分离胶管与肝素锂管对心肌酶测定的影响

分离胶管与肝素锂管对心肌酶测定的影响

何健黄松音刘勇冯慧馨

何健黄松音刘勇冯慧馨（中山大学孙逸仙纪念医院检验科510120）

【摘要】目的探讨分离胶管与肝素锂管对心肌酶谱（AST、LDH、CK、LD-1、HBDH、CK-MB）测定的影响。方法用三种试管：分离胶促凝管、肝素锂抗凝管与普通干燥管分装全血与混合血清，37℃水浴1.5与3小时后测定心肌酶谱。结果37℃水浴3小时内,全血标本随时间延长，肝素锂管组与普通干燥管组心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，分离胶管组则相对比较稳定。同一时间段,混合血清分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05）。全血标本三种试管间AST、CK与CK-MB无显著性差异（P>0.05），LDH、HBDH与LD-1有极显著性差异（P<0.01）。结论分离胶管与肝素锂管的化学成份对心肌酶谱本身影响不大，但可有效延缓血细胞内心肌酶析出，比较起来，分离胶管因为隔开了血细胞与血清能更接近标本采集时的状况。

【关键词】心肌酶分离胶肝素锂

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）33-0096-02

TheeffectofseparationgeltubeandHeparinlithiumtubeformyocardialenzymesmeasurements

HeJian,HuangSongyin,LiuYong,FengHuixin

Departmentofclinicallaboratory,SunYat-SenMemorialHospital.510120

【Abstract】Objective:Toinvestigatetheeffectondeterminingtheconcentrationofmyocardialenzymes(AST,LDH,CK,LD-1,HBDH,CK-MBincluded)betweenseparationgelcoagulationpromotingtubesandheparinlithiumcoagulationpromotingtubes.Methods:Thesamplesofwholebloodandpooledserumwererespectivelycollectedbyusingseparationgelcoagulationpromotingtubes,heparinlithiumcoagulationpromotingtubesandtraditionaldryingtube,thenanalysisthemeasurementsofmyocardialenzymesinthreekindsoftubesafterwaterbathheatingin37℃with1.5and3hours.Results:ThemeasurementresultsofLDH,HBDHandLD-1inwholebloodincreasedwithprolongoftimeinbothheparinlithiumcoagulationpromotingtubesandtraditionaldryingtubeinwaterbathheatingin37℃with3hours.However,it’scomparativelymorestableinseparationgelcoagulationpromotingtubes.TherewereNOsignificantdifferences（P>0.05）inthesametimeperiodamongtheresultsofdeterminingtheconcentrationwhichofmyocardialenzymesinpooledserumbothinthreekindsoftubesneitheramongtheresultsofAST,CKandCK-MBinwholeblood.Nevertheless,therewerehighlysignificantdifferences（P<0.01）amongtheresultsofLDH,HBDHandLD-1inwholebloodontheconditionmentionedabove.Conclusion:Thoughchemicalcomponentsofbothseparationgelandheparinlithiumtube’sdonothavemucheffectonthedeterminingofmyocardialenzymesitself,itcaneffectivelyslowdowntheprecipitationofmyocardialenzymesfromcells.Bycomparison,separationgeltubeismoreaccessibletothestateofbloodspecimencollectioncauseseparationbloodcellsandserum.

【KeyWords】myocardialenzymesseparationgelHeparinlithium

随着科学技术的发展，各种先进的仪器的出现，临床生化项目对于血液的采集与分离提出了更高的要求，它不仅要求发出快速的结果，而且也要求我们能够保证各项目结果的准确。过去医院多使用普通干燥管分装血液标本，近来由于相关技术的发展，很多医院开始使用肝素锂抗凝管与分离胶促凝管分装标本，离心后对其血浆（血清）进行测定分析，本文对两种试管测定心肌酶谱的影响的进行研究并报告如下。

材料与方法

一、材料

1、试管：分离胶促凝管，可加全血2.5ml；肝素锂抗凝管，可加全血3ml；普通干燥管即洁净干燥玻璃试管，可加全血2.5ml。

2、仪器与试剂：日立7170A全自动生化分析仪及其配套试剂：LDH、CK、LD-1与HBDH由上海长征医学科学有限公司提供；CK-MB由英国Randox公司提供；AST由上海科华-东菱诊断用品有限公司提供。

