探讨高灵敏度乙肝HBVDNA检测用于诊断乙型肝炎临床意义与影响

探讨高灵敏度乙肝HBVDNA检测用于诊断乙型肝炎临床意义与影响

明凤谭利高

湖南省宁乡县人民医院检验科410600

【摘要】目的：分析高灵敏度乙肝HBVDNA检测在乙型肝炎临床诊断中的应用意义及影响。方法：入选2014年9月至2015年4月期间在我院确诊为乙型肝炎的39例患者作为研究对象，分别采用免疫荧光定量PCR、高灵敏度乙肝HBVDNA检测对39例患者进行乙肝病毒基因检测，观察两种方法的检测结果。结果：39例患者的免疫荧光定量PCR检测结果显示乙肝HBVDNA阳性率为76.9%，高灵敏度乙肝HBVDNA检测结果显示乙肝HBVDNA阳性率为94.9%，两种检测方法的乙肝HBVDNA阳性检出率比较存在的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：讨高灵敏度乙肝HBVDNA检测具有特异性强、敏感性高的应用优势，在乙型肝炎患者临床诊断中的应用，能够有效提高患者的临床诊断准确率，对患者的临床治疗具有指导意义。

【关键词】乙型肝炎；高灵敏度；HBVDNA；临床意义；影响

HBVDNA（乙肝病毒基因）为乙型肝炎病毒的脱氧核糖核酸，现阶段已被各国临床公认为是判断乙型肝炎病毒感染最直接、特异性最强、敏感性最高的指标[1]。早期我国临床多采用疫荧光定量PCR检测乙肝病毒易感人群的HBVDNA载量，来确定易感人群是否发生感染，但较长一段时间的临床应用发现，该种检测方法对于低病毒载量标本（小于103IU/ml）的阴性检测范围过宽，检测结果缺乏可靠性，假阴性率较高，较易造成误诊[2]。伴随着临床检测技术的不断进步，现阶段我国乙肝HBVDNA的检测也取得了良好的进展[3]。我院近年来开展了高灵敏度乙肝HBVDNA检测，本次研究选取已经确诊为乙型肝炎的39例患者作为研究对象，就该种乙肝HBVDNA检测方法在乙型肝炎患者临床诊断中的应用意义及影响进行了分析，现做出以下整理报告。

1.资料与方法

1.1一般资料

本次研究入选2014年9月至2015年4月期间在我院确诊为乙型肝炎的39例患者作为研究对象。39例患者均具有肝炎活动证据，肝组织血检查结果显示KnodellHAI（组织学活动指数）大于4，动态观察发现有疾病进展症状，Fibroscan检测肝脏弹性值大于9.4kPa。39例患者中，包括男性患者27例，女性患者12例，年龄24~66岁，平均年龄为（45.3±3.5）岁，确诊后均接受相关药物治疗。开展本次研究前，我院研究人员已向研究对象讲解研究目的及方法，研究对象均同意参与本次研究。

1.2研究方法

1.2.1血液标本采集

采集39例患者清晨空腹静脉血10ml，分装两个试管，每个试管各5ml。一支试管用于免疫荧光定量PCR检测，另一支试管用于高灵敏度乙肝HBVDNA检测。

1.2.2乙肝HBVDNA检测

免疫荧光定量PCR检测：PCR检测仪购自德国罗氏公司，PCR扩增仪及试剂盒均购自上海邦奕科技生物有限公司，检测下限设置为500IU/ml。从研究对象的血清中提取乙肝HBVDNA加入反应管，放入扩增仪进行扩增，反应结束后由计算机对反应结果进行自动分析。

高灵敏度乙肝HBVDNA检测：进行该项检测时，使用罗氏授权的国内唯一满足乙型肝炎治疗指南和专家共识的HBVDNA检测试剂COBAS，检测下限按照世界卫生组织（WHO）制定的标准进行设置，具体值为20IU/ml，检测线性范围设置为20~1.7×108IU/ml，线性范围大于1.7×108IU/ml表示高于最高上限，需要对检测标本进行稀释，再次进行检测。检测时严格按照检测仪器及试剂使用说明书进行。

1.3观察指标

本次研究对比免疫荧光定量PCR、高灵敏度乙肝HBVDNA检测乙肝HBVDNA的阳性率。

乙肝HBVDNA阳性判断标准：乙肝HBVDNA拷贝数大于1.0×103copies/ml。

1.4研究数据分析处理

将本次研究过程中得到的符合高斯分布的研究数据进行汇总，使用SPSS18.0版本统计学软件对研究数据进行统计学处理，以率为表达形式的指标采用（%）表示，指标间差异采用卡方（x2）检验，P<0.05表示两者之间存在的差异在统计学上具有显著性。

