逍遥竹质量标准的研究探讨

逍遥竹质量标准的研究探讨

尚晓艳宋军李莉

荆门市食品药品质量检验所448000

逍遥竹

Xiaoyaozhu

CYNANCHIPANICULATIHERBA

【来源】本品为萝藦科植物徐长卿Cynanchumpaniculatum(Bge．)Kitag．的干燥带根全草。夏秋季采挖，除去杂质，扎成小把，阴干。

【性状】本品根茎短，须根多，呈不规则柱状，有盘节，直径2～4mm。根簇生于根茎节处，呈细长圆柱形，弯曲，长10～16cm，直径1～2mm；表面淡黄白色至淡棕黄色或棕色，具微细的纵皱纹，并有纤细的须根。茎单一或少有分枝，长20～60cm，直径1～2mm；表面淡黄绿色，基部略带淡色，具细纵纹或毛。叶对生，纸质，叶片扭曲，易破碎，完整者长披针形或条形，具短柄或近于无柄，长8～10厘米，宽4～5毫米，先端渐尖，基部渐狭，全缘，有细缘毛，背面无毛，中脉隆起。有时带伞形状总状花序，苞片甚小，披针形。气香，味微辛凉。

【鉴别】(1)本品根横切面：表皮细胞1列，外壁增厚。皮层宽广，约占根的2／3，细胞中含淀粉粒及草酸钙簇晶，内皮层明显。韧皮部狭窄，形成层不明显。木质部导管、纤维及管胞均木化。

茎横切面：表皮外被角质层。皮层最外1列细胞壁切向增厚。中柱鞘纤维断续排列成环。维管束双韧型，韧皮部细胞多皱缩，木质部细胞均木化，导管向内渐大。髓部中央形成空腔。

叶横切面：叶肉组织中栅栏细胞1列，海绵组织中有草酸钙簇晶。主脉可见双韧型维管束，上下表皮为厚壁组织，薄壁细胞中有草酸钙簇晶散在。

（2）取本品粉末1g，加乙醚10ml，密塞，振摇10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％的三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。

【检查】杂质不得过3％(中国药典2015年版四部通则2301）。

水分不得过15.0％(中国药典2015年版四部通则0832第四法)。

总灰分不得过15.0％(中国药典2015年版四部通则2302)。

【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(中国药典2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于10.0％。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(45:55)为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取丹皮酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含丹皮酚(C9H10O3)不得少于0.60％。

【炮制】除去杂质，洗净，沥干，切段，阴干。

本品呈段状。茎细圆柱形，表面淡黄绿色，具细纵纹，无毛；质稍脆，折断面纤维性、中空。叶对生，多破碎，淡黄绿色。根茎有盘节。根表面淡黄白色至黄棕色，具微细的纵皱纹，并有纤细的须根。质脆，易折断，断面粉性，皮部类白色或黄白色，形成层环淡棕色，木部细小，黄色。气香，味微辛凉。

【鉴别】【检查】（杂质、水分）【浸出物】【含量测定】同药材。

【检查】（总灰分）同药材不得过14.0％。

【性味与归经】辛，温。归肝、胃经。

【功能与主治】活血止痛，消肿解毒，祛风通络。用于风湿痹痛，跌打肿痛，胃痛，牙痛，毒蛇咬伤，风湿皮炎，荨麻疹，牛皮癣，神经性皮炎。

【用法与用量】9～15g，入煎剂宜后下。

【贮藏】置阴凉干燥处。

逍遥竹（药材）质量标准草案起草说明

【名称】逍遥竹

【别名】鬼督邮、石下长卿、别仙踪、料刁竹、钓鱼竿、徐长卿、一支箭、英雄草、料吊、土细辛、九头狮子草、竹叶细辛、铃柴胡、生竹、一枝香、牙蛀消、线香草、小对叶草、对月草、天竹、溪柳、蛇草、瑶山竹、黑薇、蜈蚣草、铜锣草、山吊竹、蛇利草、药王、对叶莲、上天梯、老君须、香摇边、摇竹消、摇边竹、三百跟、寮刁竹、千云竹、痢止草

