益心补肾汤对心衰大鼠治疗的可能机理的试验研究

益心补肾汤对心衰大鼠治疗的可能机理的试验研究

戚亚飞

戚亚飞

（杭州市第一人民医院浙江杭州310006）

【摘要】目的：通过制备心衰大鼠模型，考察益心补肾汤对心衰治疗的可能机理。方法：将心衰大鼠分为4个组别，心衰模型组、益心补肾汤小剂量组、大剂量组和阳性药组，设正常大鼠作为对照组，连续给药28d。结果：与空白组比，心衰模型组的左室指数、心脏指数、心率、脑钠肽(BrainNatriureticPeptides，BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinsystemⅡ，Ang-Ⅱ)与醛固酮(Aldosterone，ALD)明显增大或增高(P<0.05或P<0.01)，与心衰模型组比，益心补肾大、小剂量组均可明显降低心衰大鼠的左室指数、心脏指数、心率、BNP、Ang-Ⅱ和ALD(P<0.05)。阳性药可降低心衰大鼠的左室指数、心脏指数和ALD(P<0.05)。与心衰模型组比，益心补肾大小剂量组和阳性药的空泡变性和炎症细胞聚集程度较轻，益心补肾小剂量和阳性组损伤相当，益心补肾大剂量损伤较轻。结论：益心补肾汤通过降低心衰大鼠的左心室指数、心脏指数、BNP、Ang-Ⅱ和ALD，改善心衰大鼠肺水肿病理而治疗心衰。

【关键词】益心补肾汤；心衰大鼠；左心室指数；BNP；Ang-Ⅱ；ALD

【中图分类号】R-332【文献标识码】A【文章编号】1004-6194（2015）01-0113-02

ExperimentalStudyofthePossibleMechanismofYixinbushenontheHeartFailureinRats

【Abstract】Objective:TostudythepossiblemechanismofYixinbushenontheheartfailureinrats.Methods:Theratmodelofheartfailurewasprepared.Theheartfailureratswerepidedinto4groups:heartfailuremodelgroup,thelow-doseofYixinbushengroup,thehigh-doseofYixinbushenandtheDanshengroup.Normalratswereenrolledasthecontrolgroup.5groupshadbeenadministratedthecorrespondingdrugsfor28days.Results:Comparedwiththecontrol,theleftventricularheartindex,cardiacindex,heartrate,brainnatriureticpeptides(BNP),angiotensinsystemⅡ(Ang-Ⅱ)andaldosterone(ALD)wereincreasedsignificantlyinheartfailuregroup(P<0.05orP<0.01).Comparedwiththeheartfailuregroup,theleftventricularheartindex,cardiacindex,heartrate,BNP,Ang-ⅡandALDweredecreasedinYixinbushengroup(P<0.05).Theleftventricularheartindex,cardiacindex,heartrateandALDweredecreasedinDanshengroup(P<0.05).Yixinbushencanmitigatethedegreeofdegenerationandinflammatorycellofthepulmonaryedemainducedbyheartfailure.Conclusion:Yixinbushencouldtreatheartfailurebyreducingleftventricularindex,cardiacindex,BNP,Ang-Ⅱ,ALDandpulmonaryedema.

【KeyWords】Yixinbushen,heartfailure;LeftVentricularHeartIndex,BNP,Ang-Ⅱ,ALD

心力衰竭(HeartFailure，HF)，简称心衰，由多种原因引起心脏结构和功能异常，损害了心室充盈与射血能力，伴随神经内分泌异常激活和心室重构等分子机制异常的进行性临床综合征[1]。整个欧洲的心衰患者占总人口2%，我国30-75岁成人中约400万心衰患者并伴有年轻化趋势[2]。尽管对心衰治疗已取得瞩目进展，但心衰的预后极差，当诊断为有症状性心衰，5年生存率约35%，与癌症和获得性免疫缺陷综合征的死亡率相当，因此心衰如何治疗已成为大多数国家的公共卫生问题。西医治疗以抑制肾素－血管紧张素－醛固酮系统和交感神经系统过度激活，控制心室重构，改变心衰的生物学性质，但心衰治疗需长期给药，西药往往存在较大和难以耐受的不良反应，祖国医学对“心力衰竭”的病证有着及其丰富的治疗经验，本课题考察由菟丝子和枸杞子等中药组成的益心补肾汤对心衰大鼠的治疗的可能机理，为该汤剂应用临床提供理论基础。

