胚胎发育速度及解冻后体外培养时间对FET妊娠结局的影响

胚胎发育速度及解冻后体外培养时间对FET妊娠结局的影响

符文卉高士友邓朝晖柳朝华高金玉

南省妇幼保健院湖南长沙410008

摘要：目的：本文主要探讨胚胎发育速度及解冻后体外培养时间对FET妊娠结局造成的影响，为FET周期选择较高植入潜能和发育潜能的胚胎提供参考。方法：对我院2013年5月至2015年5月期间生殖中心收治的FET助孕患者进行回顾性分析，共1375个FET周期，进行实验室处理、黄体支持、胚胎冷冻等一系列的措施。结果：本次研究共有1375个FET周期，解冻了4527枚胚胎，其中，共移植了2940枚胚胎，876枚胚胎着床，着床率为30.18%。1375个FET周期中，获得临床妊娠的有659个周期，临床妊娠率为47.9%。结论：冷冻胚胎解冻移植成功妊娠率和胚胎冷冻前的发育速度有着非常密切的联系，>8或者6和8细胞之间的胚胎在FET周期内都可以获得较好的妊娠率和种植率，但是相对而言，>8细胞的胚胎要高于6和8之间的细胞胚胎，这和存活胚胎卵裂球丢失与否没有明显的关系。

关键词：胚胎发育速度；解冻；体外培养时间；FET；妊娠结局

胚胎冷冻保存是指借助于降温措施和专门的保护剂对早期动物的胚胎实施冷冻，使胚胎在温度为零下196摄氏度左右的液氮中停止细胞的生化活动，延缓新陈代谢的速度，使其在复苏之后又可以尽快恢复代谢的能力，最终实现胚胎的长期保存。无论是在冻融周期，还是新鲜周期，优先移植发育潜能较好的胚胎，有助于降低多胎率，提高种植率[1]。本次研究目的在于探讨胚胎发育速度及解冻后体外培养时间对FET妊娠结局造成的影响，为FET周期选择较高植入潜能和发育潜能的胚胎提供参考，结果较为满意，现报告如下。

1.资料与方法

1.1临床资料

对我院2013年5月至2015年5月期间生殖中心收治的FET助孕患者进行回顾性分析，共1375个FET周期。

纳入标准：（1）FET周期移植3个左右的卵裂期胚胎，体外受精指征为排卵障碍、子宫内膜异位、输卵管因素等。卵泡浆内单精子注射指征是指男性存在非常严重的少弱精子症、前次体外受精失败、逆行射精或者阻塞性无精子症。卵泡浆内单精子注射的精子主要来源于睾丸活检、附睾抽吸以及射精；（2）新鲜周期取消移植或者移植失败，3个月内使用无垂体降调节的激素、促排卵周期、自然周期以及人绒毛膜促性腺激素等来取代周期冻融胚胎移植；（3）取卵周期选择拮抗剂方案、标准黄体中期长方案；（4）符合体外受精、卵泡浆内单精子注射治疗的标准。使用双变量相关分析方法对FET妊娠结局相关性指标进行确定[2]。

1.2方法

将冷冻前D3胚胎卵裂球术将冻融移植周期胚胎分为三组，即：A组：6-8细胞；B组：<6细胞；C组：>8细胞。根据胚胎解冻后体外培养时间分为两组，即：D组：解冻后体外培养时间为2-4小时，第三天进行移植；E组：解冻后体外培养时间为18-24小时，第四天进行移植。将解冻后体外培养时间为2-4小时的D组根据胚胎卵裂球复苏情况分为两组，即：D1组：移植的所有胚胎卵裂球全部存活，没有丢失情况；D2组：移植的所有胚胎至少丢失了一个卵裂球，丢失率低于50%。将体外培养时间为18-24小时的E组根据胚胎恢复是否有丝分裂分为两组，即：E1组：所有胚胎均恢复有丝分裂的FET周期组；E2组：部分胚胎均恢复有丝分裂的FET周期组[3]。

1.3处理方法

根据男性精液处理后的质量决定是体外受精还是卵泡浆内单精子注射。在受精后16-18小时期间进行原核观察，是受精后44小时左右进行D2胚胎观察，在受精后68小时左右进行D3胚胎观察。取卵后72小时，根据患者过去的移植情况、实际年龄以及是否存在OHSS症状，为患者选择所有胚胎中质量最好的1-3枚进行移植[4]。

