免疫抑制法测定非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因分析

免疫抑制法测定非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因分析

钟兴勇黄建成

钟兴勇黄建成

(福建省宁德市闽东医院检验科福建宁德355000)

【摘要】目的：探讨用免疫抑制法测非心肌损伤患者CK-MB>CK的原因。方法：用抗CK-M亚基抗体抑制血清中CK-M亚单位的活力，测定B亚基酶活力，即免疫抑制法。结果：检测56例非心肌梗死患者血清标本中，CK活力相对较低，CK-MB>CK,CK-MB升高。结论：用酶免疫抑制法测定非心肌梗死患者CK-MB时，如果CK-MB>CK,可能是血清中CK-BB，CK-MM增高以及巨CK的存在，造成CK-MB的升高。

【关键词】免疫抑制法；CK;CK-MB;全自动生化分析仪

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）23-0124-02

肌酸激酶主要存在心肌，骨骼肌和脑组织中，有三种形式的同工酶：CK-MM，CK-MB和CK-BB。其中CK-MB是心肌损伤特异而敏感的指标，曾被认为是诊断心肌梗死和心肌炎的金指标[1],并利用其增高的时间与梯度观察患者的病情变化，治疗效果及愈后。

1.材料

1.1分析对象：病例来自我院2013年1月至2014年1月住院非心肌梗死患者56例，且标本检测的结果都是CK-MB>CK.

1.2仪器：TOSHIBA2002

1.3试剂：利德曼CK,CK-MB试剂.

2.方法

CK-MB检测方法在生化方面广泛应用的是免疫抑制法，即在试剂中加入CK-MM的抑制体（抗体），通过抗体与M亚基结合以达到抑制M亚基的活性而不抑制B亚基的活性，然后采用连续监测法测定总肌酸激酶的活性，结果乘以2既得CK-MB活性，此方法是基于CK-BB的含量极微，可忽略不计。

3.结果

对56例非心肌梗死患者血清做CK-MB>CK的分析，CK活力相对较低，CK-MB升高。其中肿瘤患者36例，腹泻患者13例，肝硬化患者4例，其它疾病的有3例。

4.讨论

测定CK-MB的方法有多种，目前临床实验中常规使用的有免疫抑制法，免疫质量法，电泳法和金标法等。免疫抑制法测定血清CK-MB活性的原理是用抗CK-M的抗体与患者血清共同温育，使血清种的CK-M亚基全部被抑制，从而测定血清中不被抑制的CK-B亚基活性，它代表着CK-BB和CK-MB中的B亚基的活性，由于健康人及心脏，肌肉疾患者血清中CK-BB的含量极低，故常规忽略不计，这些人血清中的CK-B亚基活性实际上只代表着CK-MB中的B亚基活性，它再乘以2以后，即为血清中CK-MB的活性。

CK-MB主要存在于人体心肌细胞内,正常人血清中大部分为CK-MM,只有少量的CK-MB,CK-MB占CK总活力少于5%,绝对值不超过25U/L,而且CK-MB的测定值随CK的测定值增高而上升,当梗死或炎症等原因引起心肌细胞受损或坏死,使得大量的CK释放到血中,这时血清中CK-MB占CK总活力>5%为阳性，最高值达12%-28%[2]。免疫抑制法测定CK-MB可直接上自动生化分析仪操作，快速出结果，适用临床生化检验，测定CK-MB酶活力作为诊断急性心肌梗死的特异性指标已被广为应用，但我们免疫抑制法检测CK-MB的几年来，观察发现了其存在严重的缺陷，存在假阳性的问题，经常有CK-MB占CK总活力38%以上，甚至大于CK的病例。

免疫抑制法测定CK-MB用于心肌梗死患者诊断时，由于各种因素的影响容易造成CK-MB假性增高，甚至CK-MB值大于CK,此时检测出来的结果患不能作为临床心肌损伤的诊断，其原因如下：

（1）.CK-BB增高，CK-BB主要存在于脑组织，胃肠道及子宫平滑肌中，脑组织中的CK几乎全部是CK-BB，正常人血清中无CK-BB或极少量。当上述组织坏死时可出现血清CK-BB升高，会干扰免疫抑制法测定CK-MB[3]。CK-BB也广泛存在于肿瘤组织及各种恶性肿瘤患者血清中[4]。56例的标本就有36例是肿瘤患者,这些标本中的肿瘤物或赘生物合成CK-BB，还有一部分来自胃肠道疾病肿瘤和腹泻（如婴幼儿轮状病毒感染引起的腹泻），CK-BB增加，且因计算时结果乘以2，扩大了误差，造成CK-MB升高。

（2）.CK-MM增加，免疫抑制法检测CK-MB的活性，是用单克隆抗体与CK中的M亚基结合而抑制同工酶CK-MM以及CK-MB中的M亚基的活性活，再通过速率法测定酶活力单位，因此，当CK含量很高，此时试剂中抗CK-M抗体量相对不足，M亚单位没有完全被抑制，M亚单位同时与B亚单位参加反应，因而造成CK-MB升高

（3）.巨CK的出现,巨CK1是CK同工酶与自身抗体的复合物,最多的是CK-BB与IgG或IgA的复合物,也有少数是CK-MM与IgG或IgA的复合物.巨CK2是一种低聚的线粒体CK,又称CK-Mt,存在于细胞的线粒体膜上,当线粒体崩解时巨CK2进入血液中,巨CK2的抗原性与CK-M和CK-B不同,故抗M的抗体不能抑制巨CK2,导致CK-MB升高[5]。

故为了给出准确的检测结果，实验室可以同时使用电泳方法或免疫质量进行检测，当CK-MB用于诊断急性冠脉综合征或急性心肌梗死时，建议同时测定肌钙蛋白（TnI或TnT），以准确判断是否存在心肌损伤。另一方面很好的解决了临床医生对CKMB>总CK结果的质疑。

【参考文献】

[1]中华医学会儿科学分会心血管组,病毒性心肌炎诊断标准[J]中华儿科杂志,2000,38(2):75

[2]叶应妩，王毓三，全国临床检验操作规程[M]，2版，南京：东南大学出版社，109

[3]王爱华，许绍辉，于嘉屏等.巨肌酸激酶鉴定方法的建立及临床应用[J]临床检验杂志，2000，18（2）：87-89

[4]ZarhamiN，HeYu，DiamandisEP，etal。QuantificationofcreatinekinasesBBisoenzymeintumorcytosolsandserumwithanultrasensitive：ime-resoivedimmunofluorometrictechnique[J]ClimBiochem，1995，28（3）：243-253

[5]白志瑶,李晓东,王军,王吉惠,王明凤,孟淑媛,孙继芹巨CK对免疫抑制法测定CK-MB的干扰及鉴别[J]中国误诊学杂志,2003,3(06):859-860