艾迪注射液对原发性肝癌患者肿瘤组织MMPsTIMPs表达的影响

艾迪注射液对原发性肝癌患者肿瘤组织MMPsTIMPs表达的影响

郭良苏

郭良苏

(巨野县中医院274900)

【摘要】目的探讨艾迪注射液对原发性肝癌疗效及对肿瘤组织MMPs和TIMPs表达的影响。方法70例患者按照计算机产生的随机数字1:1随机分为2组，分别采用一般常规治疗和艾迪注射液联合常规治疗，比较两组疗效并对治疗前后两组肿瘤组织MMPs和TIMPs表达进行分析。结果观察组有效率77.14%，对照组有效率60.00%，两组有效率比较差异有统计意义(Ridit=11.475，P=0.000)，观察组疗效优于对照；治疗后，两组患者MMPs和TIMPs均明显好转，与治疗前相比差异具有统计学意义(P<0.05)，MMP-2、MMP-9、TIMP-1观察组均优于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，TIMP-2两组差异并无统计学意义(P>0.05)。结论艾迪注射液能够抑制癌细胞的生长，对原发性肝癌具有明显疗效，其抑制机理可能是通过影响MMPs和TIMPs蛋白表达实现的。

【关键词】艾迪注射液肝癌基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制物

【中图分类号】R730【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）17-0008-02

原发性肝癌为我国常见恶性肿瘤，病死率较高[1]。目前本病仍以手术切除、术后进行化学治疗为首选，但复发率高[2]。流行病学调查显示[3]，术后复发率可达50%左右。艾迪注射液由斑蝥、黄芪、人参、刺五加等中药材为主要成分，具有扶正祛邪、消结散瘀、匡扶正气、标本兼治的作用，目前，已在肝癌、肺癌、结肠癌等多种恶性肿瘤的治疗中证明有明显的治疗效果[4,5]。本研究通过对原发性肝癌患者肿瘤组织基质金属蛋白酶(MMPs)、基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)表达的影响，进一步探讨艾迪注射液抑癌作用机制，从而为发挥传统医药优势、提高恶性肿瘤患者生活质量提高新的思路。

1资料与方法

1.1一般资料

本研究完全符合伦理学标准，符合赫尔辛基宣言，由我院伦理委员会审核批准进行。患者为我院收治的原发性肝癌患者，符合原发性肝癌诊断标准，CT和B超检查肝部有肿块，具有明确的病理学证据，影像学诊断肝内实质性病变，AFP检测>400μg/l；排除活动性肝病、转移性肝癌、肝血管癌及妊娠等。患者心、肝、肾、肺功能正常，预计生存期3个月以上。所有患者均了解本研究可能的风险及收益，自愿参加本研究并书面签署同意书。

研究中共收集患者70例。其中男性46例，女性24例，将观察对象按照入院顺序，由计算机随机1:1分为2组，每组35例。两组患者年龄、性别、AFP等各方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，资料具有良好的可比性。

1.2治疗方法

对照组采用肝动脉栓塞术，以Selding法穿刺股动脉，使导管插入肝固有动脉、左右肝动脉直至病变动脉分支，先注入DDP60mg，5-Fu1000mg，然后以生理盐水将MMC溶解，与碘油混合或用吡柔比星与碘油混合后栓塞，4周后重复化疗栓塞，共持续3-5次；观察组栓塞后给予艾迪注射液，以70ml+5%生理盐水静脉滴注，连续4周为一疗程，连续治疗2个疗程以上。

1.3检测指标

将两组患者治疗前后肿瘤组织进行病理检查，在无菌条件下，将新鲜组织含10%胎牛血清的PRMI1640制成106个/ml细胞培养液备用。ELISA法检测培养细胞中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的表达(胎牛血清、RPMI1640来自美国Sigma公司，MMPs、TIMPs检测试剂来自德国Oncogene公司)。按说明书进行操作。

1.4疗效评价

参考WHO标准，将疗效分为4个等级。完全缓解(completeresponse,CR)、部分缓解(partialresponse,PR)、稳定(stabledisease,SD)和恶化(progressivedisease,PD)。以(CR+PR)/总例数×100%计算总有效率。

