孙来芬朱瑞敏(黑龙江省鹤岗市人民医院154101)
【关键词】微生物检验肠杆菌
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)34-0205-02
肠杆菌科除上述主要对人致病的菌属外,还有克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属等,为条件致病菌,在临床上感染性疾病中较常见。
1克雷伯菌属
克雷伯菌属主要包括肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌等,为条件致病菌,临床上感染性疾病中以肺炎克雷伯菌多见。肺炎克雷伯菌包括肺炎亚种、臭鼻亚种和鼻硬结亚种。
1.1微生物学检验:克雷伯菌检验程序可按肠杆菌科细菌进行检验。据不同疾病采集不同标本,如血液、痰、脓汁、尿液、脑脊液、胸水和腹水等。取痰、脓汁、尿液、脑脊液、胸水、腹水标本,离心后将沉淀物涂片做革兰染色镜检,可见革兰阴性球杆菌,有明显的荚膜。血液标本或穿刺液标本接种于肉汤培养基增菌培养,其他标本接种于血平板和MAC平板。35℃孵育18~24h,取血平板上灰白色大而黏稠的菌落和MAC上乳糖不发酵型黏液菌落,作进一步鉴定。菌落性状、形态染色特性符合克雷伯菌的特点,氧化酶阴性、硝酸盐还原阳性,在KIA试验斜面产酸、底层产酸产气、H2S阴性,MIU试验为--+/-,V-P试验为阳性,可初步鉴定为克雷伯菌。然后可进一步进行生化反应鉴定到种和亚种,并结合荚膜肿胀试验进行鉴别。
1.2生物学性状:形态与染色:克雷伯菌为革兰阴性杆菌,卵圆形或球杆状,常成双排列,有菌毛;无芽胞,无鞭毛。有明显的荚膜,荚膜肿胀试验是本属菌与其他类似菌的主要鉴别方法;培养特性:克雷伯菌兼性厌氧,营养要求不高,在血平板上形成较大凸起、灰白色、不透明、不溶血、黏液型菌落,用接种环挑起时可出现拉丝现象。在肠道选择培养基上,可发酵乳糖产酸,形成较大的有色黏稠菌落。在液体培养基中呈混浊型生长,可见菌膜和黏性沉淀物。生化反应:克雷伯菌IMViC试验结果为--++,脲酶、ONPG、丙二酸盐、黏质酸盐试验呈阳性。
1.3临床意义克雷伯菌是医院感染中常见的条件致病菌,以肺炎克雷伯菌感染较多见。肺炎克雷伯菌可引起典型的原发性肺炎,也可引起肺外感染,如肠炎、婴儿脑膜炎、菌血症、泌尿系统感染等。其中臭鼻亚种可引起臭鼻症和鼻黏膜化脓性感染。鼻硬结亚种可引起呼吸道黏膜、口咽部、鼻和鼻窦等部位感染,导致肉芽肿病变和硬结形成。产酸克雷伯菌可引起人体各部位感染。
2肠杆菌属
肠杆菌属主要分布于自然界,偶见于人和动物肠道,为条件致病菌;临床上常见的有产气肠杆菌、阴沟肠杆菌和阪崎肠杆菌。
2.1微生物学检验:肠杆菌的基本鉴定特征:镜检为革兰阴性粗短杆菌;氧化酶试验阴性,硝酸盐还原试验阳性;KIA试验斜面产酸、底层产酸产气、H2S阴性,MIU试验为+--/+;鸟氨酸脱羧酶试验阳性。可根据更多生化反应鉴定到属和种;鉴别要点:通过鸟氨酸脱羧酶试验和动力试验与肺炎克雷伯菌鉴别,肺炎克雷伯菌均为阴性,而肠杆菌则为阳性。通过IMViC试验与大肠埃希菌鉴别,大肠埃希菌为++--,肠杆菌则为--++。
2.2生物学性状:形态与染色:肠杆菌为革兰阴性粗短杆菌,有周鞭毛,部分菌株有荚膜,无芽胞;培养特性:肠杆菌兼性厌氧,营养要求不高,在营养琼脂和血平板上形成大而湿润的黏液型菌落,在肠道选择培养基上为乳糖发酵型菌落,在液体培养基中可见菌膜和黏性沉淀物;生化反应:肠杆菌IMViC试验结果为--++,鸟氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶试验阳性,赖氨酸脱羧酶试验阴性。
2.3临床意义:肠杆菌广泛分布于自然界,为肠道正常菌群,是医院感染常见的病原菌之一。临床上分离的肠杆菌中最常见的阴沟肠杆菌和产气肠杆菌,可引起尿路感染、呼吸道感染、伤口感染等肠道外感染。阪崎肠杆菌可引起新生儿脑膜炎和败血症,死亡率较高。
3沙雷菌属
沙雷菌属广泛分布于自然界,包括黏质沙雷菌等10余种。临床上感染性疾病中以黏质沙雷菌最为常见。
3.1微生物学检验沙雷菌的特征是酯酶、明胶酶和DNA酶试验均呈阳性。利用更多的生化反应可鉴定到种。
3.2生物学性状:形态与染色:沙雷菌为革兰阴性小杆菌,有周鞭毛,无芽胞,除气味沙雷菌有微荚膜,其余菌种无荚膜。黏质沙雷菌是最小的细菌,常用于检查滤菌器的除菌效果;培养特性:沙雷菌兼性厌氧,营养要求不高,在营养琼脂上可形成不透明,白色、红色、粉红色大菌落。所产色素包括非水溶性灵红素和水溶性吡咯羧酸;生化反应:沙雷菌IMViC试验结果为--++,发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇,不发酵乳糖,ONPG、DNA酶、酯酶、明胶酶、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶试验均阳性。
3.3临床意义沙雷菌具有侵袭性和多重耐药性,已成为重要病原菌。黏质沙雷菌主要引起肠道外感染,与医院感染的暴发流行有关,可致肺炎、败血症、泌尿道感染、输血和外科感染。气味沙雷菌与医院感染败血症有关,普城沙雷菌可致社区感染。
参考文献
[1]翁连海主编,食品微生物基础高职教材,北京:高等教育出版社,2005.4
[2]黄秀梨主编.微生物学北京:高等教育出版社,1998