1资料和方法

1.1实验动物SPF级SD雄性大鼠65只，体重200±20g。

1.2仪器及试剂Biopac多导生理信号采集分析系统，BIO-RADmodel550型酶标仪、小动物呼吸机、脑钠肽、血管紧张素Ⅱ和醛固酮酶联免疫试剂盒均为美国BlueGene提供，菟丝子和枸杞子等中药材购自市中医院。

1.3心梗后心衰模型的制备[3]术前禁食不禁水，麻醉、固定、备皮和消毒。分离气管，经口插管，接呼吸机：呼吸频率60-70次/min，呼吸比1:1。开胸：选胸骨旁纵行切口，显露胸大肌，分离胸大肌、前锯肌，剪开肋间肌，进胸，动脉圆锥和左心耳之间冠状静脉处结扎左冠状动脉前降支。牵起胸腺组织，剪开心包，牵开左心耳，左心耳根部与肺动脉圆锥夹交点下进针，绕过心大静脉，近室间隔处出针，结扎，关胸，待大鼠自主呼吸恢复拔气管插管，白炽灯保温1h，术后给予青霉素400U皮下注射，1次/d，连续3d。

1.4动物分组和给药将所有大鼠随机按体重分层分组，共5组，每组13只，①空白组、②心衰模型组、③益心补肾汤小剂量组、④益心补肾汤大剂量组和⑤阳性药组，其中②-⑤组为心衰模型，①和②组生理盐水灌胃，③和④组给与益心补肾汤，分别3.0ml/100g和1.5ml/100g灌胃，1次/d，⑤组给与复方丹参滴丸，1丸/100g灌胃，所有组别连续给药28d。

益心补肾汤淫羊蕾、女贞子和丹参各15g、茯苓、芍药、石首蒲和生蒲黄各10g、葛根15g，水煎并浓缩至含生药5g/mL。

1.5指标检测给药28d处死大鼠，收集心脏重量(含左室重量)、心率，计算左室重量指数和心脏指数，采集全血5mL，离心分离血清，采用ELISA法测定血清脑钠肽(BrainNatriureticPeptides，BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinsystemⅡ，Ang-Ⅱ)和醛固酮(Aldosterone，ALD)水平。

1.6统计学处理将所有数据输入SPSS15.0软件包中，计量资料采用“均数±标准差”表示，计数资料采用例数或百分比表示，组间比较采用组间方差分析或卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1益心补肾对心衰大鼠左室重量指数、心脏指数和心率的影响5个组别的左室指数、心脏指数和心率均有显著差异(P<0.05或P<0.01)，与空白组比，心衰模型组的左室指数和心脏指数明显增大(P<0.05)，心率明显增高(P<0.05)，与模型组比，益心补肾大小剂量组和阳性药的左室指数和心脏指数显著降低(P<0.05)，心率明显降低(P<0.05)，可参见表1。

3讨论

祖国医学古文献中没有明确的“心力衰竭”病名，但“心力衰竭”属于中医的“心痹”、“心悸”和“喘证”的范畴。大多数专家认为心力衰竭的基本病机是本虚(气虚、阳虚)标实(血瘀、水停)。在心衰脏腑归属方面，有五脏相关说[4]、心脾相关说[5]和“心肾相关说[6]”，其中“心肾相关说”为大多数医者认可。从生理角度，心肾由经络联系，《灵枢?经脉》“肾足少阴之脉，……其支者，从肺出络心，注胸中。”，《灵枢?营气》“循足心注足少阴，上行注肾，从肾注心，外散于胸中”；从病理角度，《金匾要略》“心水者，其人身重而少气，不得卧，烦而燥，其人阴肿”，《华佗中藏经》“心有水气，则身肿不得卧，烦燥”。另外，“心肾相关说”也得到了西医认可，心力衰竭与肾功能异常相互影响：心力衰竭时，心排血量(CO)减少，肾脏处于低灌注状态，肾脏长期处于缺血和缺氧的状态可增加肾脏对各种损伤因素的敏感度，如动脉硬化引起的氧自由基、炎症、交感神经、肾素血管紧张素系统激活会刺激肾血管内皮功能降低，造成肾单位凋亡坏死，肾血管阻力增加，肾回心血量减少，进一步恶化心衰。在心力衰竭的基本病机基础，依据“心肾相关说”理论，中医对“心力衰竭”的病证有丰富的治疗经验，陈晓峰[7]等以真武汤治疗慢性充血性心力衰竭，总有效率为96.0%，明显高于对照组的有效率84.0%，熊卫林[8]等用益气固肾法治疗慢性心力衰竭23例，阳气虚型用Ⅰ号方：红参、丹参、白术和补骨脂各15g、茯苓30g、附子、淫羊藿和枳壳各10g，葶苈子、桑寄生各20g、炙甘草6g。阴虚型用Ⅱ号方：西洋参、麦冬、丹参15g、黄精、玉竹、制首乌、桑寄生和生地各20g，胡麻仁、五味子各10g和炙甘草5g，总有效率超过95.0%。