1.5统计学分析

本研究所获数据均经过主治大夫、研究人员、和核查人员三级确认，数据均以双录入方式录入到EpiData软件中进行比对，以SPSS19.0软件进行分析。计量资料以(x-±s)表示，组间比较方差齐时行t检验，方差不齐选择校正的t检验。计数资料按实际发生数表示，Ridit分析、χ2检验进行比较。以P<0.05为有统计学意义。

2结果

2.1两组患者一般情况比较

两组患者在年龄、性别、APF、Karnofsky评分及肝功能等各方面差异无统计学意义(P>0.05)，具有良好的可比性。见表1。

表1两组患者基线资料比较

2.2两组患者疗效比较

观察组有效率77.14%，对照组有效率60.00%，两组有效率比较差异有统计意义(Ridit=11.475，P=0.000)，观察组疗效优于对照。见表2。

表2两组患者临床疗效比较

组别nCRPRSDPD有效率(%)

对照组3511108660.00

观察组3515125377.14

2.3治疗前后两组患者MMPs和TIMPs比较

治疗前两组患者在MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2上差异均无统计学意义(P>0.05)，治疗后，两组患者MMPs和TIMPs均明显好转，与治疗前相比差异具有统计学意义(P<0.05)，MMP-2、MMP-9、TIMP-1观察组均优于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，TIMP-2两组差异并无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3治疗前后两组患者MMPs和TIMPs比较(x-±s)

组别MMP-2(ng/ml)MMP-9(ng/ml)TIMP-1(ng/ml)TIMP-2(ng/ml)

观察组治疗前2.50±1.350.16±0.0536.21±19.6257.15±26.95

治疗后1.15±0.310.06±0.0186.24±33.12141.26±16.95

对照组治疗前2.44±1.210.18±0.1139.54±26.1452.14±15.78

治疗后1.56±0.480.13±0.4751.14±16.52151.24±41.26

3讨论

目前已有研究证明[6]，在原发性肝癌患者中MMP-2、MMP-9含量高于正常，TIMP-1、TIMP-2含量低于正常。其中，MMP-2可以降解弹性硬蛋白、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、型胶原、变性的Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白等多种构成基底膜的材料。MMP-9在MMPs家族中分子量最大，它可以降解细胞外基质蛋白，使肝脏肿瘤产生环境发生改变，对肿瘤的生长起到明显促进作用[7]。Pandas[8]认为，MMPs不但可以降解细胞外基质和基底膜，而且参与肿瘤新生血管形成，并参与肿瘤抗凋亡过程，机体MMPs活性增加时，肿瘤发生、侵袭和转移发生率高。

PattYZ等[9]对细胞外基质进行细胞培养则证明，MMP-2和TIMP-2之间存在一定对应关系，细胞膜上MMP-2和TIMP-2氨基酸参加激活后，可与pro-MMP-2和TIMP-2羧基端结合，使pro-MMP-2诱饵蛋白激活，促使MMP-2解离，对Ⅰ型胶原及其他细胞外基质成分产生水解作用，从而发挥生物学作用。张俊华等[10]对原发性大肠癌患者进行治疗后认为，治疗后患者TIMP-1和TIMP-2mRNA与对照相比明显升高，进一步说明艾迪注射液能够影响TIMPs的表达，进而抑制MMPs表达。

本次研究结果显示，艾迪注射液对原发性肝癌具有显著疗效(Ridit=11.475，P=0.000)，这与国内外其他学者研究结果基本一致[11,12]。同时，观察组患者MMPs水平明显降低(P<0.05)，虽然TIMP-2水平变化并不显著(P>0.05)，但TIMP-1水平增加明显(P<0.05)。目前关于艾迪注射液对MMPs和TIMPs影响研究较少，我们并未找到特别针对性的文献。但仍可以推测，艾迪注射液可以影响TIMP-1水平，改善机体MMPs表达，降低MMPs活性，减少细胞外基质降解，抑制新生血管形成，维持细胞外基质(ECM)稳定性，保持周围组织及血管的完整性，从而起到减轻肿瘤症状，延缓生存期的目的[13]。

