盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液生产工艺研究

盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液生产工艺研究

张太伦1冷崇娇2徐洁1陈娟1余春梅1

张太伦1冷崇娇2徐洁1陈娟1余春梅1(通讯作者)

（1西南药业股份有限公司重庆400038；2重庆永川食品药品检验所重庆402160）

【摘要】目的探讨盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液生产中，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）用量、配制时间、氮气加入速度和灭菌后出柜温度等因素对盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液质量的影响，以确定其最佳生产工艺。方法本实验对EDTA-2Na用量、加热时间、氮气加入速度和灭菌后出柜温度进行考察，检查有关物质变化情况。结果根据实验数据的方差分析，得出生产盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的最佳生产工艺条件为：EDTA-2Na用量为：0.03%，氮气的加入速度0.1Pa，配制温度为60℃，灭菌后出柜温度为60℃。结论优化后的盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液生产工艺可行，质量可控，适用于工业化大生产。

【关键词】盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液生产工艺

【中图分类号】R943【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）02-0032-02

左氧氟沙星（Levofloxacin，LVFX）是第三代喹诺酮类抗菌药，其结构为氧氟沙星的左旋光学异构体，其抗菌活性约为氧氟沙星的2倍[1]，不良反应低。对革兰阳性菌及革兰阴性菌均有良好的抗菌活性，在临床应用广泛[2]。盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液(以下简称LVFX-SC注射液)生产过程中，投料温度、活性炭用量、氮气加入速度及加热时间等因素会影响其产品的含量、有关物质、澄明度等质量项目。为了探讨这些因素对盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的质量项目的影响程度，拟用正交试验进行探讨。

1仪器与试药

仪器：Agilent1100高效液相仪（美国安捷伦公司）；751GW分光光度计（上海分析仪器厂）；pHS-3C型精密pH计（上海雷磁仪器厂）；YB-3澄明度检测仪（天津大学精密仪器厂）

试药：盐酸左氧氟沙星（上虞京新药业有限公司，批号：DK20-1104122）；氯化钠（中盐鸿博集团云梦云虹制药有限公司，批号：20110705）；乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na,湖南尔康制药有限公司，批号：20110406）；活性炭（上海活性炭厂有限公司，批号：1154021）。

2方法与结果

2.1LVFX-SC注射液有关物质测定方法的建立

LVFX-SC注射液现行质量标准为国家药品标准[3]，我们参照2010年版药典收载的LVFX原料[4]最新标准进行了LVFX-SC注射液有关物质方法研究。

2.1.1测定波长的确定

取左氧氟沙星对照品和左氧氟沙星杂质A对照品适量，配制成适量浓度的对照品溶液，照紫外-分光光度法，在200-400nm波长范围内扫描，结果左氧氟沙星在293m附近有最大吸收，左氧氟沙星杂质A在239nm附近有最大吸收，确定本品有关物质检测波长为294nm，杂质A的检测波长为238nm。

2.1.2标准曲线的绘制

精密称取左氧氟沙星对照品约20mg置100ml量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解，稀释至刻度。精密吸取1ml用0.1mol/L盐酸溶液稀释制成浓度为4.80μg/ml的溶液，作为贮备溶液。精密吸取贮备液适量，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至成一系列溶液。分别精密吸取上述溶液各10μl，注入液相色谱仪，在294nm波长处分别测定，并以浓度C（μg/ml）为横坐标，峰面积A为纵坐标进行线性回归。结果，左氧氟沙星在0.096～4.80μg/ml浓度范围内，峰面积与浓度成良好的线性关系,相关系数r=0.9998，线性方程为：A=0.3501+54.1281C。

2.1.3杂质A回收率试验

精密称取左氧氟沙星杂质A对照品，按处方比例配制样品溶液3份，按“2.1.5”项下方法操作，计算回收率，结果见表1：

表1杂质A回收率试验结果（n=9）

2.1.4样品有关物质测定

2.1.4.1色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（250mm×4.6mm，5μm）；以醋酸铵高氯酸钠溶液（取醋酸铵4.0g和高氯酸钠7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸调节pH值至2.2）-乙腈（85：15）为流动相A，乙腈为流动相B。按下表进行线性梯度洗脱。柱温：40℃；流速：1.0ml/ml。称取左氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品和杂质E对照品各适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含左氧氟沙星1.2mg、环丙沙星和杂质E各6μg的溶液，作为系统适用性溶液。取10μl注入液相色谱仪，以294nm为检测波长，记录色谱图，左氧氟沙星峰的保留时间大约为15分钟。左氧氟沙星峰与杂质E峰和左氧氟沙星峰与环丙沙星峰的分离度应分别大于2.0和2.5。

2.1.4.2测定法

取本品内容物适量，精密称定，按标示量加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1mL中约含1.2mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取适量，用0.1mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1mL中约含2.4ug溶液，作为对照溶液。另精密称取杂质A对照品约18mg，置100ml量瓶中，加6mol/L氨溶液1ml和水适量使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为杂质A对照品溶液。精密量取供试品溶液、对照溶液和杂质A对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，以294nm和238nm为检测波长，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，杂质A（238nm检测）按外标法以峰面积计算，不得过0.3%。其他单个杂质峰（294nm检测）面积不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍（0.3%），其他各杂质（294nm检测）峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3.5倍（0.7%）。供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.1倍的峰可忽略不计。