3、标本来源：随机抽取30例健康献血员，每人采静脉血8ml，另用本院病人（心肌酶谱正常）前日做生化项目剩余的血清（4℃冷藏）配成30份不同血清，每份4.5ml。

二、方法

1、配好30份混合血清，每份4.5ml，三种管平均分装后37℃水浴，1.5与3小时后各测定心肌酶谱一次。

2、随机抽取30例献血员，空腹采静脉血8ml,同一条件下按试管要求需血量分装于三种试管中，分离胶促凝管与肝素锂抗凝管加塞混匀，普通干燥管加塞。

3、肝素锂抗凝管即刻离心分离血浆，测定心肌酶谱，加塞后三种管拿去37℃水浴，1.5小时后取出三种管，分离胶管与干燥管拿去离心分离血清，再测定三种管心肌酶谱。

4、三种管继续37℃水浴1.5小时，然后测定各管心肌酶谱。

5、统计学处理：采用excel统计软件进行配对t检验。

结果

1、37℃水浴3小时内,同一时间段,混合血清的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05），见表1。

表1三种管混合血清心肌酶谱的测定结果（单位：U/L）

讨论

2、37℃水浴3小时内,全血标本随时间延长，肝素锂管组与普通干燥管组心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，而分离胶管组则相对比较稳定。以LDH为代表列图见下。同一时间段,全血AST、CK与CK-MB的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间无显著性差异（P>0.05），而全血的却有极显著性差异（P<0.01），见表2。

表2三种管分时间段全血心肌酶谱的测定结果（单位：U/L）

讨论

实验显示，37℃水浴3小时内,同一时间段,混合血清的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间心肌酶谱均无显著性差异（P>0.05），说明分离胶管与肝素锂管中的化学成分对心肌酶谱的测定影响不大。而对于全血标本，37℃水浴3小时内随时间增长，肝素锂管组与普通干燥管组的心肌酶谱中的LDH、HBDH与LD-1均有上升趋势，而分离胶管组则相对比较稳定，这与分离胶管中的分离胶离心后分开血细胞与血清[1]，抑制血细胞释放心肌酶谱有很大关系。

水浴过程中，全血的AST、CK与CK-MB三种管几乎不变，而LDH、HBDH与LD-1上升幅度却很大，同一时间段,全血AST、CK与CK-MB的分离胶管组、肝素锂管组与普通干燥管组间无显著性差异（P>0.05），但全血的LDH、HBDH与LD-1却有极显著性差异（P<0.01），这与血细胞中心肌酶谱的分布及分离胶管肝素锂管的作用机制有关。有文献提到红细胞和血小板中含有丰富的LDH，红细胞LDH是血浆的180倍[3]，而且红细胞中也含大量的HBDH，HBDH实际上是H型LDH的活性，另外LD-1为LDH的同工酶，红细胞中AST、CK与CK-MB相对较少，血液从早晨采集到实验室上机测定，一般要在室温放置2-3小时，这期间细胞代谢活动并没有终止，随着放置时间的延长，细胞内外物质发生转移[2]。血清分离胶是一种粘性流体，比重1.05，介于血清（1.02）与血块（1.08）之间，其结构中含有大量氢键，由于氢键的缔合作用形成网状结构，而这种具有网状结构的粘性液体具有触变性，当分离胶与凝固后的血液同在一个试管中离心时，在离心力的作用下，网状结构被破坏，变成粘度低的流体，发生回转现象，比分离胶重的血块转移到试管底部，分离胶便在血清和血块之间形成胶状的隔离层，阻断和减少了血细胞影响血清成分的通道，从而起到对血清中物质的稳定作用[5]。[4]37℃水浴1.5小时肝素锂管组的LDH、HBDH与LD-1比分离胶管组低，而水浴3小时则反之，并且分离胶管组与肝素锂管组均比普通干燥管组低，这与肝素锂管抗凝能保持细胞完整性，延缓红细胞胞内心肌酶谱析出[6]，以及分离胶管快速促凝使血细胞释出一部分心肌酶谱，离心后分开血细胞与血清有一定关系。

总之，心肌酶谱的测定受红细胞内物质析出影响比较大，分离胶管与肝素锂管具有析出血清或血浆快速，减少样品放置造成误差，出现溶血现象较少，对结果影响小，结果更真实等优点。相对来说，分离胶管因隔开血细胞与血清使结果更接近采血时状况。因此，在条件允许的情况下，我们应该尽可能使用分离胶管或肝素锂管来分装心肌酶谱标本，如果使用普通干燥管来分装心肌酶谱标本，则应采血后尽快分离血清。

参考文献

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[4]叶应妩，王毓三,主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京：东南大学出版社，1997.237-239.

[5]赵立飞，徐建华，解传芬，等.临床应用分离胶采血管需注意的问题[J].临床检验杂志2012,30(7):543-545.