1.4统计学方法

本次研究使用SPSS13.0软件数据包对研究所得数据进行统计学分析，以%或者（±s）表示结果[5]。P<0.05，差异明显，具有统计学意义；反之，不具有统计学意义。

2.结果

2.1本次研究共有1375个FET周期，解冻了4527枚胚胎，其中，共移植了2940枚胚胎，876枚胚胎着床，着床率为30.18%。1375个FET周期中，获得临床妊娠的有659个周期，临床妊娠率为47.9%。FET妊娠结局和FET周期子宫内膜准备方案、FET移植原因、受精方式、助孕方案以及妊娠结局没有明显的关系，P>0.05。和冷冻胚胎解冻后体外培养时间以及新鲜周期胚胎的发育速度有关系，P<0.05。

2.2A组、B组和C组在每周期移植胚胎数量、子宫内膜厚度、FET周期子宫内膜准备方案构成比、新鲜周期受精方式构成比以及新鲜周期促排方案构成比、不孕年限以及年龄等方面没有统计学意义（P>0.05）。三组在胚胎种植率、临床妊娠率以及胚胎复苏率等方面有明显的差异（P<0.05）.三组在解冻后的100%卵裂球存活率、自然流产率以及多胎率等方面没有明显的关系，P>0.05。将非100%存活周期和100%存活周期的妊娠结局进行对比，在自然流产率临床妊娠率以及胚胎种植率等方面不具有统计学意义（P>0.05）。

2.3对D组和E组患者在每移植周期胚胎数、子宫内膜厚度、FET子宫内膜准备方案构成比、受精方式构成比以及新鲜周期促排卵方案构成比等混杂因素对助孕结局造成的影响进行分析，logistic回归分析结果表明，两组患者在多胎妊娠率、自然流产率、临床妊娠率以及胚胎种植率等方面不具有统计学意义（P>0.05）。

2.4D1组和D2组在多胎妊娠率、自然流产率、临床妊娠率以及胚胎种植率等方面不具有统计学意义（P>0.05）。

2.5E1组和E2组在多胎妊娠率、临床妊娠率以及胚胎种植率等方面具有统计学意义（P<0.05），在自然流产率方面不具有统计学意义（P>0.05）。

3.讨论

本次研究结果表明：冷冻胚胎解冻移植成功妊娠率和胚胎冷冻前的发育速度有着非常密切的联系，>8或者6和8之间的细胞胚胎在FET周期内都可以获得较好的妊娠率和种植率，但是相对而言，>8细胞的胚胎要高于6和8之间的细胞胚胎，这和存活胚胎卵裂球丢失与否没有明显的关系。解冻之后，胚胎的体外培养时间不会对FET周期助孕结局造成不良影响，并且体外培养环境中胚胎发育不良并不表示在体内也会发育不良[6]。此外，解冻之后，对体外培养时间适当延长之后，移植的胚胎全部恢复有丝分裂，获得了较好的临床妊娠率和胚胎种植率。但是与此同时，多胎妊娠的风险也在随之增加，提高了妊娠后期产科并发症的发生率。此外，鲜胚周期移植发育速度缓慢的胚胎和FET发育速度缓慢的胚胎的妊娠率，前者低于后者，更加凸显了周期中对于这类胚胎冷冻的价值。

参考文献：

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[2]贺玲，陈雷宁，谭洪川，全松.注射黄体酮日血清黄体生成激素水平对无垂体降调节的HRT-FET周期妊娠结局的影响[J].广东医学，2013，17：2641-2644.

[3]马晓娟，孙丽君，宋娜，孙革青，胡继君，董孝贞，齐若凡.影响冻融胚胎移植妊娠结局的相关因素分析[J].生殖与避孕，2014，08：677-680.

[4]车海沙，朱琳，肖岚，李艳萍.子宫内膜蠕动波频率对冻融胚胎移植妊娠结局的影响[J].生殖与避孕，2014，10：824-829.

[5]谭舒尹，张波，周红，冯贵雪，周莉，刘茵.输卵管积水及其处理方法对冻融胚胎移植妊娠结局的影响[J].中国计划生育学杂志，2010，08：479-481.

[6]徐步芳，冯云，王枫钊，牛志宏，陈骞，张爱军.胚胎移植日子宫内膜运动波对冻融胚胎移植周期妊娠结局的预测价值[J].中华临床医师杂志（电子版），2011，14：4033-4037.

[7]柳朝华，高士友，邓朝晖，阳翎，陈辉莲，汤倩倩.胚胎因素对冷冻胚胎移植周期结局的影响[J].海南医学院学报，2010，05：604-607.