2.2LVFX-SC注射液含量测定标准

按现行国家标准[3]方法，精密量取本品适量，用流动相定量稀释成每1ml中约含0.1mg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；取左氧氟沙星对照品适量，精密称定，用0.03mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，精密量取适量，用流动相定量稀释制成1ml中含0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算出供试品中左氧氟沙星的含量。

2.3LVFX-SC注射液颜色测定标准

取本品，加水制成每1ml中含1mg的溶液，照分光光度法在450nm的波长处测定吸收度，不得过0.025。

2.4制备工艺

将加水适量溶解后，再加入，搅拌至完全溶解，加水稀释约至1/2量，加入活性炭煮沸10min，粗滤。LVFX加水适量溶解，与滤液合并，上述测定盐酸左氧氟沙星的含量合格后

2.5活性炭用量考察

取注射用水适量，依次加入氯化钠、EDTA-2Na，搅拌溶解。另取LVFX，溶于饱和氮气的注射用水中，将此溶液缓慢加入搅拌中的上液，溶液中充入氮气，用注射用水将药液稀释约至总量，搅拌均匀后调节pH值至规定范围，再加入注射用水至总量。将溶液分成6份，分别加入0.005%、0.008%、0.01%、0.015%、0.02%、0.03%的活性炭，搅拌15min,通过粗滤，再通过精滤，应用“2.2”方法测LVFX含量，结果见表2。

表2活性炭吸附LVFX含量结果[含量（%）]

2.6正交试验设计

本试验选择EDTA-2Na用量（A）、氮气加入速度(B)、配制温度（C）、灭菌后出柜温度(D)四个因素进行考察，每个因素取四个水平，以盐酸左氧氟沙星含量、有关物质为考察指标，选用L16(45)正交表进行试验，结果详见表3、表4。

2.7数据处理及结果分析

根据生产实践，确定以有关物质、颜色两项加权综合评分（权重比为0.1：1）作为质量评价指标。对试验结果进行方差分析，结果为：各因素对盐酸左氧氟沙星质量的影响程度大小依次为A>D>C>B，即A因素（EDTA-2Na用量）影响最大，其次是灭菌后出柜温度、配制温度、氮气加入速度。考虑到注射液中应尽可能控制辅料的种类及用量，结合产品质量及生产成本，最终确定LVFX-SC注射液的最佳制备工艺条件为：EDTA-2Na用量为：0.03%，氮气的加入速度0.1Pa，配制温度为60℃，灭菌后出柜温度为60℃。

3讨论

3.1在配制LVFX-SC注射液过程中，加入一定量活性炭，可以吸附热源并可提高注射液的澄明度，但同时活性炭对盐酸左氧氟沙星原料有较强的吸附，并且随着活性炭加入量的增加，对盐酸左氧氟沙星的吸附作用也有逐渐增加[5]。为了减少活性炭对主药的吸附，可以考虑改变投料顺序，采用“主药后加法”。陈德海等[6]把主药乳酸左氧氟沙星调到活性炭之后加入，带氯化钠溶解并加入活性炭煮沸15分钟后再投入主药，结果大大减少了活性炭对主药的吸附。

3.2本试验选择含量、有关物质和色泽作为考察指标是可行的，这三个指标能较理想的反映四种因素的影响情况。色泽能直接说明药液的质量，左氧氟沙星高温、光照条件不稳定，配温度过高制及灭菌后不及时降温，可导致药液颜色变深。赵环宇等[7]比较了国产4个厂家的LVFX-SC注射液质量，发现不同厂家LVFX-SC注射液有关物质质量存在差异。丁晓丽等[8]认为LVFX-SC注射液与LVFX口服制剂相比，临床不良反应较高是于LVFX-SC注射液中有关物质所致。因此严格控制LVFX-SC注射液杂志含量非常有意义。

3.3LVFX-SC注射液配置过程中冲氮气，可排出溶液中的氧气，保证药液的稳定性。考虑到药品质量及生产成品等实际因素，氮气的加入速度为0.15较合适。

3.4LVFX-SC注射液质量标准中有关物质项参照2010年版盐酸左氧氟沙星标准，方法科学、准确度高，可有效控制产品质量。

按照以上工艺配置的LVFX-SC注射液经全面质量检查，其含量、PH值、澄明度、颜色、有关物质等项目均符合要求，证明该工艺条件可行。

参考文献

[1]张雷，林艳，李中华，等.复方左氧氟沙星滴眼液的研制及临床应用[J].中国药房，2003，14（6）：34.

[2]王晓霞，梅青，黄维胜.国内左氧氟沙星制剂的开发与临床应用[J].中国药师，2007，10，（3）：279-280.

[3]WS1-(X-121)-2004Z,国家药品监督管理局标准[试行][S].

[4]国家药典委会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.中国医药科技出版社,2010:651.

[5]闫双银.活性炭对盐酸左氧氟沙星注射液生产工艺过程的影响[J].中国药事，2003，17（8）：527-528.

[6]陈德海，邱静林，周仰青.乳酸左氧氟沙星注射液的制备工艺及其质量控制的探讨[J].中国药师，2003，6，（6）：341-343.

[7]赵环宇，王昕,王靓.盐酸左氧氟沙星注射液质量评价[J].中国药事，2007，21，（8）：618-620.

[8]丁晓丽，雷招宝.盐酸左氧氟沙星注射液致过敏性休克51例分析[J]中国药师，2009，12，（10）：1468-1470.