佛山市南海区变态反应性皮肤病患者血清过敏原检测分析

佛山市南海区变态反应性皮肤病患者血清过敏原检测分析

邓健能1叶铭坤2江兰青3

邓健能1叶铭坤2江兰青3（1、2广东省佛山市南海区第二人民医院检验科528200）（3郴州市妇幼保健院检验科423000）

【摘要】目的检测分析佛山市南海地区变态反应性皮肤病患者血清的主要过敏原种类，为临床治疗及患者在防治该病时更具针对性和准确性。方法采用美国ASI公司生产的IVT过敏原体外检测试剂盒（酶联免疫法）对292例变态反应性皮肤病患者血清总IgE和特异性过敏原水平进行检测。结果292例变态反应性皮肤病患者血清总IgE阳性率为93.2%，吸入性过敏原以尘螨类21.17%最高，其后依次是昆虫类20.39%，动物皮毛类17.8%，霉菌类15.38%，花粉类15.06%，花草类10.2%；食入性过敏原以鱼类21.9%最高，其后依次是常见肉类18.8%，蛋类18.12%,奶类12.6%，菇类10.52%，谷物杂粮类4.76%。结论佛山市南海区变态反应性皮肤病患者血清总IgE明显升高，吸入性过敏原主要为尘螨、昆虫类，食入性过敏原以主要为鱼类，两组过敏原以吸入性过敏原占优势，大多数患者两种以上过敏原检测阳性占78%，六种以上阳性为3.6%。

【关键词】变态反应过敏原特异性IgE酶联免疫法

变态反应性皮肤病是一种常见病，过敏原多种多样，病因复杂，往往由于病因不明，易受体内外多种理化因素影响，致使病情反复，迁延不愈，给人们的生活、工作、学习带来极大的影响。本研究对我科2011年度门诊皮肤科292例变态反应性皮肤病患者血清特异过敏原及总IgE进行检测并对结果进行分析，以便患者在防治此类病时更具针对性和准确性。现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1研究对象我院2011年度292例门诊皮肤科病人。

1.2检测方法选用美国ASI公司提供的IVTAllergenScreen（酶联免疫法）检测14项过敏原物质，其分成两类：吸入性：尘螨类，霉菌类，昆虫类，动物皮毛类，花粉类，花草类；食入性：虾蟹及贝壳类，鱼类，蛋类，奶类，菇类，谷物杂粮类，同时检测总IgE。

血清测定方法：抽取患者静脉血3ml,离心分析血清。标本孵育：1.去掉尾端的白色封头和顶端的红盖，让反应管内的缓冲液排出。用纱布拭擦细头。2.将注射器接在反应管的顶端，将标本由细头推到注射器接头处。3.将反应管平放，在室温下（20-30)反应90-100分钟。结合液孵育:4.将标本从反应管排出，抽出注射器的推杆，由注射器针筒向反应管内注入1ml清洗液，将注射器的推杆插入并推到底，用纱布擦拭细头。5.将绿色的结合液由细头抽到注射器的接头处。6.将反应管平放，在室温下（20-30）孵育12-16小时。清洗7.将结合液由反应管排出，抽出注射器的推杆。加五滴清洗液到注射器针筒中，让它流下。再在注射器针筒内注入1ml清洗液，让它流过反应管。将注射器的推杆插入并推到底，用纱布拭擦细头。8.在塑料杯中注入约2ml清洗液。通过反应管将清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推杆，让清洗液流出。9.在注射器针筒内注入1ml清洗液，让它自然流下。重复一次将注射器的推杆插入并推到底，用纱布拭擦细头。加入底物，判断结果10.将黄色的底物通过反应管抽到注射器中。11.平放反应管，标本在30-60分钟观察由黄到紫的颜色变化。