本课题的益心补肾方是本院临床应用多年的验方，由淫羊藿、女贞子、丹参、茯苓、芍药、石首蒲、生蒲黄和葛根组成，方中淫羊藿为君药，性辛、温，归肾肝经，《本经》认为淫羊藿可补肾壮阳，益气力，强志；女贞子为臣药，性甘、苦、凉，可归肾、肝经，滋阴养肝，《本草纲目》认为女贞子可强阴健腰膝、补肾益精、补阴壮阳，使肾气旺，血运畅；丹参，性苦、微寒，归心、心包、肝经，可活血祛癖，《大明本草》认为丹参可养身定志，通例关脉；蒲黄，性甘、平，归肝、心经；葛根，性甘、辛、凉，归脾胃经；茯苓性甘、辛、凉，归脾胃经；丹参、生蒲黄、葛根和茯苓合用可活血化痰、通血脉、通脉止痛，共为佐药；川芎与石菖蒲合用为使药，使药达病所，活血化痰开窍。全方以补肾为主，治其水，旺肾气，活血化痰，心痛止，既可治标，利血运，痰癖除，又可治本[9,10]。

课题通过制备心衰大鼠，考察临床用益心补肾方治疗心衰的可能机理，探求中医心肾相关理论和对应药物于心力衰竭的理论依据。心衰的心室重塑由复杂的分子和细胞机制致使心肌结构、功能和表型变化。神经内分泌激活、细胞因子活化、细胞信息传导通路改变、基因表达异常以及基因间的作用参与了心室重塑。心肌损伤激活多种内源性的神经内分泌和细胞因子，如去甲肾上腺素、Ang-Ⅱ、ALD和氧自由基，这些因子在循环与组织高度表达，长期慢性地加重心室负荷，增加血液动力学障碍，加快心率和心肌能量消耗，导致心动过速、心肌纤维化、心肌肥厚及心肌细胞凋亡，这些又反馈性激活神经内分泌因子系统，造成恶性循环，促进心力衰竭恶化。益心补肾方可降低心衰大鼠的心率、左心室指数、心脏指数、Ang-Ⅱ和ALD，提示益心补肾汤可降低Ang-Ⅱ和ALD参与降低心室负荷、降低心室重塑，与淫羊藿的总黄酮、女贞子的女贞子苷和红景天苷、丹参中的丹参酮、茯苓中的茯苓酸和芍药中的芍药苷等物质基础有密切关系，与文献结果相似[11-15]。

脑钠肽是具有促进排钠、排尿，具较强的舒张血管作用的利钠肽系统成员，可对抗肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)的缩血管作用。临床通过检测BNP升高的水平反应左室功能异常或血流动力学改变程度，进一步预测心力衰竭的发展程度和预后。本课题中心衰大鼠血清的BNP显著增高，益心补肾汤可显著降低BNP的水平，可见益心补肾可对抗RAAS的缩血管作用[16,17]。

综上所述，益心补肾汤通过降低心衰大鼠的左心室指数、心脏指数、BNP、Ang-Ⅱ和ALD，改善心衰大鼠肺水肿病理而治疗心衰。

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作者简介：

戚亚飞，女，出生于1984年07月29日，浙江杭州人，大学本科学历，药师职称，现工作于杭州市第一人民医院