2.结果

39例患者的免疫荧光定量PCR检测结果显示乙肝HBVDNA阳性率为76.9%，高灵敏度乙肝HBVDNA检测结果显示乙肝HBVDNA阳性率为94.9%，两种检测方法的乙肝HBVDNA检测率比较存在的差异具有统计学意义（P<0.05），具体研究数据及数据统计结果见表1所示。

3.讨论

乙型肝炎患者的乙肝HBVDNA载量变化是判断患者是否可以停药的最主要指标[4]。早期，我国临床上常用的乙肝HBVDNA载量检测方法主要为免疫荧光定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA），这两种检测方法检测乙肝HBVDNA载量时，多将检测下限多设置为500IU/ml，检测值的阴性范围较大，导致一些隐匿性乙型肝炎患者的病情被误判，盲目停药，影响患者疾病治疗效果[5-6]。为进一步提高乙型肝炎患者的临床诊断准确率，对乙型肝炎患者的停药时间做出准确判断，我院近年来应用高灵敏度乙肝HBVDNA检测乙肝病毒易感人群的HBVDNA载量以及评估乙型肝炎患者是否达到用药治疗终点。

本次通过开展临床研究对该种乙肝HBVDNA载量检测方法的检测结果与采用免疫荧光定量PCR检测的结果进行比较，分析该种检测方法在乙型肝炎患者临床诊断中的应用价值。对比两种方法的检测结果发现高灵敏度乙肝HBVDNA检测的阳性率明显高于采用免疫荧光定量PCR检测。本次研究进行高灵敏度乙肝HBVDNA检测时，将检测下限设置为20IU/ml，应用罗氏授权的国内唯一满足乙型肝炎治疗指南和专家共识的HBVDNA检测试剂COBAS检测分析仪进行全自动分析，能够有效降低检测结果的假阴性率，为临床医师判断乙肝病毒感染及患者药物治疗的重点提供较为可靠的参考依据。

本次研究过程中通过采用高灵敏度乙肝HBVDNA检测未能明确诊断结果的患者共2例，2例患者肝表面抗原与免疫荧光定量PCR检测结果均为阴性，但2例患者经临床病理均证实为隐匿性乙型肝炎患者。隐匿性乙型肝炎患者随着病程的延长，其表面抗原也会发生变异，导致S区基因145位密码子甘氨酸被丙氨酸所替代，尽管此种条件下仍能够对表面抗原进行复制，但基因变异的发生会导致表面抗原的抗体亲和力下降，最终导致乙肝HBVDNA检测结果呈阴性，易造成漏诊或误诊[7]。

对本次研究结果进行深入分析，我院认为高灵敏度乙肝HBVDNA检测在乙型肝炎患者临床诊断中的应用具有特异性强、敏感性高的应用优势，能够有效提高乙型肝炎患者的临床诊断准确率。此外，将乙型肝炎患者的高灵敏度乙肝HBVDNA检测结果与其他相关实验室指标的检查结果进行综合分析，对于患者的疾病诊断和临床治疗均具有重要指导价值，值得各大医院开展应用。

参考文献：

[1]马亚丽，张缭云.高灵敏度乙肝HBVDNA检测在乙肝诊疗中的应用及临床意义[J].世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊），2014，11（35）：212-212.

[2]周冬青，刘成永，王春颖等.高灵敏度乙肝HBVDNA检测在乙肝诊疗中的应用及临床意义[J].医学信息（下旬刊），2013，26（15）：221-222.

[3]邢亚斯，邹能利，毛红菊等.基于双纳米金探针杂交法检测HBVDNA[J].高等学校化学学报，2012，33（7）：1420-1425.

[4]张蕾，周玉妮，董景云等.血清HBV-DNA载量、乙肝免疫学标志物定量与老年慢性乙肝患者肝功能的关系[J].中国老年学杂志，2014，9（13）：3563-3564.

[5]蔡兰兰，祝玲玲.乙肝HBVDNA荧光定量检测与乙肝五项及perS1的相关性分析[J].实用预防医学，2014，21（10）：1171-1173.

[6]石之驎，戴炜，曾辉等.血常规、Child-Pugh分级、肝功能、HBV-DNA在HBeAg阴性及阳性乙肝肝硬化患者中的对比分析[J].临床和实验医学杂志，2016，15（10）：984-986.

[7]周佳美，向慧玲，吕洪敏等.预防性抗病毒对TACE治疗的HBVDNA阴性乙肝相关性肝癌的效果[J].天津医药，2013，13（9）：875-877.