APF为目前临床最常用肝癌标志物，对肝癌患者的诊断灵敏度和特异度均在70%以上[14]，故本研究中对所收集患者随机分组后，以AFP为指标进行基线分析，另外考虑治疗的需求，以卡氏评分作为生存质量的评价[15]，并以ALT作为肝功能评价指标，多个指标联合应用，保证了两组资料的整齐可比，使研究结果更具有说服力。本研究进一步肯定了艾迪注射液对原发性肝癌的治疗效果，同时认为，其主要抑制机理可能是通过影响MMPs和TIMPs蛋白表达实现的。由于本研究仅涉及治疗前后MMPs和TIMPs变化，对整个治疗过程中其他生物标志物的变化并未涉及，所获结论证据链条尚未完善，期待其他同行进一步研究确认。

参考文献

[1]朱介宾，肖亦明，孔宪和，等.肝动脉栓塞术联合艾迪注射液与替比夫定治疗晚期原发性肝癌50例[J].医药导报，2012，31(1)：25-28.

[2]曾江正，苏群豪，洪涛，等.艾迪注射液联合化疗对中晚期NSCLC患者外周血肿瘤细胞CK19-mRNA表达的影响[J].山东医药，2009，49(5)：19-21.

[3]赵亚娟，李青山，刘兰芳，等.艾迪注射液对肺癌放疗患者细胞因子表达的影响[J].中国实验方剂学杂志，2013,19(8)：323-325.

[4]HasegawaK,TakayamaT,IjichiM,etal.Uracil-tegafurasanadjuvantforhepatocellularcarcinoma:arandomizedtrial[J].Hepatdogy,2013,44(14):891-895.

[5]马文华，段开楠，冯敏，等.艾迪注射液治疗非小细胞肺癌系统评价[J].中西医结合学报，2009,7(4)：315-317.

[6]BenundC,RobertB,ErikW,etal.Rolesmatrixmetalloproteinasesinmammaryglanddevelopmentandcancer[J].BreastCancerTreat,2011,35(2):97-106.

[7]胡延辉，李瑾，许志平.艾迪注射液对胃癌患者术后细胞免疫功能的影响[J].中国全科医学，2009,12(2)：231-233.

[8]PandasAM,KnauperV,PuentsXS,etal.Identificationandcharacterizationofanovelhumanmatrimetalloprotinaseswithuniquestructuralcharacteristics,romoallation,andtissuedistributionj].JBiolChem,2009,272(7):4287-4293.

[9]PattYZ,HassanMM,AguayoA,etal.Oralcapecitabineforthetreatmentofhepatocellularcarcinoma,cholangiocarcinomaandgallbladdercarcinoma[J].Cancer,2012,101(3):578-589.

[10]张俊华，张银旭，左滕，等.艾迪注射液对大肠癌细胞的生长抑制作用观察及相关机制探讨[J].山东医药，2011,51(50)：46-48.

[11]李涛，王涛，张锡鹏.艾迪注射液对结肠癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对COX-2、VEGF、MMP-9蛋白表达的影响[J].中国老年学杂志，2013，3(16)：3911-3912.

[12]LichtinghagenR,MusholtPB,LeinM,etal.DifferentmRNAandproteinexpressionofmatrixmetalloproteinases2and9andtissueinhibitorofmetalloproteinase1inbenignandmalignantprostatetissue[J].EuropeanUrology,2013,42(4):398-404.

[13]张明.艾迪注射液联合FOLFOX4方案治疗结肠癌临床观察[J].中国肿瘤临床与康复，2009，16(2)：170-174.

[14]赵敏星，倪润洲，肖明兵，等.HS-AFP、GGT-2及APF预测肝硬化癌变的临床价值[J].中国肿瘤临床，2009，36(11):6601-603.

[15]StillK,RobsonCN,AutzenP,etal.LocalizationandquantificationofmRNAformatrixmetalloproteinase-2(MMP-2)andtissueinhibitorofmetalloproteinase-2(TIMP-2)inhumanbenignandmalignantprostatictissue[J].Prostate,2010,45(1):18-25.