【概述】本品各地区均有分布。生长在海拔1000米以下的山坡或路边草丛中。主产于恩施、巴东、荆门、广济、红安、麻城、孝感、黄冈、安陆、宜昌、黄梅等地。

【来源】本品原植物来源为萝藦科植物徐长卿Cynanchumpaniculatum(Bge．)Kitag．的干燥带根全草。

多年生草本，高约65cm。根茎短，须状根多数。茎细，刚直，节间长。叶对生，披针形至线形，长约5~14cm，宽约2~8mm，先端尖，全缘，边缘稍外反，有缘毛，基部渐狭，下面中脉隆起。圆锥花序顶生于腋下，总花柄多分枝，花梗细柔，花多数；花萼5深裂，卵状披针形；花冠5深裂，广卵形，平展或下反，黄绿色；副花冠5枚，黄色，肉质，肾形，基部与雄蕊合生；雄蕊5，连成筒状，药2室；雄蕊1，子房上位，由2个离生心皮组成，花柱2，柱头合生。蓇葖果角状。种子顶端着生多数银白色绒毛。花期6~7月。果期9~10月。

野生于山坡或路旁。全国大部分地区均有分布。

【性状】根据五批干燥药材观察，各批次的特征基本一致，然后对外观形状、大小、色泽、质地、断面与气味等进行描述。

【鉴别】(1)本品根横切面，徒手切片进行观察，描述和绘图：表皮细胞1列，外壁增厚。皮层宽广，约占根的2／3，细胞中含淀粉粒及草酸钙簇晶，内皮层明显。韧皮部狭窄，形成层不明显。木质部导管、纤维及管胞均木化。

本品茎横切面，徒手切片进行观察，描述和绘图：表皮外被角质层。皮层最外1列细胞壁切向增厚。中柱鞘纤维断续排列成环。维管束双韧型，韧皮部细胞多皱缩，木质部细胞均木化，导管向内渐大。髓部中央形成空腔。

本品叶横切面，徒手切片进行观察，描述和绘图：叶肉组织中栅栏细胞1列，海绵组织中有草酸钙簇晶。主脉可见双韧型维管束，上下表皮为厚壁组织，薄壁细胞中有草酸钙簇晶散在。

（2）丹皮酚的薄层色谱鉴别。按标准正文方法进行试验，结果供试品和对照品相同位置处显蓝褐色斑点，丹皮酚Rf值0.6。反应灵敏，重现性好。结果见图4。

图4逍遥竹薄层图谱（丹皮酚）

【检查】杂质测定：照杂质测定法（中国药典2015年版四部通则2301）测定本品的杂质，对5批样品进行测定，结果见表1。

表1杂质测定

根据以上测定结果，规定杂质不得过3%

水分测定：照水分测定法（中国药典2015年版四部通则0832第四法）测定本品的水分，对5批样品进行测定，结果见表2。

表2水分测定

根据以上测定结果，规定水分不得过15.0%

灰分测定照灰分测定法（中国药典2015年版四部通则2302）测定本品的总灰分和酸不溶性灰分，对5批样品进行测定，结果见表3。

表3总灰分测定

根据以上测定结果，规定总灰分不得过15.0%。

酸不溶性灰分与总灰分少3%－4%，意义不明显，故不作规定。

【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(中国药典2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，对5批样品进行测定，结果见表4。

表4浸出物测定

根据以上测定结果，规定浸出物不得少于10.0%。与饮片规定的15.0%有差距，本品茎占的比例较多，药典规定徐长卿（根）浸出物不得少于10.0%。15.0%要求过严。

【含量测定】丹皮酚（Paeonol）为本品最主要的有效成分，因而采用了测定本品中丹皮酚含量的方法来控制本品质量，具体实验研究过程如下；

1仪器与试药

高效液相色谱仪，戴安3000；检测器；戴安3000，记录仪；戴安3000，丹皮酚（Paeonol）对照品（批号110708-200505，中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂为分析纯。

