黄碱进行含量测定,色谱柱采用菲罗门C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.025mol/L磷酸二氢钠-甲醇(85:15),流速为1.0ml/min,检测波长为210nm。结果在薄层色谱图中检出了甘草药材的特征斑点,阴性无干扰;盐酸麻黄碱进样量在0.032~0.795μg范围与峰面积线性关系良好,r=0.9997,平均回收率为99.54%(RSD=0.87%,n=6)。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于舒肺糖浆的质量控制。
【关键词】舒肺糖浆质量标准薄层色谱高效液相色谱盐酸麻黄碱
【中图分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)12-0136-02
TheQualityStandardforShufeiSyrup
XiaoQi1,YangWenwu1,XueMei2
(1.WanzhouInstituteforFoodandDurgControl,WanzhouChongqing404100;2.ChongQingThreeGorgesCentreHospital,WanzhouChongqing404100)
【Abstract】ObjectiveToestablishthequalitystandardforShufeiSyrup.MethodsRadixGlycyrrhizaewasidentifiedbyTLC.EphedrineHClwasdeterminatedbyHPLC,ThePhenomenexC18column(250mm×4.6mm,5μm)wasusedwiththemobilephaseof0.025mol/Lsodiumdihydrogenphosphateanhydrous-methanol(85:15)ataflowrateof1.0ml/minandthedetectionwavelengthwassetat210nm.ResultsRadixGlycyrrhizaecouldbedetectedbyTLC,negativedeterminationwithoutinterference.EphedrineHClwaslinearwithin0.032~0.795?gr=0.9997andtheaveragerecoveryratewas99.54%(RSD=0.87%,n=6).ConclusionTheestablishedmethodissimple,accurateandbetterrepeatable,whichcanbeusedforthequalitycontrolofShufeiSyrup..
【Keywords】ShufeiSyrupQualityStandardTLCHPLCEphedrineHCl
舒肺糖浆是由盐酸麻黄碱、氯化铵、甘草流浸膏、桔梗流浸膏、百部流浸膏等五味药组成的复方制剂,具有镇咳祛痰的功效,用于治疗急慢性支气管炎,收载于《卫生部药品标准?中药成方制剂》第十二册[1],仅有两个化学反应和氯化铵含量测定。质量标准不完善,不利于其质量控制。为提高质量控制标准,本文对其方中其他成分进行检测,现报告如下。
1仪器与试药
高效液相色谱仪(安捷伦agilent1100);盐酸麻黄碱对照品(批号为171241-201007,供含量测定用,含量以99.7%计),由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯;舒肺糖浆(太极集团西南药业股份有限公司,批号分别为110302、110503、120202)。
2方法与结果
2.1薄层色谱[2]
取本品1ml,蒸干,加甲醇10ml,滤过,滤液作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g,加水煎煮3次,每次2小时,合并煎液,放置过夜使沉淀,取上清液用水饱和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液。再取按处方比例除去甘草的阴性样品,同供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(365)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,而阴性对照品无干扰(见图1)。
1,3-供试品溶液2,4-对照药材溶液5.阴性对照品溶液
图1薄层色谱图
2.2含量测定
2.2.1色谱条件
色谱柱:菲罗门C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相:0.025mol/L磷酸二氢钠-甲醇(85:15),流速为1.0ml/min,检测波长为210nm。
2.2.2溶液制备
精密量取本品2ml,置50ml量瓶中,加入0.01mol/L盐酸稀释定容,摇匀,滤过,取续滤液,即得供试品溶液。精密称取盐酸麻黄碱对照品适量,加0.025mol/L磷酸二氢钠制成每1ml含约30μg的溶液,作为对照品溶液。按处方工艺制备不含盐酸麻黄碱的样品,同供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。
2.2.3方法学考察
专属性试验:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10μl,依法进行测定,结果阴性对照品溶液无干扰(见图2)。
ABC
A.对照品溶液B.供试品溶液C.阴性对照品溶液
图2高效液相色谱图
线性关系考察:分别精密吸取质量浓度为0.0318mg/ml的盐酸麻黄碱对照品溶液1,5,10,15,20,25μl,进样,测定峰面积,以峰面积对进样量进行回归,得方程为Y=0.0104X+0.4874,r=0.9997(n=6)。结果表明,盐酸麻黄碱进样量在0.032~0.795μg范围内与峰面积线性关系良好。
精密度实验:精密吸取对照品溶液,连续进样6次,每次10μl。结果的RSD=0.98%(n=6)。
稳定性实验:取同一供试品溶液,每2h进样1次,结果5次测定的峰面积的RSD=1.1%,表明供试品溶液中盐酸麻黄碱在10h内稳定。
重复性实验:取同一批号样品6份,按样品溶液制备方法操作,测定盐酸麻黄碱峰面积。结果的RSD=1.6%,表明方法的重复性良好。
加样回收试验:精密量取已知含量的样品1ml,共6份,分别加入浓度为0.1490mg/mL的盐酸麻黄碱对照品5ml,加0.01mol/L盐酸稀释定容至50ml量瓶中,依法测定,计算回收率,结果见表1。
表1盐酸麻黄碱加样回收试验结果(n=6)
样品含量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)X-(%)RSD(%)
0.74760.74501.4956100.4
0.74760.74501.4972100.6
0.74760.74501.479498.2399.540.87
0.74760.74501.487399.29
0.74760.74501.487099.25
0.74760.74501.488599.45
2.2.4样品含量测定
取本品3批(批号分别为110302、110503、120202),按含量测定方法进行测定,外标法计算供试品中盐酸麻黄碱的含量,结果分别为0.744、0.752、0.748mg/ml,RSD%分别为0.44%、0.30%、0.35%。
3讨论
本文对方中的甘草流浸膏、桔梗流浸膏、百部流浸膏均进行了薄层色谱的鉴别试验,结果显示,桔梗流浸膏和百部流浸膏阴性对照有干扰,有待进一步更改实验条件,甘草流浸膏获得了较好的分离效果。综合了文献资料[3][4],最终选定了色谱条件为流动相:0.025mol/L磷酸二氢钠-甲醇(85:15),流速为1.0ml/min,检测波长为210nm,对盐酸麻黄碱进行了测定,获得了较好的分离效果。本文方法简便,易操作,重现性好,准确性高,可以作为舒肺糖浆的质量控制。
参考文献
[1]WS3-B-2439-97,中华人民共和卫生部药品标准?中药成方制剂(第十二册)[S].
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:80
[3]WS-10001-(HD-1083)-2002,国家药品标准?化学药品地方标准上升国家标准(第十一册)[S].
[4]YBZ14452004,国家食品药品监督管理局标准(试行),小儿化痰止咳颗粒[S].