枣仁安神胶囊快速液相分析方法建立

枣仁安神胶囊快速液相分析方法建立

田蓓

田蓓（国药集团同济堂(贵州)制药有限公司550002）

【摘要】目的：建立快速液相分析方法测定枣仁安神胶囊中酸枣仁、丹参以及醋五味子含量测定，为制剂质量标准的控制提供依据。方法：采用快速液相分析方式，以AcclaimC18RSLCColumn，2.2μm，2.1×100mm为分析柱，柱温为30℃，流动相为乙腈、0.1%冰醋酸溶液，程序进样在线稀释的方式进行测定。结果与结论：建立快速液相分析方法对枣仁安神胶囊中的成分进行含量测定，方便准确。

【关键词】快速液相分析；枣仁安神胶囊；酸枣仁；含量测定【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-7165(2015)12-0112-03

枣仁安神胶囊主要含有三种成分即炒酸枣仁、丹参以及醋五味子，经乙醇回流提取后滤过；再将药渣加乙醇回流，滤过后合并两次滤液，浓缩为相对密度的稠膏；药渣进行二次煎煮，留取滤液再浓缩制成稠膏，加入适量淀粉混匀，制成颗粒装入胶囊即得[1-2]。本药物具有养心安神、补血养肝至功效，对于失眠、健忘等症状具有较好功效。本文中主要采用快速液相分析方法对其中酸枣仁、丹参以及醋五味子的含量进行测定，资料整理如下：1仪器与试剂1.1仪器DionexUltimate3000系列泵：DGP-3600RS(S/N：8081585)；自动进样器：WPS-3000TRS(S/N：8083433)；柱温箱：TCC-3000RS(S/N：8082026)；检测器：DAD-3000RS(S/N：8047772)1.2试剂酸枣仁对照品、五味子醇甲对照品、丹参酮ⅡA对照品购自中国药品生物制品鉴定所，枣仁安神胶囊供试品为贵州同济堂制药有限公司生产，国药准字Z20010033。

2方法与结果2.1酸枣仁的含量测定2.1.1色谱条件填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A：乙腈；流动相B：0.1%冰醋酸溶液；检测波长：320nm；理论板数：根据斯皮诺素峰计算≥4000；分析柱：AcclaimC18RSLCColumn，2.2μm，2.1×100mm，柱温：30℃；梯度条件：流速：0.8ml/min；进样体积：10ul。

2.1.2相关溶液的制备供试品溶液：取样品胶囊内容物(深褐色粉末)1.0g于50ml锥形瓶中，加70%甲醇50ml，密塞后进行称重，随后行30min超声处理，中途应不定时摇匀；静置至室温后再次进行称重；重量不足的以甲醇补充；充分摇匀，经滤过留取续滤液。

对照品溶液：斯皮诺素(C28H32O15)对照溶液(溶剂为纯甲醇)。

2.1.3测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含酸枣仁以斯皮诺素计，不得少于0.35mg。

梯度洗脱表

2.2五味子与丹参含量的测定2.2.1色谱条件填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相A：乙腈；流动相B：0.1%冰醋酸溶液；五味子检测波长：250nm；丹参检测波长：270nm；理论板数：根据斯皮诺素峰计算≥3000；分析柱：AcclaimC18RSLCColumn，2.2μm，2.1×100mm，柱温：30℃；梯度条件：流速：0.8ml/min；进样体积：10ul。

2.2.2相关溶液制备对照品溶液的制备分别取五味子醇甲对照品、丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含30μg、45μg的混合溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备取样品胶囊内容物(深褐色粉末)1.0g于50ml锥形瓶中，加70%甲醇50ml，密塞后进行称重，随后行30min超声处理，中途应不定时摇匀；静置至室温后再次进行称重；重量不足的以甲醇补充；充分摇匀，经滤过留取续滤液。

2.2.3测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

梯度洗脱表

3讨论通过本次实验以及图谱结果能够看出，快速液相检测方法准确可靠。在对药品中酸枣仁含量进行测定时，连续进样的图谱完全重叠，可见在15min的梯度洗脱过程中能够将样品完全洗脱分离，并不会引起交叉污染[3]。在本次实验中可以观察到，对照品溶液与供试品溶液直接进样后，会出现色谱峰的分叉现象，这可能是由于溶液极性远超出流动相的初始条件，在快速检测过程中，色谱柱与进样器间的体积非常小，容易导致较强的溶剂效应。为解决上述问题，我们可以在制备供试品溶液与对照品溶液时就加入10%乙腈进行稀释；在进行程序进样的方式时，利用在线稀释的方式解决问题。

参考文献[1]何新荣,刘萍,孙艳等.HPLC-ELSD测定枣仁安神胶囊中酸枣仁皂苷A的含量[J].中国药师,2011,14(4):497-499.[2]陈骁勇,葛玉松.高效液相色谱法测定安神胶囊中酸枣仁皂苷A含量[J].中国药业,2013,22(7):34-35.[3]高家荣,魏良兵,韩燕全等.复方枣仁安神胶囊质量控制研究[J].中国中医药信息杂志,2010,17(7):57-59.