2色谱条件

色谱柱：AelichromC18-100A4.6×250mm，柱前加保护柱。柱温30℃，甲醇-水（45:55）为流动相，流速1ml/min，检测波长为274nm。

3色谱条件的选择

流动相：甲醇-水（45:55）溶剂和吸收池的吸收度为0.078,且无干扰吸收峰，完全符合中国药典附录紫外分光光度法项下对溶剂的规定（A≤0.1）；检测波长：274nm；流速：1ml/min。此法主要参考了文献的含量测定方法，通过我们的具体实验证明本法能很好地将丹皮酚同其他各组分分离,色谱图见图5、6。

图5丹皮酚对照品色谱图

图6逍遥竹药材色谱图

4线性关系考察

精密称取丹皮酚24.57mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得标准溶液。分别吸取1、2、4、6、8、10μl的标准溶液注入液相色谱仪，进行分析测定，以丹皮酚的进样量为横坐标，峰面积值为纵坐标作图，绘制标准曲线，并计算回归方程Y=10.493X+4.2823，r=1。

表5线性关系考察

结果表明丹皮酚进样量在39.312~393.120µg范围内，呈良好的线性关系。

5提取方法及提取时间的选择

对于本品含量测定的提取方法及提取时间的确定，根据参考文献，采用了不同时间的超声波提取，结果见表6

表6提取方法及提取时间对含量影响结果

根据以上实验结果，确定采用超声波提取40分钟作为含量测定的提取方法。所用超声波的功率为250w，频率33kHz，本提取方法既可避免因长时间加热提取而使丹皮酚发生结构上的改变，同时也缩短了提取时间，并能提取完全。

6精密度试验

6.1重复性试验

取药材粗粉约0.5g，精密称定，共6份,分别置50ml量瓶中，照标准中含量测定的方法进行测定,结果见表7。

表7方法的重现性考察

结果表明丹皮酚重复性较好。

6.2中间精密度试验

取药材细粉约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，照标准中含量测定的方法制备作为供试品溶液。按拟定色谱条件分别于三台不同的色谱仪上测定丹皮酚的含量。结果见表8.

表8丹皮酚中间精密度结果(n=5)

7耐用性试验

7.1样品溶液稳定性试验

取样品溶液，在不同的时间内测定其峰面积，结果见表9。

表9方法稳定性考察表

结果表明在24小时内丹皮酚有较好的稳定性。

7.2不同的色谱柱的比较试验

取药材细粉约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，照标准中含量测定的方法分别在三根不同的色谱柱上测定丹皮酚的含量。结果见表10。

表10丹皮酚含量测定结果

结果表明丹皮酚在三根不同的色谱柱上测定结果间无明显差异。

8准确度试验

取本品细粉约0.5g，精密称定，共6份，分别加入丹皮酚标准品，按标准中含量测定的方法进行处理测定丹皮酚的含量，并计算丹皮酚的回收率，结果见表11。

表11回收率测定结果

9样品测定及含量限度的确定

分别取不同批次的药材细粉约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，照标准中含量测定的方法进行测定，测得各批次的含量见表12。

表12样品测定结果

根据以上测得的各批次的含量，将本品丹皮酚的含量定为不得低于0.6%。

上述数据中有一批低于0.6%，此批样品根占的较少。现在市售的样品，有许多将根除去了，仅保留了少量的全草。样品保存6年后，含量仅达到0.1%－0.2%,样品不宜久贮存。

【炮制】根据药材特性和临床用药需要确定。

【性味与归经】参考《中国药典》和《湖北省中药饮片炮制规范》记载，结合中医药理论，总结归纳而制定。

【功能与主治】参考《中国药典》和《湖北省中药饮片炮制规范》记载，结合中医药理论，总结归纳而制定。

【用法与用量】根据长期的临床应用实际制定，系指成人一日的常用量。

【贮藏】存放于常温的中药材库房。

参考文献：

[1]中国药典[M].一部，2010年版.

[2]湖北省中药饮片炮制规范(2009年版)