尿蛋白检验的临床分析

/ 2

尿蛋白检验的临床分析

付东杰

付东杰(黑龙江省双鸭山煤炭总医院155100)

【关键词】尿蛋白检验临床分析

【中图分类号】R446.12【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)51-0146-02

1生理情况

正常时,肾小球毛细血管滤过膜允许分子质量<7万的蛋白质分子滤过;允许分子质量<4万的蛋白质自由通过,如清蛋白、β2微球蛋白、α2微球蛋白、溶菌酶等[1]。但能阻止血浆分子质量>7万的蛋白质分子滤过。清蛋白占总滤过蛋白的40%,滤过的清蛋白又几乎全部被近曲肾小管重吸收,故正常人尿液中清蛋白量仅为30~130mg/24h。一次随机尿中蛋白质为0~80mg/L,用加热醋酸法、磺基水杨酸法及试带法无法测出。尿蛋白>100mg/L或>150mg/24h尿时,蛋白质定性试验可阳性,则为蛋白尿。

2.病理情况

尿蛋白排泄增多超过上限就是蛋白尿,几乎是任何肾脏疾病的标志[2]。发生机理主要有3个:①肾小球毛细血管滤过膜损害:许多高分子质量血浆蛋白滤出,超过了肾小管重吸收能力,导致肾小球性蛋白尿;②肾小管损害及功能异常:抑制了肾小管的重吸收能力,尿中以低分子质量蛋白为主;③血浆正常或异常蛋白含量增多:超过肾阈而滤过,又超过肾小管重吸收能力所致。此外,肾小管本身虽可分泌某些蛋白,但分泌量增高极为罕见。常见病理性蛋白尿种类有:

2.1肾小球性蛋白尿:最为常见。蛋白尿可分两类:

2.1.1选择性蛋白尿:

标志性蛋白如清蛋白、转铁蛋白等。免疫球蛋白(清蛋白)清除率<0.1,尿蛋白定性3+~4+,定量超过3.5g/24h。常见于肾病综合征。

2.1.2非选择性蛋白尿:

标志性蛋白如免疫球蛋白等。免疫球蛋白(清蛋白)清除率>0.5,尿蛋白定性1+~44+,定量0.5~3.0g/24h。非选择性蛋白尿是一种持续性蛋白尿,有肾衰危险性,一般预后较差。常见于原发性或继发性肾小球疾病。

2.2肾小管性蛋白尿:

标志性蛋白为α1微球蛋白、β2微球蛋白、视黄醇结合蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制物C、N-乙酰-β-D葡萄糖胺酶(β-NAG)。尿清蛋白/β2-微球蛋白比值一般<10;而肾小球病变时,比值>300;混合性病变则比值界于两者之间。尿β2-微球蛋白、溶菌酶增高,尿清蛋白正常或轻度增高,尿蛋白定性1+~2+,定量1.0~2.0g/24h。常见于肾小管损害疾病。

2.3混合性蛋白尿:

特点是尿清蛋白和尿β2-微球蛋白同时增多,而各组分所占比值因病变损害部位不同而可不一致;也可因肾小球或肾小管受损害程度的不同而有所差异。

2.4溢出性蛋白尿:标志性蛋白为尿总蛋白增高、清蛋白正常。主要是血液中游离血红蛋白、肌红蛋白、本周蛋白、溶菌酶等增多,超过肾小管重吸收能力。尿蛋白定性多为1+~2+。常见于多发性骨髓瘤、骨骼肌严重创伤及大面积心肌梗死等。

2.5组织性蛋白尿:标志性蛋白为α2巨球蛋白、载脂蛋白A-I。指肾小管代谢产生的、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质(如Tamm-Horsfall糖蛋白)等。尿蛋白定性±~1+,定量0.5~1.0g/24h。

3.检验干扰因素

3.1分析前

3.1.1标本因素:尿蛋白测定结果与标本采集时气候、体力活动程度、营养状况和液体摄入等有关。特别是24h的尿量可有5~10倍变化,而在多尿期更可高达30倍之差。故一般采用次日清晨尿液,通常是相对可靠的检测标本。标本不应冷冻,否则将导致清蛋白和IgG丢失。标本保存:室温下7天;4~8℃稳定30天。如鉴别直立性蛋白尿,应采集2份12小时尿标本分别检测(1份昼尿,1份为卧床休息后夜间尿)。疑应激性蛋白尿时,应弃用第1次尿,在休息后重新采集第2次尿标本检测。尿蛋白标本应调节pH在5.0~6.0为宜,因尿pH≥9使尿蛋白测定假阳性,尿pH<3使尿蛋白测定假阴性。

3.1.2药物因素:可使尿蛋白假阳性的药物:①服用奎宁、奎宁丁、嘧啶等药物或尿中含有聚乙烯、吡咯酮、氯己定、磷酸盐、季铵盐消毒剂等,可导致尿液呈强碱性(pH≥9);②大剂量滴注青霉素时用磺基水杨酸法检测尿蛋白;③用高浓度有机碘造影剂(如胆影葡胺、泛影葡胺、碘番胺等)后的尿液,用磺基水杨酸法检测尿蛋白。

可使尿蛋白假阴性的药物:如大剂量滴注青霉素(≥4万U/ml)或用庆大霉素时,用试带法检测尿蛋白。

3.2分析中:尿蛋白测定有定性试验如试带法、加热乙酸法和磺基水杨酸法;定量方法更多,如硫酸钠法,染料结合法(如丽春红S、考马斯亮蓝、溴酚蓝法)等。各种方法差异可使测定结果不同。不同尿蛋白测定方法对不同类型蛋白质检测的灵敏度亦不同:

3.2.1试带法:当尿球蛋白<4000mg/L时,尿蛋白测定可阴性;当清蛋白、球蛋白比值为1∶2时,同时蛋白浓度高达2000mg/L时,才有阳性反应;因试带法对球蛋白的灵敏度只有清蛋白的1/100~1/50,故此法会漏检本周蛋白,只适合作尿蛋白的筛选试验。

3.2.2磺基水杨酸法:CLSI将该法作为干化学法检测尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。该法检测对清蛋白的灵敏度(50mg/L)高于球蛋白,当浓度同为2000mg/L时,清蛋白可2+,球蛋白仅1+。适合作尿蛋白筛选试验。

3.2.3加热醋酸法:为尿蛋白定性的经典方法,特异性强,干扰因素少,故对疗效观察或预后判断时,可作为确证试验。此法对清蛋白与球蛋白检测的灵敏度相同(150mg/L),对单纯球蛋白尿具有特殊反应,提示本法可能是高度非选择性蛋白尿的过筛试验。

参考文献

[1]夏熊芳;健康人群尿蛋白成分与肾小球滤过率及颈动脉内中膜厚度增龄变化关系研究[D];中南大学;2008年

[2]张丽珍;;尿蛋白在早期肾损伤中的应用[J];实用医技杂志;2008年16期