肌酸激酶同工酶CKMB质量和活性的比较

(整期优先)网络出版时间:2017-01-11
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肌酸激酶同工酶CKMB质量和活性的比较

柴琳1杨汝文1李云芬1张俊2(通讯作者)

(1昆明市中医医院检验科云南昆明650011)

(2昆明市中医医院骨科云南昆明650011)

【摘要】目的:比较两种方法测定血清中肌酸激酶同工酶(CKMB)质量与活性在缺血性心脏疾病中的应用。方法:采用化学发光免疫分析法与免疫抑制法同步检测急性心肌梗塞(AMI)组、非AMI组血清中CK-MB的质量和活性,并进行比较及相关性分析。结果:AMI组CKMB质量和活性均高于非AMI组(P<0.01),CKMB质量升高较活性早;非AMI男性组CKMB质量高于女性组(P<0.05),但CKMB活性无统计学意义(P>0.05)。AMI和NAMICKMB质量和活性相关性比较,男性组r值为0.857,女性组r值为0.893,均呈正相关,女性组相关性较男性组好。结论:在非急性心肌梗死患者中,测定血清中肌酸激酶同工酶(CKMB)质量与活性二者无明显差异。在急性心肌梗死患者CK-MB质量检测较活性检测灵敏度和特异性高。

【关键词】CKMB质量;活性;比较

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2017)03-0340-02

本文分析了40例急性心肌梗死患者和200例非急性心肌梗死患者血清CKMB质量和活性及其肌钙蛋白I浓度,并对其在临床中的应用进行了初步比较。

1.材料与方法

1.1实验对象

200例急性心肌梗死(AMI)住院患者,采取血液标本,以后每隔3h采集一次血液标本,入院第12h起每隔12h采血一次。年龄51~82岁,男120例,女80例;疾病对照组为非急性心肌梗死(NAMI)的住院患者40例,年龄35~83岁,男22例,女18例。

1.2仪器与试剂

1.2.1CKMB质量的测定罗氏Elecsys2010电化学发光免疫分析仪及其配套测定试剂盒。

1.2.2CKMB酶活性测定奥林巴斯AU5400型全自动生化分析仪,CKMB酶活性测定试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。

1.2.3实验方法293例有典型的持续胸痛史和心电图ST段抬高和Q波出现的入院患者,采取血液标本,以后每隔3h采集一次血液标本,入院第12h起每隔12h采血一次。挑选出确诊为AMI的患者200人,立即离心分离血清后,测定CKMB质量与活性。同样采集住院NAMI患者40人之血清标本,立即离心分离血清后,测定CKMB质量与活性。

2.统计学处理

两组血清CKMB质量与活性的比较均采用单因素方差分析方法进行数据分析。所有实验数据的处理采用SPSS17.0软件,计量资料以均值±标准差表示。两样本均数比较用t检验、相关性分析用Pearson相关分析,P<0.05差异有统计学意义。

3.结果

表1AMI(TNI>1.0ng/ml)和非AMI(TNI<0.01ng/ml)CKMB质量和活性比较

在非急性心肌梗死患者中,测定血清中肌酸激酶同工酶(CKMB)质量与活性男性组CKMB质量高于女性组(P<0.05),但CKMB活性无统计学意义(P>0.05),说明在NAMI人群中,CKMB质量参考范围男性大于女性。

图1女性CKMB质量和活性相关性比较

图2男性CKMB质量和活性相关性比较

CKMB质量和活性相关性比较,男性组r值为0.857,女性组r值为0.893,均呈正相关,女性组相关性较男性组好。

4.血清中肌酸肌酶(CK)

主要有3种同工酶(CKMM,CKMB和CKBB)和1个存在于线粒体中的同工酶,CK的同工酶是相对分子量在39000-42500之间的亚基形成的二聚体,而单链没有活性。每种同工酶分别由2个M亚基(MM),2个B亚基(BB),或者1个M亚基和1个B亚基(MB)组成。CKBB主要存在于脑组织;CKMB主要存在于心肌;CKMM主要存在于骨骼肌,其次是心肌;而线粒体CK具有独特的结构,不是由M和B亚基组成的[1]。血清中一般只能检测出CKMB和CKMM。传统的检测方法是免疫抑制法,该法是抗M亚基的抗体中和M亚基,在CKBB的活力可忽略不计的前提下测定CKB的活力,再乘以2换算成CKMB的活力,但是通过CK同工酶琼脂糖凝胶电泳鉴定分析后指出,CKMB活力假性增高可能是血清中CKBB、巨CK、腺苷酸激酶的影响[2]。同时在心脏外科手术中发生溶血时,由于心肌细胞中的肌激酶(MK)逸出,而MK可催化ADP反应生成ATP而引起NADPH的吸光度的变化(2ADPyATP+AMP)故对CK-MB的测定的结果也带来一定的影响。其它一些临床情况,如横纹肌溶解和中风,CKMB也可升高[3]。

国外近年来在急性心肌梗塞的诊断时多采用测定CKMB质量的方法,即测定CKMB的酶蛋白含量质量浓度(Mass),该法避免了免疫抑制检测中可能遇到的干扰,具有较高的灵敏度和准确性,不受体液中其他物质的影响,特别是抑制剂和激活剂的影响,当血液中有酶抑制剂存在,或因基因缺陷,合成了无活性的酶蛋白时,可以测出灭活的酶蛋白量,有利于疾病诊断和科学研究。优于其他检测方法,已经被广泛接受。

检测血清CK-MB质量是诊断急性心肌梗死的重要指标,症状发生3~8小时就可在血中测到;AMI组CKMB质量和活性均高于非AMI组(P<0.01),CKMB质量升高较活性早;质量和活性峰值到达时间完全一致,均为22.68±8.16(h),无显著性差异(P>0.05)。非AMI男性组CKMB质量高于女性组(P<0.05),但CKMB活性无统计学意义(P>0.05),说明在NAMI人群中,CKMB质量参考范围男性大于女性。AMI和NAMICKMB质量和活性相关性比较,男性组r值为0.857,女性组r值为0.893,均呈正相关,女性组相关性较男性组好,在AMI和NAMI人群中CKMB质量测定可取代CKMB活性测定。

【参考文献】

[1]WeberM,RauM,MadlenerK,etal.DiagnosticutilityofnewimmunoassaysforthecardiacmarkerscTnI,myoglobinandCKMBmass[J].ClinBiochem,2005,38(11):1027-1030.

[2]陈建芸,石玉玲,李林海等,血清CK-MB质量及其活性检测结果对比分析[J].华南国防医学杂志,2010,24(6):456-转467.

[3]刘艾芹,陈卫布,李小龙,年龄和性别引起的CKMB质量法和活性法检测结果差异性分析[J].医药前沿杂志,2013,(14):271.