1.3检验结果和解释本试剂盒是一种定性试验，用来检测血清标本中IgE抗体的水平。可以在反应管的反应带看见阳性标本由黄到紫的颜色变化。此试验也可以半定量，因为颜色由黄到紫变化的速度和紫色的强度都和患者血清标本中IgE或免疫球蛋白的滴度成正比。对特殊过敏原的强烈过敏反应，会在5分钟内很快出现较深的紫色。弱的过敏反应出现颜色变化的时间要长。阴性结果的颜色与其两边的隔离带的颜色一样。总IgE反应段在加入底物孵育30分钟后变色，低的IgE水平（<30IU/ml)将会明显出现黄道灰的颜色变化，正常的IgE水平（60+/-30IU/ml）最终出现中等程度的紫色，而增高的IgE水平（>90IU/ml)会出现很深的紫色。出结果的最佳时间是在加入底物后30分钟。在这段时间内，含有来源于针对一种或多种过敏原产生的IgE抗体的血清，无论IgE抗体水平是正常或已升高,都会在任何相应反应部分出现特异性的紫色。抗体水平非常低时，可将显色时间适当延长到60分钟，也会出现结果，只要特异性的反应颜色能和反应管中其它部分非特异性的背景区分即可判断为阳性结果。

2结果

2.1292例变态反应性皮肤病患者，吸入性和食入过敏原检测结果见表1。

2.2292例变态反应性皮肤病患者中同时对几种过敏原呈阳性反应，其阳性率见表2。

3讨论

3.1变态反应性皮肤病是一种常见病，随着环境因素、饮食习惯等发生改变。变态反应性疾病患病率近年有所增加，其病因主要是由于过敏原经吸入或食入等途径进入人体后引起相应特异性IgE类抗体产生，引发变态反应，导致一系列临床症状产生[1]。IgE在该病的发生发展中具有重要作用[2-3]。检测变态反应性皮肤病患者血清中过敏原特异性IgE水平可确认过敏体质，寻找相应过敏原，为变态反应性疾病的预防和治疗提供依据[4]。本研究通过对南海地区292例变态反应性皮肤病患者血清过敏原检测分析，总IgE明显升高阳性率高达93.2%。检出2种以上过敏原阳性率为78%，6种以上阳性率为3.6%,可以看出南海地区大部分患者2种以上过敏原阳性，同时也说明大多数患者可以被多种过敏原致敏[5]。

3.2本次研究还发现，南海地区变态反应性皮肤病患者过敏原以鱼类位居首位，食入性过敏原占的比列大于吸入性过敏原，有关杂志显示变态反应性皮肤病患者过敏原分布具有一定特征[7]。吸入性过敏原以尘螨，昆虫居前两位，可能与其地域气候有关，另城市人口密集，汽车废气污染，室内通气不良，家中被褥灰尘导致尘螨昆虫浓度增加。该过敏体质患者易接触，难以避免，导致比列增加。食入性过敏原第一位的是鱼类。南海地区位于珠江三角洲腹地，海产品易得，人们喜食鱼类并喜食鱼生，为过敏体质的患者接触过敏原提供了条件。食物过敏原与地理位置，饮食习惯有明显关系[6]。

3.3IVT体外过敏原检测操作简便，结果准确[8]。ELISA可以帮助临床合理寻找相应过敏原[9]。及时得到致敏食物从患者食谱中排除，减低患者食物过敏原的患病率，缓解临床症状[10]。

参考文献

[1]王玉琼，李兰娜.150例变态反应性疾病过敏原检测分析[1].广东医学，2003，24（5）：503.

[2]陈琳，贾战生，林永信.血清IgE水平检测及变应原皮试诊断I型变态反应疾病的意义[期刊论文]-第四军医大学学报2001（04）.

[3]王毅侠，张红，李鸿.121例变应性皮肤病患者血清IgE检测分析[期刊论文]-中国皮肤性病学杂志2002（02）.

[4]喻楠，王建军，张晓鸣等.1844例变态反应性皮肤病血清过敏原特异性IgE抗体分析-宁夏学院学报2006，28（5）.

[5]丁红梅，王学谦，赵俊芳食物过敏原特异性检测方法的建立及临床初步应用[期刊论文]-中华医学检验杂志2008（11).

[6]HerzumI;BlumerN;KerstenWDiagnosticandanalyticalperformanceofascreeningpanelforallergy[外文期刊]2005（09）.

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[8]张利，张宗玲.IVT过敏原体外检测在哮喘诊断中的应用[J],四川医学，2004，25（7）：736.

[9]杨捷，曾仁山，方锐华等.2333例变应性皮肤病患者血清过敏原检测分析-国际医药卫生导报2006，12(6).

[10]刘建欣.变态反应性皮肤病食物变应原特异性检测的临床研究.2008.