人肺腺癌移植瘤模型的建立及生物学特性的研究

(整期优先)网络出版时间:2012-12-22
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人肺腺癌移植瘤模型的建立及生物学特性的研究

王艳俊程万宏

王艳俊程万宏(辽宁省大连大学附属新华医院胸外科辽宁大连116003)

【中图分类号】R734.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)51-0048-01

【摘要】目的探讨SCID小鼠人肺腺癌移植瘤模型的建立及其生物学特性。方法将人肺腺癌细胞系A2细胞移植于SCID小鼠皮下,用其瘤块传代至转移率为95%以上,共6代。采用光镜、MTT等手段对各代移植瘤的形态特征、移植瘤的增殖、侵袭和转移等生物学特性进行研究。结果移植瘤的形态学特点与原始细胞系完全一致,而原代与晚代移植瘤之间的比较,显示进一步恶化的特征。

【关键词】人肺腺癌细胞系A2移植瘤

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。近年来,虽然现在肺癌的防治方面取得了很大进展,但是肺癌患者的长期生存率并没有得到明显的提高。因此寻求效果更佳的策略和方案一直是肺癌预防与治疗学研究的重要课题。近年来肿瘤免疫和基因治疗发展迅速,肺癌转移瘤动物模型的制作也成为热点[1]。

1材料与方法

1.1材料

SCID小鼠购自中国医科大学实验动物中心,A2细胞株为中国医科大学肿瘤研究室保存。

1.2方法

1.2.1SCID小鼠人肺腺癌移植瘤模型的建立。

取1×106肺腺癌A2细胞,培养24h后分别注射于SCID小鼠皮下。注射当天为0天,每隔1天观察1次肿瘤生长情况。取移植瘤组织,将其剪碎,经胰酶消化后,300目尼龙网过滤,离心,以PBS调整细胞数为1×106分别注射于SCID小鼠皮下。传代至转移率为95%以上。

1.2.2光镜各代移植瘤的形态特征,侵袭和转移等生物学特性。

1.2.3MTT法检测各代移植瘤的增殖。

2结果

2.1A2细胞悬液皮下移植瘤,接种20只,仅6只成瘤,成瘤率30.0%。用其瘤块传代,至第6代,成瘤率95.0%。

2.2光镜各代移植瘤的形态特征,转移瘤细胞与A2细胞株形态完全一致。

2.3MTT法检测各代移植瘤的增殖,发现肿瘤细胞增殖逐渐增强。

3讨论

免疫缺陷动物建立的动物模型是研究基因和生物治疗恶性肿瘤的重要手段。本实验以癌细胞悬液的接种方式[2],通过转移瘤细胞传代,得到较高的成瘤率,及稳定的实验动物模型。光镜观察各代移植瘤的形态特征,发现转移瘤细胞与A2细胞株形态完全一致,而传代后形成稳定成瘤率的转移瘤灶与原代A2细胞株转移瘤灶比较,侵袭力增强,病灶周围微小瘤结节数量明显增加,显示出了更高的恶性度。提示高转移、侵袭力亚克隆细胞亚群可能存在基因变化[3]。MTT法检测各代移植瘤的增殖,发现肿瘤细胞增殖逐渐增强,亦提供佐证。为进一步研究,打下基础。

参考文献

[1]IsaiahJ,Fidler.Criticalfactorsinthebiologyofhumancancermetastasis:Twenty-eighthGHAclowesmemorialawardlecture.CancerRes,1990;50:6130~6138.

[2]FuX,JeffreeyM,BestermanAetal.Modelofhumancoloncancerinnudemiceorthotopicallyconstructedbyusinghistologicallyintactpatientspecimens.ProcAcadSciUSA,1991;88:9345~9349.

[3]Tsong-HongK,TetsuroK,MasaillkoWetal.Livercolonizationcompetencegovernscoloncancermetastasis.ProcNatlAcadSciUSA,1995;92:12085~12089.

基金项目:本课题为大连市卫生局基金