偶氮胭脂红染色在分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤诊断中的应用价值

偶氮胭脂红染色在分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤诊断中的应用价值

寻英秦映芬(通讯作者)梁杏欢周嘉曹永成李

寻英秦映芬(通讯作者)梁杏欢周嘉曹永成李励冼晶

(广西医科大学第一附属医院内分泌科广西南宁530021)

【摘要】目的：探讨偶氮胭脂红染色在分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤诊断中的应用价值。方法：对3例分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤标本进行偶氮胭脂红染色、HE染色、免疫组化染色。结果：HE染色、免疫组化染色未能确诊Leydig细胞，偶氮胭脂红染色示Reinke结晶阴性。

【关键词】偶氮胭脂红肾上腺肿瘤Leydig细胞

【中图分类号】R730.4【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）15-0315-01

分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤临床罕见，其发病机制尚不明确。截至2010年，全球一共报道5例单纯分泌睾酮肾上腺皮质肿瘤患者肿瘤组织中发现Leydig细胞瘤特异的Reinke结晶[1]。近年来，经偶氮胭脂红染色法显示Reinke结晶，应用于确诊睾丸间质细胞瘤(Leydigcelltumor，又即Leydig细胞瘤)，时有报道。为明确本组标本中是否存在Reinke结晶，本研究将该技术首次应用于分泌雄激素肾上腺皮质肿瘤，现报道如下。

1资料和方法

1.1病例资料例1女性，38岁，已婚育。因反复左下腹痛半年，体检B超发现肾上腺占位入院。实验室检查:尿17-OH11.6mg/24h，尿17-KS17.7mg/24h。T1.92ug/L。例2、例3均为女性，年龄分别为6岁和17岁。均有明显多毛，痤疮，嗓音增粗，肌肉发达，阴毛菱形分布，阴蒂肥大等男性化表现。实验室检查:例2T2.58ug/L，尿17-OH9.2mg/24h，17-KS10.6mg/24h。例3T3.4ug/L，尿17-OH9.4mg/24h，17-KS35.7mg/24h。中剂量地塞米松抑制试验睾酮均不被抑制。上述3例B超及CT均示：左肾上腺肿瘤。例1经腹直肌旁切口行左肾上腺肿瘤切除术，例2、例3均经后腹腔镜行左肾上腺肿瘤切除术，术后复查睾酮均恢复正常，其中例1T：0.42ug/L，例2T0.01ug/L，例3T0.55ug/L。

1.2实验方法：标本经4%中性甲醛固定，取材脱水，石蜡包埋，4um切片3张。常规脱蜡至水，分别行HE染色、免疫组化(inhibin-α，抑制素α)、偶氮胭脂红染色，光镜下观察。

1.3偶氮胭脂红染色

1.3.1染液的配制：偶氮胭脂红B溶液：偶氮胭脂红B0.5g，冰醋酸1mL，加蒸馏水至100mL，过滤备用。苯胺蓝-橙黄G-醋酸溶液：苯胺蓝0.5g，橙黄G2g，冰醋酸8ml，加95%乙醇至100mL，加温溶解，冷却后过滤备用。用前以95%乙醇

2结果

2.1大体检查：例1切除左侧肾上腺组织，约8cm×8cm大小肿瘤，包膜完整，未见明显粘连，组织剖面呈金黄色分叶状。例2切除左侧肾上腺组织，约3.2cm×3cm×2cm大小，瘤体与肾周围脂肪粘连，切面颗粒状，质脆。例3切除左侧肾上腺组织，5cm×6cm×5cm类圆形肿瘤，界限清楚，包膜完整，表面光滑，剖面呈鱼肉样，内见出血坏死。

3讨论

Reinke结晶主要存在于性索间质细胞瘤，在男性见于睾丸间质细胞瘤，女性则多见于卵巢间质-Leydig细胞瘤。报道的分泌睾酮肾上腺皮质肿瘤组织中发现Reinke结晶提示，此类肿瘤细胞发生发展过程中，有分化为Leydig细胞的可能。Leydig细胞是否与该类肿瘤的发生机制有关，同时，基于肾上腺与性腺有共同胚胎起源，肾上腺皮质细胞本身是否可以产生Reinke结晶，这些问题同样引起我们的关注。

国外5例报道中，发现结晶的方法各异，电镜、HE染色之外，尚有Massontrichrome染色、Mallory染色、免疫过氧化酶染色，因报告的病例数极少,且上述特殊染色法在性索间质细胞瘤的诊断中罕有应用，故本组未予采纳。光镜下，结晶体多数位于胞质内，少数出现在细胞核与间质组织中。作为确诊Leydig细胞瘤的重要依据，其检出目前尚无统一技术标准。常规HE染色后，结晶经伊红着色，难于鉴别。抑制素是Leydig细胞分泌的一种糖蛋白，在许多性索间质肿瘤中表达。近年来，有研究发现其同时也在肾上腺皮质的网状带及束状带内层呈弥漫性高表达。且不同阳性强度对判断正常、增生、肿瘤性组织有一定价值。但单纯inhibin-α阳性，尚不足以确诊肾上腺Leydig细胞。

参考文献

[1]AlamMM,RahmanMA,NaserMF,etal.Testosteronesecretingadrenaladenomainanadultfemalepatient[J].MymensinghMedicalJournal,2010,19(4):632.

[2]曹永成,刘晓红,钟平,等.改良Heidenhain偶氮胭脂红染色显示Reinke结晶的应用[J].临床与实验病理学杂志,2009,25(5):563-563.

[3]PollockWJ,McConnellCF,HiltonC,etal.VirilizingLeydigcelladenomaofadrenalgland[J].TheAmericanJournalofSurgicalPathology,1986,10(11):816-822.