无醛固定液在病理技术中的应用分析

无醛固定液在病理技术中的应用分析

龚广

（广西科技大学第一附属医院病理科;广西柳州545002）

【摘要】目的：本文主要探究无醛固定液应用在病理技术中产生的影响,了解无醛固定液在病理诊断中的应用价值。方法：选取2017年04月10日至2018年04月10日在本院进行检查的100例组织活体标本参与本次研究，每种组织均取2块,分别进行GS无醛固定液(实验组)及甲醛固定液(观察组)进行组织固定,之后展开HE染色及免疫组化染色,对其效果进行观察。结果：观察组液面较为浑浊,组织出现上浮;实验组液面十分清亮,组织出现沉底,变硬和变白,切片连续性较好。HE染色实验组细胞形态完整，着色好，核浆对比分明；在免疫组化染色效果分析之中，实验组标本组织细胞抗原性比较佳，背景比较清晰，阳性结果定位更加准确。结论：无醛固定液和甲醛固定液比较，HE染色与免疫组化染色效果基本上一致甚至更优，在某些组织的病理分析之中更加倾向于应用无醛固定液，无醛固定液可替代甲醛固定液。

【关键词】无醛固定液；甲醛固定液；病理技术；免疫组织化学；病理诊断

在病理技术及病理诊断之中，一般会选择甲醛固定液。但因甲醛固定液本身具有的毒性较大且易挥发，对人的健康造成严重危害[1]。无醛固定液为新型的固定液，近些年来被广泛的应用在病理技术及病理诊断之中，是因为组织标本的HE染色及免疫组化染色效果佳，可保障组织细胞完整性，因此是理想的固定液[2]。本文选取2017年04月10日至2018年04月10日在本院进行检查的100例组织活体标本参与本次研究，每种组织均取2块,分别进行GS无醛固定液(实验组)以及甲醛固定液(观察组)进行组织固定,之后展开HE染色及免疫组化染色,探究无醛固定液应用在病理技术中产生的影响,了解无醛固定液在病理诊断中的应用价值，现作以下陈述：

1资料和方法

1.1患者资料

选取2017年04月10日至2018年04月10日在本院进行检查的100例组织活体标本参与本次研究，每种组织均取2块,分别进行GS无醛固定液(实验组)以及甲醛固定液(观察组)进行组织固定。其中乳腺癌组织21例，结肠腺癌组织20例，肺癌组织13例，淋巴瘤组织19例，卵巢癌组织12例，前列腺癌组织15例。

试剂：GS无醛固定液、甲醛固定液、脱水液、无苯透明液、浸蜡液；ER、PR、CK20、CA199、CK7、EGFR、CAI25、WT-1、CD3、CD20、PSA、P504S，DAB二抗显色系统。

1.2．方法

本次研究选取在本院进行检查的100例组织活体标本参与本次研究，每种组织均取2块,大小为2cmx1cmx0.2cm,分别进行GS无醛固定液(实验组)以及甲醛固定液(观察组)进行组织固定。固定时间均为2小时，之后应用脱水液脱水5小时、无苯透明液透明1.5小时、浸蜡液1.5小时。待全部标本制备完成后,统一切片,其厚度为4um，同时进行HE染色及免疫组化检测。免疫组化染色采用LEIKA全自动免疫组化染色仪进行染色。乳腺癌进行ER、PR检测；结肠腺癌进行CK20、CA199检测；肺癌进行CK7、EGFR检测；淋巴瘤进行CD20、CD3检测；卵巢癌进行CAI25、WT-1检测；前列腺癌进行PSA、P504S检测。

2结果

本次研究每种组织均取2块,分别进行GS无醛固定液(实验组)以及甲醛固定液(观察组)进行组织固定,之后同时进行HE染色及免疫组化染色。其中观察组液面较为浑浊,组织出现上浮;实验组液面十分清亮,组织出现沉底,变硬和变白,切片连续性较好。细胞形态完整，着色好，核浆对比分明；免疫组化染色效果为实验组标本组织细胞抗原性比较佳，背景比较清晰，阳性结果定位更加准确。

3讨论

在病理诊断之中，HE染色及免疫组化染色为重要工具，在HE染色不能明确诊断时，大多数的病理诊断均需要进行免疫组化染色[3]。在实际工作中，免疫组化染色结果不稳定常有发生。本人认为组织固定液对免疫组化染色的稳定性产生一定的影响，固定是实验室检验之中最初始的一部，固定液在操作之中不可或缺，且固定液的质量会对切片的质量产生一定的影响[4]。传统的病理组织切片制作，一般是应用甲醛固定液进行。因为甲醛固定液对组织收缩较小、固定均匀，可较好的保存组织结构，因此被应用的次数比较多。但是甲醛固定液本身毒性大，易挥发，对环境污染较为严重，可致癌，若长期生活在甲醛环境之中，会增加患癌的可能性。且甲醛存放要求比较高，存放时间长会出现白色沉淀，在进行标本制作的过程之中，甲醛氧化活性较高，会使得溶液呈现酸性，固定之后标本也成为酸性，在染色时，会影响细胞核染色的效果。特别是在陈旧组织的免疫组化染色结果分析之中，十分容易影响病理诊断结果的判断。在应用之后，处理难度比较大，需要进行特殊处理，废液处理的成本也比较高。而环保无醛固定液，无色也无刺激，挥发性低，对环境的影响较小，渗透性比较强，有很好的固定作用。无醛固定液可有效清除脂肪组织，有效的保存DNA，减少抗原和核酸被破坏，保护组织形态结构，保障细胞膜的完整性[5]，便于研究。且无醛固定液处理较为简单，和乙醇液处理方式类似。本次研究主要是对100例组织活体标本进行分析，每种组织均取2块,分别进行GS无醛固定液(实验组)以及甲醛固定液(观察组)进行组织固定,之后展开免疫组化染色。研究结果显示：观察组液面较为浑浊,组织出现上浮;实验组液面十分清亮,组织出现沉底,变硬和变白,切片连续性较好。细胞形态完整，着色好，核浆对比分明；在免疫组化染色效果分析之中，实验组标本组织细胞抗原性比较佳，背景比较清晰，阳性结果定位更加准确。证实无醛固定液在病理诊断之中，可取得较好的诊断效果。

概而言之，无醛固定液和甲醛固定液在免疫组织化学染色中比较，效果基本上一致甚至更优，在某些组织的病理分析之中更加倾向于应用无醛固定液。在之后的病理检查之中无醛固定液可替代甲醛固定液。

【参考文献】

[1]黄荣祥,余岚岚,朱晨雁,马亮,聂琨,何文波.无醛固定液与醛类固定液对细胞核DNA及细胞质着色的影响[J].重庆医学,2017,46(23):3241-3244.

[2]陈国艳,汤红平,孔艳青,卢翔宇,陈莹莹.新型环保无醛固定液的动物实验研究[J].诊断病理学杂志,2016,23(11):877+880.

[3]吴平,张声.无醛固定液与甲醛固定液对DNA保存效果比较[J].临床与实验病理学杂志,2016,32(02):224-227.

[4]谢明,王桥秀,蒙艳斌,蒙国照,资源,程庆,周琴,郭皖北,张伟.无醛GS液替代致癌剂甲醛液在标本固定中的运用比较[J].湘南学院学报(医学版),2015,17(04):18-22.

[5]吴平,张声.无醛固定液与甲醛固定液对组织形态学保存效果比较[J].临床与实验病理学杂志,2015,31(03):343-345.