血清miR-210在肺癌早期诊断中的作用研究

血清miR-210在肺癌早期诊断中的作用研究

徐学敏郑明星

徐学敏郑明星

深圳市第二人民医院呼吸科

[摘要]目的：调查研究血清miR-210（非编码单链RNA分子）在肺癌早期诊断中的作用及应用价值。方法：随机选取在我院进行肺癌治疗的患者100例，抽取患者血清,根据其诊断指标的不同，将其分为两组,miR-210组：50例；RNA组：50例。最后对两组患者的诊断标准率进行比较。结果：血清miR-210组对肺癌的早期诊断准确率明显高于RNA组，差异显著，统计学上有意义P<0.05，可见，miR-210对肺癌的早期诊断具有高度敏感性和特异性。结论：血清miR-210在肺癌早期诊断中具有高度敏感性和特异性,临床上应用血清miR-210检测对肺癌早期诊断具有重要意义。

[关键词]miR-210；肺癌；早期诊断；研究

微小RNA（miRNA,miRNA）是长度约16~29nt的非编码RNA，miRNA被发现既可存在于人体的血液中，亦可存在于痰、唾液、浆膜腔积液等体液中，miRNA具有组织特异性，与肺组织相关的包括let-7、miR-26、miR-34、miR-122、miR-123、miR-143、miR-145、miR-146、miR-210等40余种[2]，它们在肺癌组织表达中降低或升高，以癌基因或抑癌基因样作用，调节转录后翻译，促进或抑制肿瘤发生发展。其中,miR-210以其在缺血/低氧状态下的稳定性和功能的多样性引起了研究者的广泛关注[1]。为了解血清miRNA在临床上对肺癌的早期诊断作用，选取miR-210,特作此次调查研究，详细结果如下：

1资料与方法

1.1临床资料

随机选取2012年5月～2013年6月在我院进行肺癌检查与治疗的患者100例，抽取患者血清,而后根据其监测目标的不同将其分为两组：miR-210组，50例，男27例，女23例，年龄43～55岁，平均年龄（50.10±0.30）岁；RNA组，50例，男34例，女16例，年龄46～53岁，平均年龄（49.20±1.20）岁。并同时保证两组患者的其他信息无明显差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

应用Solex方法，检查患者体内的miR-210，对RNA中的一条链进行测序分析。应用滤柱法，在使用滤柱法时因血清中含有大量的蛋白质，通常在抽提前需要使用苯酚-氯仿处理样本，以去除蛋白质，防止在抽提过程中大量蛋白阻塞滤柱而大量损耗miRNA。实时荧光定量RT-PCR是检测血清miRNA表达量的常用方法,为获得更高的反转录效率和特异度，本实验采用其中的茎环状引物法,与正常人的miRNA顺序对比，应用同样的方式对RNA组患者的RNA顺序与正常人的进行对比，而后比较两组患者的异同，并比较其对肺癌的早期预测结果与准确率。

1.3观察指标

分别观察miR-210组患者的miRNA顺序和肺癌的早期诊断情况以及RNA组患者的RNA情况和肺癌早期诊断结果，同时做好记录，以便日后观察研究。

1.4统计学处理

统计分析时采用spss17.0软件分析，用检验计数资料，以p<0.05为有统计学意义。

2结果

2.1两组患者诊断准确率

通过对两组患者的早期诊断准确率的调查中发现，血清miR-210组对肺癌的早期诊断准确率竟高达90%，明显高于RNA组（30%），差异显著，统计学上有意义P<0.05；而RNA组的诊断错误率为70%，显著高于miR-210组（10%），差异显著，统计学上有意义P<0.05。具体详细信息请见表1：

表1两组患者诊断准确率[n(%)]

3讨论

肺癌是位居全球死亡率第二的恶性肿瘤，目前，对肺癌的早期诊断存在困难，其被发现时2/3已为晚期。因此，如何提高肺癌早期诊断率已成为改善患者预后的重要课题。大量研究结果表明，50%以上的miRNA基因定位于与肿瘤相关的区域或脆性区域，调查研究显示，肺癌发生的整个过程均伴随着miRNA表达谱的改变，且在肺癌形成的早期阶段，miRNA就已参与其中。本次研究发现，以miR-210为代表的miRNA组对肺癌的早期诊断准确率明显高于RNA组，差异显著，统计学上有意义P<0.05。作为一种非侵入性诊断方法，血清miR-210的出现和应用为早期诊断肺癌提供了准确可靠的支持。大量研究表明[3]，在人体内，大部分是由miRNA和mRNA的非编码区配对形成的链状结构，而后抑制mRNA转录，进而妨碍蛋白质的合成作用，导致靶基因表达受限。miRNA在其正常的生物合成过程中，作为RNA聚合酶Ⅱ转录后形成的产物，会经过细胞核的进一步加工，转变成核苷酸，从而形成mRNA前体，而后经过一系列的剪切、配对，形成复合物，然后与靶基因mRNA互补配对，使得形成的产物进一步影响蛋白质的翻译过程，miRNA直接参与染色体的缺失。由此可知，miRNA具有调节功能，尤其是在基因调节方面，它在细胞的发育期、分化期等均参与疾病的发生发展过程。因此,观察miRNA的变换情况，对临床上早期诊断肺癌具有不可忽视的作用。

研究发现,miRNA可能参与了几乎所有的细胞生物学行为的调控，如个体发育，细胞分化、增殖、凋亡、迁移和转移等，也可能参与了肿瘤恶性表型的形成和发展过程，和肺癌MDR（肿瘤细胞对抗癌药物的多药耐药现象）也存在一定联系；而且在与正常人的肺组织对比中发现，正常人体内的miRNA的表达形式与肺癌患者体内的miRNA表达形式有着显著的差异，所以miRNA可以作为该病的重要检测指标之一。通过对患者的血液分析，我们发现血清miR-210会以稳定的形式存在于患者体内而不被RNA酶降解。而且通过本次调查研究发现，以miR-210为代表的miRNA组对肺癌的早期诊断准确率明显高于RNA组，差异显著，统计学上有意义P<0.05。可以认为，血清中miR-210的分布有助于肺癌的早期诊断。由此可见，血清miR-210在肺癌的早期诊断中具有高度敏感性和特异性,作为一种非侵入性诊断方法，将为肺癌早期诊断提供新的重要的途径。

参考文献：

[1]王启钊，吕颖慧，刁勇，等.MiRNA在肺癌早期诊断、预后判断和治疗中的作用[J].中国生化药物杂志，2008，29(5):352-354.

[2]NegriniM,FerracinM,SabbioniS,etal.MicroRNAsinhumancancer:fromresearchtotherapy.JCellSci,2007,120(Pt11):1833-1840.

[3]AbbriM，GarzonR，CimminoA，etal.MiRNA-29familyrevertsaberrantmethylationinlungcancerbytargetingDNAmethyltransferases3Aand3B[J].ProcNatlAcadSciUSA，2007，104(40):15805-15810.

[4]SmallEM，FrostRJ，OlsonEN.MiRNAsaddanewdimensiontocardiovasculardisease[J].Circulation，2010，121（18）：1022—1032.

[5]LeeYS，DuttaA.MiRNAsincancer[J].AnnuRevPathol，2009，4（2）：199—277.